LUMEX微芯片實(shí)時(shí)熒光定量PCR助力非洲豬瘟檢測(cè)

LUMEX微芯片實(shí)時(shí)熒光定量PCR助力農(nóng)業(yè)農(nóng)村部全面開展非洲豬瘟檢測(cè)行動(dòng)
 

1月16日，甘肅省慶陽市防制重大動(dòng)物疫病指揮部在對(duì)1月13日慶城縣非洲豬瘟疫情流行病學(xué)調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，西峰區(qū)大龍燚火鍋店經(jīng)營食品“撒尿肉丸”中檢測(cè)出疑似非洲豬瘟病毒陽性，該產(chǎn)品產(chǎn)地為江蘇省泰州市，受委托生產(chǎn)企業(yè)為泰州安井食品有限公司。隨著非洲豬瘟疫情的波及面越來越廣，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部也非常重視，早在1月2號(hào)就發(fā)文《中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告 第119號(hào)》要求在非洲豬瘟防控期間，全面開展生豬屠宰及生豬產(chǎn)品流通等環(huán)節(jié)非洲豬瘟檢測(cè) ，這項(xiàng)公告將于2019年2月1日起正式執(zhí)行。

對(duì)非洲豬瘟病毒檢測(cè)結(jié)果為陰性且按照檢疫規(guī)程檢疫合格的生豬產(chǎn)品出具動(dòng)物檢疫證明，并注明檢測(cè)方法、檢測(cè)日期和檢測(cè)結(jié)果等信息，其中，出具跨省調(diào)運(yùn)動(dòng)物檢疫證明（產(chǎn)品A）的，要求PCR檢測(cè)結(jié)果為陰性。對(duì)未經(jīng)非洲豬瘟病毒檢測(cè)或檢測(cè)結(jié)果為陽性的，不得出具動(dòng)物檢疫證明。生豬屠宰廠（場(chǎng)）應(yīng)當(dāng)主動(dòng)配合駐場(chǎng)官方獸醫(yī)工作，不得拒絕、阻礙或干擾官方獸醫(yī)監(jiān)督核查。 

相比于非洲豬瘟（ASF），豬瘟（CSF）也是一種急性、熱性和高度接觸性的，病毒性傳染病。豬瘟在世界養(yǎng)豬國家有不同程度流行，國際獸疫局將本病列入A類傳染病，病作為國際重要建議對(duì)象。由于豬瘟造成的經(jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重，促使很多國家制定和執(zhí)行豬瘟的防治和根除計(jì)劃，并在歐美20多個(gè)國家取得成功。對(duì)于豬瘟（CSF）等疫病疫情的檢測(cè)，其中最重要的一種檢測(cè)方法就是利用RT-PCR方法，包括豬瘟病毒常規(guī)監(jiān)測(cè)和豬瘟強(qiáng)毒和弱毒分子鑒別診斷方法。

 實(shí)時(shí)熒光定量PCR AriaDNA系列及豬瘟病害檢測(cè)試劑盒

針對(duì)豬瘟疫病疫情監(jiān)測(cè)針對(duì)，LUMEX提供的實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)結(jié)合微芯片平臺(tái)，配合專用方法試劑包，使豬病疫情疫病分析監(jiān)控更加簡(jiǎn)單快捷。專利微芯片技術(shù)保證樣品分析避免交叉污染，檢測(cè)結(jié)果更為可靠，降低試劑消耗，降低分析成本，凍干芯片和微孔空芯片平臺(tái)可選，凍干芯片無需冷鏈，一個(gè)平臺(tái)可直接測(cè)定多種病菌。

豬類疫病疫情檢測(cè)種類：豬瘟病毒、豬藍(lán)耳病病毒、豬偽狂犬野毒病毒、豬偽狂犬病毒、豬圓環(huán)病毒2型單、豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒、豬口蹄疫病毒。

檢測(cè)步驟：

AriaDNA微芯片PCR分析儀的分析時(shí)間比一般商品化PCR分析儀要縮短1倍以上�？商峁�專用微孔凍干即用平臺(tái)和通用開放式平臺(tái)體系，配合AiraDNA熒光定量PCR實(shí)現(xiàn)快速分析測(cè)定。開放性的試劑平臺(tái)，根據(jù)檢測(cè)需求通用客戶已有的酶、引物、探針等試劑。 試劑節(jié)省，檢測(cè)速度快。能夠匹配多數(shù)的市面上試劑盒產(chǎn)品，形成從提取到分析的通用型的分析平臺(tái)。

試驗(yàn)比對(duì)-禽流感、豬流行腹瀉樣本檢測(cè)結(jié)果比對(duì)

