細(xì)胞制備污染控制,以免導(dǎo)致藥物開發(fā)項(xiàng)目終止
細(xì)胞制備是藥物開發(fā)高效和一致性的重要基礎(chǔ)和初始環(huán)節(jié)。大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng),以及擴(kuò)大培養(yǎng)中的細(xì)胞傳代,其中一大核心技術(shù)便是污染的控制。賽多利斯創(chuàng)新的細(xì)胞傳代解決方案,助您切實(shí)消除污染,簡(jiǎn)化工藝流程并提升效率。
為加速藥物開發(fā)進(jìn)程,我們優(yōu)化的產(chǎn)品組合可提高生產(chǎn)力,確保您選擇合適的候選化合物,并縮短進(jìn)入臨床試驗(yàn)的時(shí)間。
控制污染,以免導(dǎo)致藥物開發(fā)項(xiàng)目終止
污染源可能是細(xì)菌、酵母、霉菌、化學(xué)物質(zhì)、其它生物制劑和/或細(xì)胞系交叉污染。它會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)、形態(tài)和行為,從而延緩您的項(xiàng)目進(jìn)度。對(duì)任何涉及細(xì)胞培養(yǎng)的項(xiàng)目來說,污染是其面對(duì)的一大主要挑戰(zhàn)。
· 細(xì)菌污染
細(xì)菌是最常見的污染物。通常,自來水的細(xì)菌污染物含量是100-1000 CFU/100 mL,但美國(guó)材料與試驗(yàn)協(xié)會(huì)(ASTM International)設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)是,在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)菌污染物含量<10 CFU/100 mL。與其它污染物不同,細(xì)菌污染通常很容易檢測(cè)到,因?yàn)榕囵B(yǎng)物會(huì)不清澈或變混濁,且/或培養(yǎng)基的顏色會(huì)發(fā)生變化,提示pH值下降。細(xì)菌在顯微鏡下也很容易看見。
盡管很容易檢測(cè)到大多數(shù)細(xì)菌污染,但它仍然會(huì)降低您的效率,畢竟您未必會(huì)第一時(shí)間注意到污染,可能還準(zhǔn)備使用該培養(yǎng)物進(jìn)行后續(xù)的化驗(yàn)分析。另外,去污也是成本高昂且非常耗時(shí)的。
為了避免受到細(xì)菌污染:
水是您最重要的試劑,所以請(qǐng)務(wù)必使用新生成的超純水
悉心看管您的其它試劑,進(jìn)行無菌過濾以消除任何污染的可能性
盡可能采用無菌技術(shù),且僅使用無菌試劑
留意一般實(shí)驗(yàn)室?guī)齑,?duì)其進(jìn)行污染監(jiān)測(cè)往往是一大挑戰(zhàn)
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· 支原體污染
支原體污染非常難以防范,因?yàn)榫哂腥嵝约?xì)胞膜的支原體較。0.15 µm-0.3 µm),且無細(xì)胞壁,因此很難通過顯微鏡檢測(cè)到。此外由于支原體尺寸較小,即使在哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)增殖到較高濃度,細(xì)胞培養(yǎng)物表面也看不到任何明顯渾濁跡象或其它變化。
在細(xì)胞系消失前,支原體對(duì)培養(yǎng)物的污染可能并不明顯。
已污染細(xì)胞的交叉污染是支原體污染的主要來源之一。消除培養(yǎng)物中的支原體污染幾乎不可能;它對(duì)大多數(shù)抗生素有抵抗力,可以在未經(jīng)凍存技術(shù)處理的液氮中存活,污染儲(chǔ)存在同一液氮杜瓦瓶中的其它細(xì)胞。
在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)使用特異的支原體檢測(cè)可以提高您的效率,便于您即刻了解細(xì)胞是否受到污染,以免浪費(fèi)時(shí)間、試劑和精力。使用無支原體的培養(yǎng)物可以增大您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果轉(zhuǎn)化為臨床的幾率。
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