白細(xì)胞裂解液

白細(xì)胞裂解液產(chǎn)品說明書（中文版）

主要用途

白細(xì)胞裂解液是一種旨在通過使用化學(xué)方法快速充分裂解純化白細(xì)胞，并在蛋白酶抑制混合劑的幫助下，通過超速離心，收集所有細(xì)胞內(nèi)可溶性蛋白質(zhì)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種白細(xì)胞（動(dòng)物、人體）等樣品。適用于后續(xù)蛋白鑒定、酶活檢測、免疫反應(yīng)等。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，裂解效果顯著。

技術(shù)背景

通過特殊裂解液和蛋白酶抑制混合劑可以防止裂解后細(xì)胞內(nèi)各種活性蛋白成分遭到活化的內(nèi)源性蛋白酶的破壞，充分保留細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的免疫和生物學(xué)活性。 

產(chǎn)品內(nèi)容

裂解液（Reagent A）        10毫升

產(chǎn)品說明書     1份

保存方式

保存在－20℃冰箱里， 避免反復(fù)凍融，有效保證6月

用戶自備

PBS緩沖溶液（12033）：用于清洗待測細(xì)胞樣品

1.5毫升離心管：用于樣品保存的容器

15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器

（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品操作

實(shí)驗(yàn)步驟

• 移入待測的純化白細(xì)胞懸液（5 X 10⁶細(xì)胞）到15毫升錐形離心管
• 放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為300g
• 小心抽去上清液
• 加入5毫升用戶自備的PBS緩沖溶液，用移液管混勻細(xì)胞顆粒群
• 放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為300g
• 小心抽去上清液
• 加入500微升裂解液（Reagent A） 
• 強(qiáng)力渦旋震蕩15秒，充分混勻
• 放進(jìn)冰槽里孵育30分鐘，期間每10分鐘強(qiáng)力渦旋震蕩15秒一次
• 用1000微升槍頭移出細(xì)胞液到無菌的1.5毫升離心管
• （選擇步驟）如暫時(shí)停止，放進(jìn)－70℃冰箱里儲(chǔ)存?zhèn)溆?/li>
• 即刻放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415D）
• 小心移取上清液到新的1.5毫升離心管
• 放進(jìn)－70℃的冰箱里備用
• 或放進(jìn)冰槽里，繼續(xù)后續(xù)（西方雜交、免疫沉淀、酶活性檢測等）操作

注意事項(xiàng)

• 本產(chǎn)品為10毫升規(guī)格，20次操作
• 建議使用純化白細(xì)胞樣品
• 待測白細(xì)胞樣品為5 X 10⁶細(xì)胞，約100毫克細(xì)胞重量
• 根據(jù)細(xì)胞量的不同，按比例調(diào)整試劑用量
• 所有操作均須在4℃狀態(tài)下進(jìn)行
• 建議裂解液（Reagent A）適量分裝儲(chǔ)存
• 如果放在－70℃冰箱里儲(chǔ)存?zhèn)溆�，避免反�?fù)凍融
• 本公司提供系列裂解試劑產(chǎn)品
    

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無核酶和蛋白酶污染