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逸漠生物推出內(nèi)耳類器官試劑盒為耳聾人群帶來新曙光

瀏覽次數(shù):3631 發(fā)布日期:2023-12-11  來源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處

類器官技術(shù)攻克新領(lǐng)域逸漠生物iPSC誘導(dǎo)內(nèi)耳類器官為全球耳聾人群帶來新曙光


 
內(nèi)耳是聽力系統(tǒng)的重要組成部分,負(fù)責(zé)感知聽力和平衡功能,一旦損傷將會(huì)造成不可逆的危害。人多能干細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化為內(nèi)耳類器官,在內(nèi)耳模擬發(fā)育、基因治療、建立疾病模型和藥物篩選方面發(fā)揮重要作用,有利于對(duì)內(nèi)耳發(fā)育和生理學(xué)的了解,能迅速推進(jìn)對(duì)內(nèi)耳相關(guān)疾病的治療。

近日,逸漠生物推出最新研制的Advanced-diff系列內(nèi)耳類器官試劑盒能在體外短時(shí)間內(nèi)誘導(dǎo)生成類器官,并且讓成熟的內(nèi)耳類器官具有神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞環(huán)繞,大大縮短內(nèi)耳類器官的培養(yǎng)時(shí)間,加速研究效率,推進(jìn)對(duì)內(nèi)耳類器官的探索。
Advanced-diff系列內(nèi)耳類器官試劑盒是專用于誘導(dǎo)人多能干細(xì)胞分化為內(nèi)耳類器官的培養(yǎng)試劑盒,包含了適合Advanced-diff系列內(nèi)耳類器官生長的基礎(chǔ)培養(yǎng)基、成熟培養(yǎng)基及誘導(dǎo)細(xì)胞分化所需的添加物,即買即用,不含動(dòng)物源成分。
 
產(chǎn)品相關(guān)信息
 


01產(chǎn)品優(yōu)勢
無動(dòng)物源成分,操作簡單,使用方便,誘導(dǎo)的內(nèi)耳類器官能產(chǎn)生耳泡結(jié)構(gòu),在60天左右可觀察到感覺毛細(xì)胞生成。


02操作流程
 
分化第-2天
 
當(dāng)人多能干細(xì)胞匯合度達(dá)到75%-80%左右開始誘導(dǎo)分化為內(nèi)耳類器官,分化第-2天使用EB形成培養(yǎng)基誘導(dǎo)EB形成。分化第-1天,每孔加入100 μL EB形成培養(yǎng)基,使每孔體積為200 μL。
 
分化第0天
 
吸棄培養(yǎng)基,加入100 μL/孔基礎(chǔ)培養(yǎng)基1+補(bǔ)充劑A誘導(dǎo)EB分化,用排槍輕輕吹打,使EB懸浮。在37℃CO2,5%培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4天。
 
分化第4天
 
基礎(chǔ)培養(yǎng)基1+補(bǔ)充劑B混合均勻,按每孔25μl,加到96孔板中,并輕輕移液8-10次混勻,使每孔培養(yǎng)基的終體積為125μl,將96孔板放回培養(yǎng)箱,37℃,5%CO2孵育4天。
 
分化第8天
 
基礎(chǔ)培養(yǎng)基1+補(bǔ)充劑C混合均勻,按每孔25 μL,加到96孔板中,并輕輕移液8-10次混勻,使每孔培養(yǎng)基的終體積為150 μL,將96孔板放回培養(yǎng)箱,37℃,5%CO2孵育4天。
 
分化第12天
 
EB誘導(dǎo)結(jié)束,準(zhǔn)備好基礎(chǔ)培養(yǎng)基2(提前在冰上冷藏至少30min);或者,在d11上使基礎(chǔ)培養(yǎng)基2存儲(chǔ)在4°C過夜。Matrigel提前與4℃解凍,然后加入冷的基礎(chǔ)培養(yǎng)基2中,反復(fù)吹打溶解Matrigel,然后再培養(yǎng)基和Matrigel混合溶液中加入補(bǔ)充劑D,混合均勻,加熱到rt。將96孔板中的聚集物轉(zhuǎn)移到100mm培養(yǎng)皿中,用1-2mL的DPBS洗滌聚集體2次,再用1mL的混合培養(yǎng)基洗滌1次,然后加入10ml混合培養(yǎng)基,將培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱中,37℃,5%CO2 孵育3天;D15吸掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基,重新加入不含Matrigel的混合培養(yǎng)基,繼續(xù)孵育3天,誘導(dǎo)耳泡形成。
 
分化第18-60天
 
內(nèi)耳類器官逐漸成熟,將培養(yǎng)基換成成熟培養(yǎng)基,開始長期培養(yǎng),每5天換一次液,到60天左右獲得具有感覺毛細(xì)胞的成熟內(nèi)耳類器官。
 
鑒定

 
關(guān)于逸漠生物

廈門逸漠生物科技有限公司坐落于廈門國家留學(xué)創(chuàng)業(yè)園(翔安)產(chǎn)業(yè)園,是一家專注于細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域新產(chǎn)品、新技術(shù)開發(fā)的高新技術(shù)企業(yè)。公司產(chǎn)品涵蓋:細(xì)胞系、原代細(xì)胞、標(biāo)記細(xì)胞、耐藥細(xì)胞、免疫細(xì)胞及胎牛血清、培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無血清冷凍液、支原體/黑膠蟲清除劑、細(xì)胞因子等產(chǎn)品,提供細(xì)胞形態(tài)和免疫相關(guān)檢測、流式細(xì)胞檢測 、細(xì)胞學(xué)服務(wù)、分子生物學(xué)檢測等多種技術(shù)服務(wù)。
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