普瑞麥迪誠(chéng)邀大家試用最新血清抗體檢測(cè)分析系統(tǒng)

2020年至今，COVID-19席卷全球，目前已造成世界數(shù)千萬(wàn)人感染，數(shù)百萬(wàn)人失去生命。新冠病毒致病機(jī)制是通過(guò)病毒表面的刺突蛋白(S蛋白)與肺部上皮細(xì)胞表面ACE2蛋白質(zhì)結(jié)合，隨后，病毒會(huì)趁機(jī)侵入人體細(xì)胞。人體內(nèi)也會(huì)啟動(dòng)相應(yīng)的免疫程序，產(chǎn)生針對(duì)新冠病毒S蛋白的抗體稱(chēng)之中和性抗體。它們可以結(jié)合病毒表面S蛋白，阻斷S蛋白與ACE2的結(jié)合，從而阻斷病毒進(jìn)入細(xì)胞。故能夠在血清中檢測(cè)中和性抗體的親和力顯得尤為重要以及康復(fù)者或者疫苗注射者血清（漿）內(nèi)中性抗體的結(jié)合力顯得尤為重要。

1. 首先它是發(fā)揮抗病毒效應(yīng)的主要力量；

2. 目前我國(guó)對(duì)重癥病人和危重癥病人采取康復(fù)者血漿治療；

3. 傳統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)的VNTs，亦或是基于Elisa的sVNTs，都不能提供關(guān)于是通過(guò)低濃度弱結(jié)合親和力的NAbs還是低濃度緊密結(jié)合親和力的NAbs來(lái)實(shí)現(xiàn)病毒中和的信息；

4. 市面上主流的分子互作系統(tǒng)都是基于表面結(jié)合的原理，而我們知道，在體內(nèi)的結(jié)合并非發(fā)生在結(jié)合表面上，故這些方法不能完全反映出真實(shí)的結(jié)合狀態(tài)；

英國(guó)劍橋大學(xué)科學(xué)家團(tuán)隊(duì)經(jīng)過(guò)不懈努力，在Fluidity One-W微流控?cái)U(kuò)散檢測(cè)儀后,又推出了一款專(zhuān)門(mén)針對(duì)病毒檢測(cè)的儀器(Fluidity One-W Serum),它可以在血清中（50ul）直接檢測(cè)病毒抗體濃度及結(jié)合強(qiáng)弱，該方法不需要固定，能夠在接近生命體的環(huán)境中檢測(cè)，得到的數(shù)據(jù)也就更貼近真實(shí)值。
 

優(yōu)勢(shì)

1. 在溶液中檢測(cè)，無(wú)需表面固定，無(wú)非特異性結(jié)合

2. 在更接近天然的狀態(tài)下分析相互作用

3. 直接在最小稀釋血清中進(jìn)行抗體親和力分析和濃度測(cè)定，以進(jìn)行全面的免疫反應(yīng)評(píng)估

4. 簡(jiǎn)單易操作

5. 可以迅速測(cè)定蛋白是否降解

6. 可以進(jìn)行化學(xué)計(jì)量學(xué)測(cè)定，可以測(cè)定分子間結(jié)合比例

7. 一次性芯片減少交叉污染

應(yīng)用案例
案例1

在新冠疫情爆發(fā)前對(duì)照血清中測(cè)量了重組ACE2和S1結(jié)合的KD值。隨著S1濃度的增加，有效流體動(dòng)力學(xué)半徑（Rh）也增加了，說(shuō)明了蛋白質(zhì)復(fù)合物ACE2–S1的有效結(jié)合（圖B）。同樣，在對(duì)照血清測(cè)量了單克隆Nab和S1結(jié)合的KD值（圖D）。將NAb添加到濃度為10 nM的熒光標(biāo)記的ACE2和濃度為50 nM的S1的混合物中會(huì)導(dǎo)致Rh減少，因?yàn)镹Ab1與S1結(jié)合，從而從復(fù)合物中置換出ACE2。通過(guò)ACE2-S1和Nab-S1親和力，并基于競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合模型預(yù)測(cè)抑制等溫線(xiàn)(圖D紅色)，這與實(shí)驗(yàn)得到的抑制等溫線(xiàn)非常一致（圖D黑色）。之后還將該方法應(yīng)用于兩個(gè)新冠呈陽(yáng)性的病人的血清中。

該款儀器的誕生實(shí)現(xiàn)了溶液中受體結(jié)合競(jìng)爭(zhēng)分析，可以測(cè)定多克隆血清抗體的有效解離常數(shù)(KD)及其濃度；為選擇恢復(fù)期血漿治療供體提供鑒定；為治療性抗體開(kāi)發(fā)和疫苗開(kāi)發(fā)的候選先導(dǎo)物提供鑒定。
案例2

使用微流體抗體親和譜分析（MAAP），確定了42名血清陽(yáng)性患者血漿樣本中抗SARS-CoV-2抗體的總親和力和濃度，其中23名經(jīng)PCR測(cè)試確認(rèn)為SARS-CoV2陽(yáng)性。研究發(fā)現(xiàn)，盡管具有相似的抗體濃度，抗RBD抗體的解離常數(shù)（Kd）卻超過(guò)了兩個(gè)數(shù)量級(jí)，從80 pM到25 nM。該款血清抗體檢測(cè)儀（Fluidity One-W Serum）測(cè)定結(jié)果與基于細(xì)胞的中和測(cè)定法非常吻合。(如上圖)。最后確定了針對(duì)SARS-CoV-2的免疫反應(yīng)具有識(shí)別其他冠狀病毒的RBD表位的能力，這表明活化的記憶B細(xì)胞可能會(huì)產(chǎn)生中和的抗體，即使由其他未來(lái)的SARSCoV-2變體觸發(fā)也是如此。抗體濃度和親和力之間的關(guān)系可能會(huì)影響血漿置換，并靶向適當(dāng)?shù)谋砦灰赃M(jìn)行有效中和。

從全文結(jié)果來(lái)看只有具有非常高的Kd值的患者才應(yīng)被視為血漿置換的獻(xiàn)血者，這是常規(guī)方法無(wú)法充分獲取的。故血漿總免疫球蛋白對(duì)SARS-CoV-2的親和力可作為評(píng)價(jià)SARS-CoV-2免疫應(yīng)答質(zhì)量的指標(biāo)，該款血清抗體檢測(cè)儀（Fluidity One-W Serum）有助于選擇最有效的樣本進(jìn)行治療性血漿置換。

上述兩個(gè)案例的文獻(xiàn)詳細(xì)Protocol歡迎來(lái)電咨詢(xún)普瑞麥迪，同時(shí)公司提供樣機(jī)，歡迎免費(fèi)試用！