Tecan Infinite 酶標(biāo)儀助力中藥活性成分的研究

瀏覽次數(shù)：11248　發(fā)布日期：2018-5-23　來源：本站　本站原創(chuàng)，轉(zhuǎn)載請注明出處

中醫(yī)和草藥，與針灸、按摩、運動及食養(yǎng)一起，為治療許多病癥提供了替代方案。盡管有超過2,500年的知識傳承和經(jīng)驗，這些草藥的作用方式卻鮮為人所知。目前，浙江大學(xué)藥學(xué)院正通過現(xiàn)代的實驗技術(shù)來識別這些藥物背后繁雜的活性成分，以及成分之間的協(xié)同作用。

許多現(xiàn)代藥物，從阿司匹林、可待因到化療藥物紫杉醇（Taxol®），都是從天然原料中提取的。實際上，從1981至今，接近50%的經(jīng)過臨床驗證的藥物都是直接或間接從天然產(chǎn)物中提取而來（1）。隨著小分子藥物研發(fā)管線的低迷，許多公司開始轉(zhuǎn)向植物藥產(chǎn)品，作為新的原料藥的來源。而問題在于，只有非常少的中藥經(jīng)過研究，得以識別其中的有效成分。

浙江大學(xué)藥學(xué)院正在分析超過300種中藥，致力于揭示傳統(tǒng)醫(yī)藥的秘密。王毅教授解釋道：“我們最主要的挑戰(zhàn)，就是幾乎所有的草藥提取物都具有非常復(fù)雜的化學(xué)組成。利用色譜分離后，經(jīng)常會得到成百甚至上千種成分，這使得確認(rèn)有效成分，或有效的成分組合非常困難。對此，我們先分離出粗提物，再把這些粗提物按照大小、親水性等進(jìn)一步分離成單個組分。在過去的10年里，我們已經(jīng)建立了超過30,000種組分的成分庫。我們用它對細(xì)胞或者特定的分子靶標(biāo)進(jìn)行篩選�！�

“我們使用了Infinite F200多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行了大量的篩選實驗，包括一些細(xì)胞毒性實驗來識別抗腫瘤和抗氧化成分。Infinite酶標(biāo)儀的使用非常簡便，并且配有自動加樣模塊，這讓我們可以快速的篩選大量的成分。近期，為了擴(kuò)展篩選的通量，我們又購置了配備光柵的Infinite M1000，幫助我們實現(xiàn)更加靈敏、更加靈活的新應(yīng)用�！�
“Infinite M1000可以按照需要選擇波長。我們設(shè)計了幾種熒光探針，能夠報告特定酶活性的上調(diào)或者下調(diào)。舉個例子，我們成功地設(shè)計了一個針對去乙�；�(sirtuin)1活性的探針。去乙�；副徽J(rèn)為是一類在細(xì)胞內(nèi)起調(diào)控作用的蛋白，而這種蛋白過去是無法利用光譜方法檢測的。我們使用這個探針測試了近200種可能對去乙�；赣屑せ罨蛞种谱饔玫膫溥x成分，并找到了13種有效成分。相比隨機(jī)篩選來說，命中率相當(dāng)?shù)母摺！?BR>
王教授繼續(xù)說道："許多中藥似乎是依賴多項成分之間的協(xié)同作用，而非依靠單一組分。盡管我們已經(jīng)找到許多有效的單一組分，但是大多數(shù)情況下，它們的藥效比相似的、國際上已經(jīng)注冊的小分子藥物要弱一些。反過來，一些組分的協(xié)同作用，能夠產(chǎn)生更大的細(xì)胞反應(yīng)。研究藥物的協(xié)同作用，需要準(zhǔn)確無誤地將微量的多種藥物以復(fù)雜的組合移入微孔板，人工操作是非常困難的。幸運的是，作為訪問學(xué)者在美國波士頓的麻省總醫(yī)院工作期間，我得以使用D300皮升級超微量加樣器進(jìn)行抗癌藥物的篩選。這真的是一種非常強(qiáng)大的藥物篩選工具，它的數(shù)位分配技術(shù)能夠?qū)︙w積極小的成分進(jìn)行非常準(zhǔn)確的分配。所以當(dāng)我一回到中國，它就成為了我首先想要購置的儀器。”

Tecan D300e 超微量數(shù)碼加樣儀

“D300最大的優(yōu)勢是它能夠根據(jù)設(shè)定，自動計算每一種組分在每一個孔內(nèi)的移液體積，并準(zhǔn)確進(jìn)行分配。它的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性非常好，特別是對于非常敏感的細(xì)胞活性實驗，它能夠得到非常漂亮的量效關(guān)系曲線，來幫助我們選擇最好的藥物成分配比。”

1) Newman, DJ, Cragg, GM. Natural products as sources of new drugs over the 30 years from 1981 to 2010. J Nat Prod, 2012, 75(3), 311-35.

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