NEPA21原位貼壁電轉(zhuǎn)人原代脂肪前體細胞成功

      人脂肪前體細胞（Human Preadipocytes，HPAd）來源于人脂肪組織，呈成纖維狀，經(jīng)誘導可分化為成熟的脂肪細胞（Human Adipocytes，HAd）。HPAd來源的HAd常被用來研究胰島素誘導的葡萄糖轉(zhuǎn)運、生長激素增強的脂類分解以及肥胖基因的表達等。HPAd和HAd可用于體外研究肥胖的原因和治療、II型糖尿病以及心血管疾病的模型。有趣的是，源于人網(wǎng)膜脂肪組織的HPAd和HAd在脂類分解和leptin表達上與源于皮下脂肪組織的存在顯著差異。
      眾所周知，原代細胞的轉(zhuǎn)染是不容易實現(xiàn)的，HPAd同樣如此，普通的轉(zhuǎn)染試劑，如脂質(zhì)體等，基本轉(zhuǎn)不進去，即使用病毒感染，效率也很低。電轉(zhuǎn)染理論上可以作用于任何種類的細胞，但是由于技術(shù)的限制，電轉(zhuǎn)染技術(shù)一直未能在動物細胞領(lǐng)域廣泛應用。NEPA21采用全新設(shè)計的電轉(zhuǎn)程序，特別適用于難轉(zhuǎn)染細胞、離體組織或動物活體的轉(zhuǎn)染。配合獨有的電壓衰減（Voltage Decay）設(shè)計，NEPA21可在獲得高轉(zhuǎn)染效率的同時，提高細胞存活率。

      2013年3月27日，華粵行細胞生物學團隊在南京醫(yī)科大學進行的人脂肪前體細胞進行的原位貼壁電轉(zhuǎn)DEMO，盡管電轉(zhuǎn)前細胞融匯度已經(jīng)近乎100%，可是最佳轉(zhuǎn)染程序組的轉(zhuǎn)染效率仍能達到約35%，細胞存活率在95%以上。兩個課題組的老師對電轉(zhuǎn)染的效果給予了高度的評價。

     3T3-L1(Mouse embryonic fibroblast - adipose like cell line)雖為脂肪前體細胞系，但是用普通的轉(zhuǎn)染方法，同樣不容易獲得較高的轉(zhuǎn)染效率。而電轉(zhuǎn)實驗結(jié)果的顯示（如下圖），NEPA21可以高效地轉(zhuǎn)染該種細胞及其分化成熟的脂肪細胞。

 
Preadipocytes, Fibroblast like before differentiation（In Suspension）

Adipocyte-like after differentiation(In Adherence)