酚氯仿法（PC8）DNA萃取試劑盒

酚氯仿法（PC8）DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

主要用途

酚氯仿法（PC8）DNA萃取試劑是一種旨在使蛋白質(zhì)變性（denaturation），同時(shí)徹底清除蛋白質(zhì)（deproteination）及其它成分來(lái)達(dá)到純化DNA的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于單純DNA和RNA操作或PCR產(chǎn)物的萃取以及SAGE技術(shù)等。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，嚴(yán)格無(wú)核酶污染，萃取純度高。

技術(shù)背景

酚或酚氯仿混合物是提純核酸成分的重要步驟。通過(guò)這些化學(xué)處理，使混雜在核酸里的蛋白質(zhì)二維結(jié)構(gòu)受到破壞，然后經(jīng)過(guò)相位分離將非核酸成分除去，為下一步乙醇濃縮沉淀打好基礎(chǔ)。酚氯仿試劑較之傳統(tǒng)的配方更優(yōu)化。

產(chǎn)品內(nèi)容

緩沖液（Reagent A） 20毫升

萃取液（Reagent B） 30毫升

濃縮液（Reagent C）  5毫升

沉淀液（Reagent D） 50毫升

助沉液（Reagent E） 50微升

清理液（Reagent F）      50毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)         1份

保存方式

保存在－20℃冰箱里，避免光照，有效保證6月

用戶(hù)自備

1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器

渦旋震蕩儀：用于樣品混勻

微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品分離

實(shí)驗(yàn)步驟

• 準(zhǔn)備1個(gè)新的1.5毫升離心管
• 加入300微升樣品或加入適量的緩沖液（Reagent A）達(dá)到樣品總?cè)萘繛?00微升
• 加入300微升萃取液（Reagent B）到1.5毫升離心管
• 按上蓋子后，在渦旋震蕩儀上強(qiáng)烈震蕩30秒
• 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
• 移出上層液相溶液到新的1.5毫升離心管，留下25微升相位交界面的溶液
• （選擇步驟）如果樣品本身污染嚴(yán)重（例如含有過(guò)多組織蛋白等），重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟3至6
• 加入100微升濃縮液（Reagent C）到離心管
• 加入1毫升沉淀液（Reagent D）
• 加入1微升助沉液（Reagent E）
• 在渦旋震蕩儀上震蕩15秒，充分混勻
• （選擇步驟）如果DNA樣品為納克級(jí)或片斷為20個(gè)堿基，選擇置于－70℃冰箱孵育2小時(shí)或－20℃冰箱孵育過(guò)夜
• 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
• 小心抽去上清液
• 加入1毫升清理液（Reagent F）
• 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
• 小心抽去上清液
• 空氣中晾干
• 加入100微升緩沖液（Reagent A）
• 放進(jìn)－20℃冰箱長(zhǎng)期保存
• 進(jìn)行后續(xù)乙醇沉淀

注意事項(xiàng)

• 本產(chǎn)品為50次操作
• 操作時(shí)須戴手套
• 萃取液（Reagent B）具有腐蝕性，使用時(shí)小心謹(jǐn)慎
• 如果樣品量增加，則相應(yīng)增加試劑用量：樣品容量和試劑用量等量使用；最低不得低于200微升
• 萃取液（Reagent B）和樣品要充分混勻
• 移出操作時(shí)，避免接觸相位界面，以防污染
• 本公司提供系列核酸純化試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定萃取純度高
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)核酶污染