目前新冠狀病毒核酸檢測(cè)主要通過(guò)PCR檢測(cè)的方法,其對(duì)試驗(yàn)場(chǎng)地、檢驗(yàn)儀器及操作人員的要求都非常高,輕微的污染就可能對(duì)結(jié)果造成偏差。另外,對(duì)檢測(cè)樣本保存條件和設(shè)備也有很嚴(yán)苛的要求。并且,由于新冠狀病毒的傳染危險(xiǎn)性,防護(hù)準(zhǔn)備和后續(xù)的消毒處理對(duì)整個(gè)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)也異常重要。Cole-Parmer作為一家專業(yè)的科研儀器、設(shè)備、耗材供應(yīng)商,可以為新冠狀病毒核酸檢測(cè)提供從防護(hù),采樣,樣本保存,檢測(cè),消毒處理等各環(huán)節(jié)支持。相信可靠的儀器設(shè)備及防護(hù)消毒產(chǎn)品一定能為這場(chǎng)戰(zhàn)役中的檢測(cè)工作添磚加瓦。Cole-Parmer與你們一起并肩作戰(zhàn)!
Cole-Parmer相關(guān)儀器配置單
以下是新冠病毒核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的具體標(biāo)準(zhǔn)介紹,可供各位老師參考,其中涉及的儀器設(shè)備和耗材,疫情期間歡迎在微信平臺(tái)直接聯(lián)系我們,或者直接聯(lián)系您當(dāng)?shù)氐匿N售或經(jīng)銷商。
新冠病毒核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
一、樣本采集
通常是在采集地——定點(diǎn)發(fā)熱門診進(jìn)行樣本選取。樣本一般為鼻咽或口咽拭子、氣管吸出物、痰液等。鼻咽拭子居多(其陽(yáng)性率非常高)
在采集過(guò)程中,Cole-Parmer可為您提供防護(hù)服,護(hù)目鏡,鞋套,以及手套等防護(hù)用品。
二、樣本的包裝、保存與運(yùn)輸
通常采樣管需經(jīng)過(guò)3層包裝,即:自封袋+運(yùn)輸罐+專用運(yùn)輸箱。在2-4℃進(jìn)行保存,(通常保存不能超過(guò)72小時(shí)),再通過(guò)UN2814感染性物質(zhì)專用運(yùn)輸箱,由經(jīng)過(guò)生物安全培訓(xùn)的專人,全身著防護(hù)用品運(yùn)送轉(zhuǎn)運(yùn)箱。
三、樣本的核酸檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)地點(diǎn):基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室
實(shí)驗(yàn)條件:二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室(P2負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室)
1.準(zhǔn)備工作
實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備:二級(jí)生物安全柜,水浴或烘箱,移液器
首先檢查運(yùn)輸罐是否嚴(yán)格密閉,然后取出罐內(nèi)的密封袋進(jìn)行56℃下30分鐘的消毒滅活,滅活后可從密封袋內(nèi)取出采樣管對(duì)采集的樣品進(jìn)行分裝、混勻。
整個(gè)過(guò)程應(yīng)在二級(jí)生物安全柜內(nèi)進(jìn)行,滅活設(shè)備應(yīng)盡量選擇可放置于生物安全柜內(nèi)的小型設(shè)備以減少樣品進(jìn)出安全柜內(nèi)的次數(shù)。
2.核酸提取(手動(dòng))
實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備:二級(jí)生物安全柜,移液器,振蕩器,金屬加熱器,微型離心機(jī)
首先需要依據(jù)不同品牌試劑盒的要求進(jìn)行裂解液的配置。然后,采用化學(xué)試劑法對(duì)核酸樣本進(jìn)行裂解,樣品裂解前需經(jīng)過(guò)充分的振蕩混勻,如有必要可采用金屬加熱器于56℃下充分裂解病毒所釋放出的核酸。通過(guò)多次離心完成裂解產(chǎn)物的過(guò)濾收集。并且利用離心純化法對(duì)裂解后的核酸進(jìn)行洗滌與回收。
3.基因擴(kuò)增與檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備:生物安全柜,PCR板離心機(jī),實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
首先,需根據(jù)不同品牌試劑盒的要求將試劑盒內(nèi)的不同組分(引物,dNTP,聚合酶等)按各自所需的體積量進(jìn)行配置,并充分離心混勻。然后將核酸樣本依次加入至每個(gè)PCR反應(yīng)管中,加蓋密閉后進(jìn)行充分的混勻、離心。其次,將PCR反應(yīng)管置于實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀中,按照試劑盒說(shuō)明書的要求進(jìn)行擴(kuò)增參數(shù)的設(shè)置后即開始檢測(cè)。
4.結(jié)果分析
通過(guò)計(jì)算出的CT值,依據(jù)檢測(cè)試劑盒廠家說(shuō)明書的判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定,陽(yáng)性、陰性或者不確定。
四、未測(cè)樣品的保存
如樣本未能及時(shí)檢測(cè),需將樣本于-70℃或以下進(jìn)行保存。Cole-parmer專為您提供保存樣品的Cole-parmer超低溫冰箱。
五、消毒處理
生物安全柜內(nèi):對(duì)臺(tái)面、儀器、外層手套進(jìn)行消毒,相關(guān)垃圾投入專用醫(yī)療垃圾桶中。并開啟紫外燈照射生物安全柜,時(shí)長(zhǎng)應(yīng)不低于30分鐘。
核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi):對(duì)實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面、地面進(jìn)行消毒,并開啟紫外照射燈進(jìn)行空間消毒,時(shí)長(zhǎng)應(yīng)不低于30分鐘。
實(shí)驗(yàn)人員:按自上而下、由內(nèi)而外的順序依次摘脫三級(jí)防護(hù)穿戴,并置于專用醫(yī)療垃圾桶內(nèi)。
醫(yī)療垃圾:所有與新型冠狀病毒相關(guān)的醫(yī)療垃圾需經(jīng)過(guò)濕熱高壓滅菌(121℃,30分鐘)后再作為普通的醫(yī)療垃圾處理,且垃圾袋上應(yīng)標(biāo)注新型冠狀病毒醫(yī)療垃圾的相關(guān)信息。
注意:實(shí)驗(yàn)試劑、設(shè)備等需取得醫(yī)療器械注冊(cè)證,科學(xué)研究除外。