在細胞相關(guān)研究中,準(zhǔn)確和高效評估細胞培養(yǎng)的質(zhì)量至關(guān)重要,它影響著下游的研究、分析。通常情況下,細胞數(shù)和細胞大小這些常用細胞參數(shù)都是用肉眼測定這種比較主觀的方法,既耗時又不可靠,往往產(chǎn)生不正確的結(jié)論進而對下游的研究造成嚴重影響。法國Bertin Technologies公司的InCellis智能成像系統(tǒng)發(fā)布了內(nèi)置細胞融合度檢測App,完美解決了這一問題,簡單的幾步操作就可完成貼壁細胞細胞融合度的自動計算。
方法
MCF7(胸腺癌細胞)培養(yǎng)于37℃的DMEM培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中。然后使用InCellis智能成像系統(tǒng)的細胞融合App進行后續(xù)3天的細胞融合度測定,每隔24小時測定一次。
在培養(yǎng)的day-1、day-2和day-3的相同時間點,分別使用10×和20×倍率在相差模式下記錄一系列照片以進行準(zhǔn)確的融合度計算,每組記錄使用4個不同視野。
結(jié)果
在細胞融合度小于70%時,肉眼下會存在很多不均勻的區(qū)域從而會因研究者的主觀因素而造成統(tǒng)計結(jié)果的較大誤差,而使用融合度App,可以通過不同視野下的比對,從而消除這一誤差,產(chǎn)生非常穩(wěn)定可靠的統(tǒng)計結(jié)果(小于10%標(biāo)準(zhǔn)差)。在本融合度App中,使用10×或20×倍率下4個不同視野進行統(tǒng)計分析。
這里同時給出了使用Malassez血細胞計數(shù)板和InCellis智能成像系統(tǒng)內(nèi)置細胞計算App進行細胞計算的結(jié)果,三者都具有非常好的一致性。(如上圖所示)
結(jié)論
InCellis智能成像系統(tǒng)的細胞融合度App提供了非?煽康淖詣蛹毎诤隙确治,快捷、高效、結(jié)果非常穩(wěn)定且無主觀因素的影響。
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