新芝生物高通量組織研磨儀助力"非洲豬瘟"樣品處理

八戒：猴哥救我！ 
悟空：呆子，何事慌張！ 
八戒：猴哥你沒聽說嗎！非洲豬瘟來了，一個被傳染，一窩都遭殃啊！我聽說遼寧、黑龍江、吉林、江西、福建、四川好多兄弟都已經(jīng)被撲殺了。 
悟空：呆子！那還不離我遠點！ 

問題一、什么是非洲豬瘟？

非洲豬瘟（African Swine fever，ASF）是由非洲豬瘟病毒（African Swine fever virus，ASFV）感染家豬和各種野豬（不傳染人）引起一種急性、出血性、烈性傳染病。其特征是發(fā)病過程短，最急性和急性感染死亡率高達100%，且只能依靠實驗室監(jiān)測確診。    
2018年8月3日我國確診首例非洲豬瘟疫情。

問題二、目前在中國的傳染范圍？

自8月初我國首次發(fā)現(xiàn)非洲豬瘟以來，截至11月22日，全國有20個省份47個市（區(qū)、盟）發(fā)生73起家豬疫情、1起野豬疫情，累計撲殺生豬60萬頭。全國非洲豬瘟疫情呈現(xiàn)多點散發(fā)狀態(tài)，但在各地動物疾控部門的積極行動下，疫情開始趨于平穩(wěn)，總體防控有效。

 問題三、非洲豬瘟檢測的樣品處理方法介紹
 一、非洲豬瘟樣品處理 
 1. 目的

規(guī)范ASFV樣品和實驗材料的處理程序，保證ASFV相關(guān)實驗的順序開展和實驗室的生物安全。

 2. 適用范圍

適用于疑似ASFV臨床樣品的實驗前的處理

 3. 程序 
 3.1實驗材料

ASF的易感動物，主要為家豬、野豬和蜱，通常采集的樣品為家豬、野豬的血液樣品、組織樣品以及蜱三類。田間采集的樣品通常需要經(jīng)過簡單的預處理，才能進行后續(xù)的檢測、診斷工作。

 血清：用于病毒核酸檢測、病毒抗原和抗體檢測。將采好的豬血的注射器或采血管在室溫下傾斜靜止2~4h（防止暴曬），或置于37℃溫箱內(nèi)1h，待大部分血清析出后，取出血清，必要時經(jīng)離心分離血清。（最低建議量5ml）。

 抗凝全血：用于病毒核酸檢測和病毒抗原檢測。 
 采血前，在真空采血管或注射器內(nèi)按比例加入抗凝劑。采集血液，輕輕上下顛倒，使血液與抗凝劑充分混勻，防止血液凝固的同時避免溶血。也可以將血液放入裝有玻璃珠的滅菌瓶內(nèi)，震蕩脫落纖維蛋白。必要時，可加入雙抗以抑制血源性或采血過程中可能出現(xiàn)的細菌污染。 
 當血樣用于病毒核酸檢測時，一般不用肝素而選用EDTA作為抗凝劑。（最低建議量1mL）。

 組織樣本：活體采集，采用扁桃體，用于臨床健康動物ASF監(jiān)測。 
 尸體剖檢ASF發(fā)病動物或死亡動物經(jīng)解剖取材，包括：ASFV靶器官的采集：脾臟、淋巴結(jié)、腎臟、扁桃體。

 其他病變組織臟器的采集：采集具有明顯病變的肝臟、肺臟、心臟等組織器官，選取部位在病變和健康組織交界處。

 腐敗動物尸體的樣品采集：剖檢取股骨，將附著的肌肉和韌帶等全部剔除，采集骨髓。最低建議量5克。

 蜱的采集：蜱可進行核酸檢測、抗原檢測和蜱的形態(tài)學鑒定，查找豬圈的墻邊、墻縫、木質(zhì)或瓦質(zhì)的屋頂，或挖掘豬圈地面均可能找到蜱，也可查看豬表皮，采集蜱。

