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Taq DNA Polymerase可在多種PCR條件下進(jìn)行靈敏的PCR反應(yīng),無需耗時(shí)的優(yōu)化過程(參見Tolerance of different primer Tm Values 和Specific amplification of long PCR products)。每批Taq DNA Polymerase都受到全面的質(zhì)量控制檢測(cè),包括嚴(yán)格的PCR特異性和可重復(fù)性分析,從人類基因組DNA擴(kuò)增低拷貝的目的基因(參見Lot-to-lot reproducibility)。試劑盒提供的QIAGEN PCR Buffer和CoralLoad PCR Buffer具有獨(dú)特的組成,可在多種PCR條件下進(jìn)行高度特異性的PCR,無需優(yōu)化(參見Wide annealing-temperature window 和Tolerance to variable magnesium concentration)。此外,CoralLoad PCR Buffer使得PCR產(chǎn)物可直接上樣到瓊脂糖凝膠,更易于操作,更快獲得結(jié)果。試劑盒中提供的Q-Solution可進(jìn)一步提高PCR的性能(參見Amplification of difficult templates)。
濃度: 5 單位/µl
重組酶: 是
底物類似物: dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP和fluorescent-dNTP/ddNTP
延伸速率: 72°C 2–4 kb/min
半衰期: 97°C 10 min;94°C 60 min
擴(kuò)增效率: ≥105倍
5'–>3'外切酶活性: 有
額外添加A: 有
3'–>5'外切酶活性: 無
核酶污染: 無
RNases污染: 無
蛋白酶污染: 無
自引發(fā)活性: 無
Taq DNA Polymerase是一種高品質(zhì)重組酶,適合常規(guī)和專門的PCR應(yīng)用(參見Tolerance of different primer Tm Values 和Specific amplification of long PCR products)。
研發(fā)的新型QIAGEN PCR Buffer可節(jié)省時(shí)間和精力,減少所需PCR優(yōu)化。QIAGEN PCR Buffer含有KCl和(NH4)2SO4 (參見Increased specificity of primer annealing)。獨(dú)特的緩沖液便于擴(kuò)增特異性PCR產(chǎn)物。在每個(gè)PCR循環(huán)的退火步驟,緩沖液使引物結(jié)合具有高特異性比率。KCl和(NH4)2SO4獨(dú)特比例結(jié)合,使PCR緩沖液與常規(guī)PCR緩沖液相比,可在更寬范圍的退火溫度和Mg2+濃度下提供嚴(yán)格的引物退火條件。極大減少通過改變退火溫度或Mg2+濃度的PCR優(yōu)化過程,有時(shí)甚至不需要(參見Wide annealing temperature window 和 Tolerance to variable magnesium concentration)。
CoralLoad PCR Buffer具有QIAGEN PCR Buffer的所有優(yōu)點(diǎn)。此外,還可直接將PCR反應(yīng)液上樣到瓊脂糖凝膠,無需再單獨(dú)添加凝膠上樣緩沖液。與常規(guī)QIAGEN PCR Buffer一樣,CoralLoad PCR Buffer具有相同的PCR特異性和最少的反應(yīng)優(yōu)化。另外,緩沖液還含有兩種標(biāo)記染料:一種橙色染料和一種紅色染料,便于估計(jì)DNA遷移距離和優(yōu)化瓊脂糖凝膠電泳時(shí)間(參見CoralLoad PCR Buffer)。緩沖液提高了移液可視性,使PCR產(chǎn)物可直接上樣到凝膠,提高了便利性。
Q-Solution通過修飾DNA的熔解行為,便于擴(kuò)增GC含量高的模板或含有高度二級(jí)結(jié)構(gòu)的模板。使用這種獨(dú)特的試劑常常能完成或改進(jìn)不理想的PCR(參見Amplification of difficult templates)。與DMSO和其他PCR添加劑不同,Q-Solution可在多種引物-模板體系中使用特定工作濃度,而不會(huì)產(chǎn)生毒性作用。
Taq DNA Polymerase適用于常規(guī)和特殊的應(yīng)用,包括: