新羿生物推出新型冠狀病毒數(shù)字PCR應(yīng)用方案

截止2020年1月28日20時(shí)05分，新型冠狀病毒肺炎國(guó)內(nèi)確診病例為4629例，疑似6973例，治愈71例，死亡106例，死亡率低于SARS，但傳播能力可能更強(qiáng)，導(dǎo)致疫情傳播速度較快，給疾病防控工作帶來(lái)極大的挑戰(zhàn)。新型冠狀病毒疫情日益嚴(yán)峻，此刻的棘手問(wèn)題之一就是檢測(cè)新型冠狀病毒的試劑稀缺，使得很多患者不能被第一時(shí)間確診和收治，導(dǎo)致后續(xù)治療工作推進(jìn)緩慢。

1月28日晚，六家公司的新型冠狀病毒熒光PCR檢測(cè)試劑盒或基因測(cè)序系統(tǒng)獲國(guó)家藥品監(jiān)督管理局應(yīng)急審批通過(guò)，這也意味著針對(duì)本次疫情在病原檢測(cè)和確認(rèn)方面取得了重大突破，可以有力推動(dòng)對(duì)疑似疫情感染患者的甄別工作。

在新型冠狀病毒肺炎診斷過(guò)程中，需要進(jìn)一步解決的問(wèn)題：

1、有接觸史尚無(wú)癥狀者，需要排查是否被感染；

2、熒光PCR的Ct值在37-40之間的可疑樣本，如何判定陰性還是陽(yáng)性；

3、患者治療過(guò)程中監(jiān)測(cè)病毒載量的變化，用于指導(dǎo)治療；

4、病人體內(nèi)病毒轉(zhuǎn)陰的復(fù)核，用于指導(dǎo)出院。

同時(shí)，對(duì)于熒光PCR檢測(cè)試劑盒開(kāi)發(fā)來(lái)說(shuō)，提供準(zhǔn)確定量的參考品可以為試劑盒質(zhì)量保駕護(hù)航。

1、用于有接觸史尚無(wú)癥狀者排查：基于數(shù)字PCR的高靈敏度，檢測(cè)病毒攜帶狀況；

2、用于新型冠狀病毒疑似患者診斷復(fù)核：基于數(shù)字PCR的高靈敏度和高準(zhǔn)確性，可用于熒光PCR的Ct值在37-40之間的可疑樣本判定。

3、用于新型冠狀病毒感染患者病毒載量動(dòng)態(tài)觀察：基于數(shù)字PCR的絕對(duì)定量能力，可為臨床醫(yī)生提供更為準(zhǔn)確的病原體載量信息，協(xié)助判斷病情并及時(shí)調(diào)整治療策略。

4、可用于治療后患者體內(nèi)病毒轉(zhuǎn)陰的復(fù)核，用于指導(dǎo)出院。

5、標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的制備：數(shù)字PCR是制備標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)定量的重要方法，為熒光PCR試劑盒提供可靠的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

新羿生物在國(guó)家CDC的指導(dǎo)下與清華大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程系等單位協(xié)力合作，針對(duì)公布的新型冠狀病毒序列，正在開(kāi)發(fā)數(shù)字PCR法2019-nCoV核酸檢測(cè)試劑盒，該試劑盒采用創(chuàng)新的RNA一步法逆轉(zhuǎn)錄數(shù)字PCR技術(shù)，可對(duì)樣本中的2019-nCoV進(jìn)行高靈敏與準(zhǔn)確定量檢測(cè)。參考國(guó)家CDC和WHO的指南，針對(duì)2019-nCoV的多個(gè)區(qū)域進(jìn)行檢測(cè)，增加檢測(cè)的特異性并減少漏檢錯(cuò)檢。試劑盒內(nèi)設(shè)有內(nèi)參基因，可對(duì)采樣、提取和PCR擴(kuò)增等步驟進(jìn)行質(zhì)控，確保檢測(cè)過(guò)程的精準(zhǔn)可靠。

1、合規(guī)性：TD-1系統(tǒng)已取得國(guó)家醫(yī)療器械上市許可；

2、通量高：一次PCR可以完成96樣本；

3、方便性：液滴直接于8聯(lián)排管中生成，生成之后無(wú)須手工移液；PCR擴(kuò)增完成后，直接放入生物芯片分析儀中，即可進(jìn)行信號(hào)讀取與分析；

4、安全性：液滴擴(kuò)增與檢測(cè)流程無(wú)開(kāi)蓋操作，且檢測(cè)后液滴儲(chǔ)存于芯片內(nèi)置廢液槽中，不流經(jīng)儀器內(nèi)部，完全避免氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽(yáng)性結(jié)果，符合臨床對(duì)檢測(cè)安全性的要求。

新型冠狀病毒簡(jiǎn)介

數(shù)字PCR技術(shù)是第三代PCR技術(shù)，是一種新的核酸檢測(cè)與定量方法，其將模板分子稀釋并平均分配到數(shù)萬(wàn)個(gè)獨(dú)立反應(yīng)腔室后進(jìn)行PCR擴(kuò)增，通過(guò)PCR終點(diǎn)信號(hào)的“有或無(wú)”來(lái)實(shí)現(xiàn)檢測(cè)與絕對(duì)定量。

具有如下特性：

1、高靈敏度，可實(shí)現(xiàn)單分子級(jí)檢測(cè)；

2、定量準(zhǔn)確，不依賴標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與標(biāo)準(zhǔn)曲線；

3、高穩(wěn)定性，善于在復(fù)雜背景模板的干擾下對(duì)罕見(jiàn)的靶標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，且對(duì)擴(kuò)增抑制劑的耐受性好。

數(shù)字PCR的特性還體現(xiàn)在：數(shù)字PCR的檢測(cè)與定量過(guò)程受擴(kuò)增效率的影響較小，因此對(duì)于新型病毒在靶標(biāo)位置可能出現(xiàn)的變異有一定耐受性，可確保檢出的穩(wěn)定性與定量的精準(zhǔn)性。同時(shí)，通過(guò)數(shù)字PCR檢測(cè)圖像的變化，提示引物探針靶標(biāo)區(qū)域可能出現(xiàn)的變異并保留樣本，會(huì)有助于后續(xù)的病毒變異研究。