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MD發(fā)布實(shí)驗(yàn)應(yīng)用,進(jìn)行更高水平的細(xì)胞因子檢測(cè)

瀏覽次數(shù):3714 發(fā)布日期:2018-9-10  來(lái)源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處

 

充分發(fā)掘微孔板讀板機(jī)特點(diǎn)及優(yōu)勢(shì)
——進(jìn)行更高水平的細(xì)胞因子檢測(cè)

 

眾所周知,目前人類(lèi)許多疾病的發(fā)生過(guò)程都或多或少與細(xì)胞因子變化有關(guān)系,如腫瘤、糖尿病、神經(jīng)退行性疾病等等。細(xì)胞因子(Cytokine,CK)其實(shí)就是一類(lèi)能在細(xì)胞間傳遞信息,可分為白細(xì)胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子、集落刺激因子、生長(zhǎng)因子和趨化性細(xì)胞因子等六類(lèi)。


正常情況下,細(xì)胞因子的表達(dá)和分泌受機(jī)體嚴(yán)格的調(diào)控,但在病理狀態(tài)下,細(xì)胞因子會(huì)出現(xiàn)異常性表達(dá)。例如細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的變化,其發(fā)生過(guò)程涉及到細(xì)胞膜或細(xì)胞內(nèi)受體接受細(xì)胞外的分子信號(hào)刺激,這些細(xì)胞外的分子信號(hào)就包括細(xì)胞因子、激素、生長(zhǎng)因子等等,我們可以通過(guò)細(xì)胞因子的檢測(cè)來(lái)診斷某種疾病的發(fā)生。


細(xì)胞因子檢測(cè)主要基于免疫學(xué)檢測(cè)方法、生物學(xué)檢測(cè)方法和分子生物學(xué)檢測(cè)方法,三種檢測(cè)方法各有優(yōu)劣,如生物學(xué)檢測(cè)方法中利用動(dòng)物模型來(lái)檢測(cè)細(xì)胞因子的含量變化,可反映動(dòng)物體內(nèi)生物活性、參考價(jià)值大,不足之處在于成本較高、步驟繁瑣等,所以應(yīng)用較少。


目前較為被大家所常用的方法是免疫學(xué)檢測(cè)法和分子檢測(cè)法,而免疫學(xué)檢測(cè)方法更為常用。包括ELISA法、免疫斑點(diǎn)法、免疫熒光法、RIA檢測(cè)方法等,其中廣泛使用的就是ELISA法。與之配套檢測(cè)的多功能酶標(biāo)儀/檢測(cè)系統(tǒng),因其具有光吸收、熒光、發(fā)光、熒光偏振和時(shí)間分辨熒光等多種檢測(cè)功能,我們不僅可以利用其光吸收功能針對(duì)細(xì)胞因子進(jìn)行ELISA,也可借助其熒光功能或熒光偏振功能針對(duì)微量表達(dá)的細(xì)胞因子進(jìn)行高通量、高靈敏度的檢測(cè)。市面上已相繼開(kāi)發(fā)出針對(duì)不同需求不同目的應(yīng)用的ELISA試劑盒。

 

 

如Sword ELISA Boosters,是由Sword Diagnostics 公司開(kāi)發(fā)出的新一代熒光ELISA 檢測(cè)技術(shù),它可直接替代傳統(tǒng)光吸收ELISA 檢測(cè)試劑,將靈敏度提升30倍。原理是基于Sword 分子在辣根過(guò)氧化物酶 (HRP) 存在下轉(zhuǎn)化為共振拉曼活性底物,共振拉曼信號(hào)則在微孔讀板機(jī)上檢測(cè)。由于在低濃度下有著極高水平的酶/底物相互作用,產(chǎn)生出更多的共振拉曼活性分子,從而增強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)的性能表現(xiàn)。

 

 

傳統(tǒng)的ELISA技術(shù)雖然在靈敏度上不及熒光及熒光偏振等方法,但是新的技術(shù)的加入使得較傳統(tǒng)檢測(cè)的時(shí)間大大縮短,如Abcam公司的 SimpleStep ELISA 試劑盒,它可將 ELISA 實(shí)驗(yàn)時(shí)間從 260 分鐘減少到 90 分鐘,保證實(shí)驗(yàn)的靈敏度和重復(fù)性。

 

 

以上可見(jiàn),多重檢測(cè)手段結(jié)合全新檢測(cè)技術(shù),能讓我們?cè)诮?jīng)典方法的基礎(chǔ)上持續(xù)發(fā)掘出更靈敏、更快捷的方式,以滿足我們更高的檢測(cè)需求。

 

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