實(shí)時(shí)熒光定量AriaDNA PCR儀器穩(wěn)定性較好，檢測(cè)DNA和RNA熒光PCR現(xiàn)有產(chǎn)品的重復(fù)性較好，使用AriaDNA PCR儀器檢測(cè)DNA和RNA熒光PCR現(xiàn)有產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線及擴(kuò)增效率很好，基本上和ABI儀器保持一致，甚至優(yōu)于ABI儀器。 

分析實(shí)例：-PEDV豬豬流行性腹瀉病毒檢測(cè)

豬流行性腹瀉泄病毒檢測(cè)中，使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR AriaDNA結(jié)合微芯片平臺(tái)技術(shù)，精準(zhǔn)測(cè)定各類濃度的豬病病菌，對(duì)豬類疫病疫情的監(jiān)控和預(yù)防具有重要意義。

　　為進(jìn)一步做好非洲豬瘟防控工作，降低生豬屠宰以及生豬產(chǎn)品流通環(huán)節(jié)病毒擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)，切實(shí)保障生豬產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展，根據(jù)《中華人民共和國動(dòng)物防疫法》《重大動(dòng)物疫情應(yīng)急條例》《生豬屠宰管理?xiàng)l例》等法律法規(guī)及有關(guān)規(guī)定，在非洲豬瘟防控期間，全面開展生豬屠宰及生豬產(chǎn)品流通等環(huán)節(jié)非洲豬瘟檢測(cè)。現(xiàn)就有關(guān)事項(xiàng)公告如下。 

　　一、生豬屠宰廠（場(chǎng)）應(yīng)當(dāng)按照有關(guān)規(guī)定，嚴(yán)格做好非洲豬瘟排查、檢測(cè)及疫情報(bào)告工作，并主動(dòng)接受監(jiān)督檢查。 

　　二、生豬屠宰廠（場(chǎng)）要嚴(yán)格入場(chǎng)查驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)有下列情形之一的，不得收購、屠宰有關(guān)生豬： 

　　（一）無有效動(dòng)物檢疫證明的； 

　�。ǘ�）耳標(biāo)不齊全或檢疫證明與耳標(biāo)信息不一致的； 

　　（三）違規(guī)調(diào)運(yùn)生豬的； 

　�。ㄋ模┌l(fā)現(xiàn)其他違法違規(guī)調(diào)運(yùn)行為的。 

　　三、生豬屠宰廠（場(chǎng)）要按照規(guī)定，嚴(yán)格落實(shí)生豬待宰、臨床巡檢、屠宰檢驗(yàn)檢疫等制度。在待宰圈發(fā)現(xiàn)生豬疑似非洲豬瘟的，應(yīng)當(dāng)立即暫停同一待宰圈生豬上線屠宰；在屠宰線發(fā)現(xiàn)疑似非洲豬瘟的，應(yīng)當(dāng)立即暫停屠宰活動(dòng)。同時(shí)，按規(guī)定采集相應(yīng)�。ㄋ溃┴i的血液樣品或脾臟、淋巴結(jié)、腎臟等組織樣品等進(jìn)行非洲豬瘟病毒檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果為陰性的，同批生豬方可繼續(xù)上線屠宰。 

　　四、生豬屠宰廠（場(chǎng)）應(yīng)當(dāng)在駐場(chǎng)官方獸醫(yī)組織監(jiān)督下，按照生豬不同來源實(shí)施分批屠宰，每批生豬屠宰后，對(duì)暫儲(chǔ)血液進(jìn)行抽樣并檢測(cè)非洲豬瘟病毒。經(jīng)PCR檢測(cè)試劑盒或免疫學(xué)檢測(cè)試紙條檢測(cè)為陰性的，同批生豬產(chǎn)品方可上市銷售。其中，經(jīng)PCR檢測(cè)為陰性的，有關(guān)生豬產(chǎn)品可按照規(guī)定在本省或跨省銷售；經(jīng)免疫學(xué)檢測(cè)試紙條檢測(cè)為陰性的，有關(guān)生豬產(chǎn)品僅可在本省范圍內(nèi)銷售。 