 1-1樣品保存條件

注：用于病毒分離和病理學檢測的樣品禁止-20℃保存。

3.2實驗器材和試劑

1. 臺式高速冷凍離心機、組織研磨儀、水浴鍋、計時器、冰箱和移液器等。

2. 無菌的剪子、鑷子、鋼珠、2mLEP管、移液器吸頭（10μL,200μL、1000μL）等。

3. 其他試劑和耗材主要包括：0.01mol/L PBS（PH7.2）、0.8%NaOH、75%酒精棉球等。

3.3樣品處理程序 
3.3.1血清及全血樣品處理 
取血清或全血樣品1mL于滅菌EP管里，保存?zhèn)溆?nbsp;
3.3.2組織樣品處理 
適用于脾臟等組織樣品和蜱的處理。盡可能減少污染，每取一個組織塊或蜱，用火焰消毒剪鑷等取樣器械，組織塊應分別放入滅菌容器內(nèi)并立即密封，做好標記，注意防止組織間相互污染。 
3.3.2.1組織樣品的處理應在二級生物安全柜中進行，勿使液體濺到生物安全柜中。 
3.3.2.2將0.1-0.2g組織塊放入2mLEP管中，用剪刀剪成碎塊，加1-2mL0.01mol/L PBS（PH7.2）,再加入1-2粒滅菌鋼珠，密封后，表面消毒備用。剩余樣品放回容器內(nèi)，重新密封，表面消毒后保存-70℃冰箱。 
3.3.2.3組織樣品的破碎可以利用組織研磨儀在生物安全柜外操作，將樣品制成組織懸液。 
重磅推薦使用Scientz-48L冷凍型高通量組織研磨器�。。。�

3.4病毒滅活

病毒的滅活處理應在二級生物安全柜中進行，將處理好的血清、全血或者研磨破碎后的組織樣品連同EP管放入60℃水浴中，放置30min滅活。

3.5使用后儀器處理

剪刀、鑷子等均應放入消毒缸進行消毒，放入鐵飯盒內(nèi)，并裝入密封袋內(nèi)進行高壓滅菌處理。裝有組織樣品保存液的容器和盛有組織塊的離心管應密封管口，表面消毒后放入密封袋中高壓滅菌。鋼珠、吸頭等廢棄物應用0.8%NaOH浸泡30分鐘消毒后，置密封袋內(nèi)高壓滅菌。消毒殘液應裝入密封容器內(nèi)高壓滅菌處理。 

3.6注意事項

操作之前要確認生物安全柜和實驗室已進行了徹底的衛(wèi)生消毒處理，防止樣品間交叉感染。

二、非洲豬瘟病毒的核酸檢測可用實時熒光PCR配套相應實際進行，具體操作步驟以儀器生產(chǎn)公司指南為準。

問題四、病毒殺滅和防控方式

非洲豬瘟病毒雖然在環(huán)境中比較穩(wěn)定，但在豬肉烹煮處理過程中較易失活，70℃-75℃加熱30分鐘以上，病毒就會被殺滅，也就是說我們?nèi)粘Ｅ腼冞^程中只要把豬肉熟透(包括最中間部位溫度至少達到70℃以上)，即使有病毒也會很快失去感染力并喪失活性。

新芝生物Scientz-48L冷凍型高通量組織研磨器介紹

新芝生物推出的Scientz-48L冷凍型高通量組織研磨器具備以下特征： 
1.應用場景多樣。可以對不同組織進行干磨、濕磨、混合以及均質(zhì)化處理。 
2.實驗效率高。能提高提取大通量樣品中核酸的效率和質(zhì)量。 
3.實驗過程安全。研磨過程采用封閉式一次性離心管，有效地避免了樣品交叉污染。 
4.儀器穩(wěn)定性好。對同一組織樣品可設定相同的研磨程序，從而獲得相同的研磨效率，提高了實驗的可重復性。 
5.研磨效果好。產(chǎn)品采用高效研磨球進行研磨，相較于傳統(tǒng)研磨方式對樣品的研磨更為均勻、充分。

