在線講座：國(guó)際學(xué)會(huì)組建EV流式檢測(cè)技術(shù)講座

EV Flow Cytometry Working Group是一個(gè)合作性組織，里面的成員是細(xì)胞外囊泡、流式細(xì)胞儀和實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的科學(xué)家、創(chuàng)新者和專家，致力于開(kāi)發(fā)更強(qiáng)大的流式細(xì)胞技術(shù)來(lái)研究包括外泌體和其他胞外囊泡在內(nèi)的亞微米顆粒。該組織是由國(guó)際細(xì)胞外囊泡學(xué)會(huì)（ISEV）、國(guó)際流式細(xì)胞技術(shù)促進(jìn)學(xué)會(huì)（ISAC）和國(guó)際血栓形成與止血學(xué)會(huì)（ISTH）三大學(xué)會(huì)的一批科學(xué)家于2015年4月25日，在ISEV年會(huì)上成立。

Apogee超靈敏納米流式細(xì)胞儀以其強(qiáng)大的光學(xué)模塊和優(yōu)異的散射光檢測(cè)能力，在細(xì)胞外囊泡/外泌體檢測(cè)方面獲得許多EV Flow Cytometry Working Group成員的青睞，并利用Apogee納米流式技術(shù)進(jìn)行多種細(xì)胞外囊泡/外泌體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)方法的校準(zhǔn)和優(yōu)化，發(fā)表了多篇JEV期刊。 

同時(shí)EV Flow Cytometry Working Group還會(huì)定期舉辦在線講座，邀請(qǐng)細(xì)胞外囊泡/外泌體研究領(lǐng)域的專家學(xué)者進(jìn)行技術(shù)交流，為了讓大家更便捷地了解國(guó)外EVs圈的專家學(xué)者們的工作，伯齊科技將持續(xù)分享EV Flow Cytometry Working Group的在線講座，感興趣的老師可以關(guān)注伯齊微信公眾號(hào)，及時(shí)獲取最新資訊。

Size and refractive index determination of sub-micrometer particles using the flow cytometry scatter ratio (Flow-SR)

Edwin van der Pol博士，Amsterdam University Medical Centers, Netherlands

流式細(xì)胞儀以任意單位測(cè)量光散射信號(hào)，這阻礙了對(duì)數(shù)據(jù)的解釋和比較，而這些光散射信號(hào)卻又包含了關(guān)于粒子大小和組成的重要信息。現(xiàn)在這些信息可以通過(guò)校準(zhǔn)來(lái)評(píng)估，這意味著將任意單位轉(zhuǎn)換為標(biāo)準(zhǔn)化測(cè)量單位，例如以納米為單位的直徑。有一種散射檢測(cè)器可以通過(guò)測(cè)量微球并用Mie理論來(lái)描述信號(hào)，同時(shí)考慮流式細(xì)胞儀的光學(xué)結(jié)構(gòu)和微球的大小和折射率（RIs）來(lái)校準(zhǔn)。RI是粒子的一種固有特性，它取決于粒子的組成，決定了粒子散射光的效率。當(dāng)RI已知且散射檢測(cè)器被校準(zhǔn)時(shí)，Mie理論可用于推導(dǎo)胞外囊泡（EVs）的直徑[1]。在本次講座中，將解釋通過(guò)獲取側(cè)散射和前向散射信號(hào)之間的比率，即流式細(xì)胞儀散射光比例分析法（Flow-SR），可以同時(shí)測(cè)定亞微米顆粒的直徑和RI[2]。Flow-SR分析法可以實(shí)現(xiàn)對(duì)血漿中的EVs（RI<1.42）和脂蛋白顆粒（RI>1.45）進(jìn)行無(wú)標(biāo)記區(qū)分，并可用于評(píng)價(jià)抗體標(biāo)記的特異性。我們可自動(dòng)化Flow-SR分析法，并將其應(yīng)用于EVs臨床研究的數(shù)據(jù)分析[3]。
 

[1] De Rond et al. Deriving extracellular vesicle size from scatter intensities measured by flow cytometry. Curr. Protoc. Cytom. e43, 1-14 (2018) 

[2] van der Pol et al. Absolute sizing and label-free identification of extracellular vesicles by flow cytometry. Nanomedicine 14, 801-10 (2018)

[3] Gasecka et al. Ticagrelor attenuates the increase of extracellular vesicles concentrations in plasma after acute myocardial infarction compared to clopidogrel. J. Thromb. Haemost. 18(3), 609-623 (2020)

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