　  五、按照本公告第三、第四條規(guī)定，檢出非洲豬瘟病毒陽性的，生豬屠宰廠（場(chǎng)）應(yīng)當(dāng)?shù)谝粫r(shí)間將檢測(cè)結(jié)果報(bào)告當(dāng)?shù)匦竽莲F醫(yī)部門，并及時(shí)將陽性樣品送所在地省級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)檢測(cè)（確診）。經(jīng)確診為非洲豬瘟病毒陽性的，生豬屠宰廠（場(chǎng)）要在當(dāng)?shù)匦竽莲F醫(yī)部門監(jiān)督下，按規(guī)定撲殺所有待宰圈生豬，連同陽性批次的豬肉、豬血及副產(chǎn)品進(jìn)行無害化處理，對(duì)屠宰車間和相關(guān)場(chǎng)所進(jìn)行徹底清洗消毒。48小時(shí)后，可向當(dāng)?shù)匦竽莲F醫(yī)部門申請(qǐng)?jiān)u估，經(jīng)評(píng)估合格的，方可恢復(fù)生產(chǎn)。 

　　六、生豬屠宰廠（場(chǎng)）非洲豬瘟病毒檢測(cè)結(jié)果須經(jīng)駐場(chǎng)官方獸醫(yī)簽字確認(rèn)。對(duì)非洲豬瘟病毒檢測(cè)結(jié)果為陰性且按照檢疫規(guī)程檢疫合格的生豬產(chǎn)品出具動(dòng)物檢疫證明，并注明檢測(cè)方法、檢測(cè)日期和檢測(cè)結(jié)果等信息，其中，出具跨省調(diào)運(yùn)動(dòng)物檢疫證明（產(chǎn)品A）的，要求PCR檢測(cè)結(jié)果為陰性。對(duì)未經(jīng)非洲豬瘟病毒檢測(cè)或檢測(cè)結(jié)果為陽性的，不得出具動(dòng)物檢疫證明。生豬屠宰廠（場(chǎng)）應(yīng)當(dāng)主動(dòng)配合駐場(chǎng)官方獸醫(yī)工作，不得拒絕、阻礙或干擾官方獸醫(yī)監(jiān)督核查。 

　　七、各地畜牧獸醫(yī)主管部門要組織制定生豬屠宰廠（場(chǎng)）樣品采集和檢測(cè)等有關(guān)要求，強(qiáng)化培訓(xùn)指導(dǎo)和監(jiān)督檢查，規(guī)范采樣、檢測(cè)和記錄等工作。要結(jié)合當(dāng)?shù)毓ぷ鲗?shí)際，建立上市生豬產(chǎn)品和屠宰廠（場(chǎng)）暫存產(chǎn)品抽樣檢測(cè)核查制度，確保屠宰廠（場(chǎng)）采集樣品和檢測(cè)結(jié)果的真實(shí)性和代表性。在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和追溯調(diào)查工作中，省級(jí)以上獸醫(yī)機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室在生豬產(chǎn)品中檢出非洲豬瘟病毒陽性的，應(yīng)當(dāng)就地銷毀相關(guān)生豬產(chǎn)品，有關(guān)生豬屠宰廠（場(chǎng)）應(yīng)當(dāng)主動(dòng)做好同批產(chǎn)品及流行病學(xué)相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)產(chǎn)品的流向調(diào)查，并按規(guī)定銷毀，暫停屠宰活動(dòng)，并按照本公告第五條規(guī)定實(shí)施清洗消毒，按規(guī)定程序恢復(fù)生產(chǎn)。發(fā)現(xiàn)因檢測(cè)造假造成生豬產(chǎn)品上市，被省級(jí)以上獸醫(yī)機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)為非洲豬瘟病毒陽性的，除按照上述規(guī)定執(zhí)行外，生豬屠宰廠（場(chǎng)）應(yīng)當(dāng)徹底清洗消毒，1個(gè)潛伏期（15天）后，方可按照本公告第五條規(guī)定程序恢復(fù)生產(chǎn)。 

　　八、在生豬屠宰廠（場(chǎng)）檢出非洲豬瘟病毒陽性的，當(dāng)?shù)匦竽莲F醫(yī)主管部門要組織做好陽性生豬和生豬產(chǎn)品的溯源追蹤，對(duì)生豬來源養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）及其周邊地區(qū)進(jìn)行嚴(yán)格檢測(cè)排查，涉及其他行政區(qū)域的，應(yīng)當(dāng)及時(shí)將相關(guān)情況和資料通報(bào)有關(guān)地方畜牧獸醫(yī)主管部門，共同開展溯源追蹤。 

　　九、檢測(cè)非洲豬瘟病毒，應(yīng)當(dāng)使用農(nóng)業(yè)農(nóng)村部批準(zhǔn)或經(jīng)中國動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心比對(duì)符合要求的檢測(cè)方法開展檢測(cè)。 

　   十、本公告自2019年2月1日起執(zhí)行。 

　                                                                                                                                 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部 

                                                                                                       2019年1月2日