目前，新芝生物Scientz-48L冷凍型高通量組織研磨器已助力沈陽、大連、朝陽、本溪、鞍山、錦州、葫蘆島等多地動物疾控中心用于非洲豬瘟檢測實驗的樣品前處理。 
Scientz-48L冷凍型高通量組織研磨器高效、穩(wěn)定、安全的儀器特性很好地解決了檢測過程中檢測樣品數(shù)量多、實驗一致性難以控制等問題，得到了廣大用戶的一致好評。 

產(chǎn)品用途 
1.適用于各種植物組織包括根、莖、葉、花、果、種子等樣品的研磨破碎；
2.適用于各種動物組織包括大腦、心臟、肺、胃、肝臟、胸腺、腎臟、腸、淋巴結(jié)、肌肉、骨骼等樣品的研磨破碎；
3.適用于真菌、細菌等樣品的研磨破碎；
4.適用于食品、藥品成分分析檢測的研磨破碎；
5.適用于易揮發(fā)樣品包括煤炭、油頁巖、蠟制品等樣品的研磨破碎；
6.適用于塑料、聚合物包括PE、PS、紡織品、樹脂等樣品的研磨破碎。

主要技術(shù)參數(shù) 
1.時間設定：1(秒)-9999(秒) 
2.頻率設定：10-70Hz，即振蕩300-2100次/min
3.額定功率：180W 
4.夾具行程：34mm(垂直) 
5.溫度設置 : -20℃或者-30℃
6.電磁鎖控制開門 
7.樣品容量：隨機標配：鋁合金適配器5ml 12孔，2ml 48孔 

可選配：鋁合金適配器2ml24孔 

8.電源需求：220V單相交流，＜2.5A 

新芝生物公司簡介

寧波新芝生物科技股份有限公司（股票代碼：430685）始創(chuàng)于1989年，公司總部位于寧波市國家高新區(qū)，注冊資金6102萬元，是全球知名的生物樣品處理設備提供商，也是國內(nèi)超聲波技術(shù)應用探索的先行者。

依托強大的科研技術(shù)實力，公司在超聲波、溫濕度、高低壓、超低溫等技術(shù)層面積累了豐厚的經(jīng)驗，并先后研究開發(fā)包括生物樣品前處理儀器、分子生物學儀器、實驗室潔凈設備、冷凍干燥設備、工業(yè)防垢除垢設備、環(huán)保除藻防控設備在內(nèi)的多款產(chǎn)品。公司始終堅持業(yè)界前沿的技術(shù)研究和應用開發(fā)，致力于為科研、教育、環(huán)保、醫(yī)療、制藥、石化、農(nóng)林、材料等領域客戶提供先進的產(chǎn)品設備和行業(yè)解決方案。

公司目前擁有寧波、杭州兩地四大研發(fā)中心，擁有高水平研發(fā)人員數(shù)十人，專利60余項。公司曾多次承擔國家科技部、發(fā)改委、衛(wèi)生部重大科研項目，是國家發(fā)改委高技術(shù)產(chǎn)業(yè)化示范工程中心、科學儀器產(chǎn)業(yè)化基地、寧波企業(yè)工程（技術(shù)）中心。公司研制的高壓氣體基因槍一舉打破國外技術(shù)壟斷，填補國內(nèi)相關(guān)領域空白，榮獲浙江省科技進步二等獎。

公司高度重視品牌培育和市場開拓，為更好地服務客戶，公司在全國各地建有30余個辦事處，辦事處均配備銷售工程師和售后工程師，可隨時滿足客戶需求。全球超過15,000家實驗室在使用新芝生物的產(chǎn)品，各類儀器設備市場保有量超過100,000臺套，產(chǎn)品遠銷美、英、法、俄、日、韓等36個國家，公司年度銷售收入突破1億元人民幣，已經(jīng)成為國內(nèi)乃至全球知名的生物樣品制處理設備研制專家。

新芝生物30年風雨兼程，以新致心，將繼續(xù)致力于為各行業(yè)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和貼心的服務！