快速鹽析法DNA純化試劑盒

快速鹽析法DNA純化試劑盒產(chǎn)品說明書

主要用途

快速鹽析法DNA純化試劑是一種旨在使用高鹽溶液以取代有機溶劑，達到去蛋白質(zhì)，來純化DNA的簡易快速的技術(shù)方法。其適用于直接從動物細胞或人體細胞包括血白細胞萃取DNA樣品，無需經(jīng)過酚氯仿的操作。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，操作方便迅速，去蛋白程度強，萃取產(chǎn)量高。

技術(shù)背景

相位分離例如酚氯仿是萃取DNA的常用技術(shù)，但是有機溶劑存在一定的局限性。由此一些快速、安全、廉價的方法（諸如透析和過濾等）應(yīng)運而生，其中鹽析法便是一種。采用高鹽離子濃度達到去除細胞蛋白質(zhì)被證明十分有效。

產(chǎn)品內(nèi)容

緩沖液 10毫升

鹽析液 10毫升

沉淀液      20毫升

清理液 20毫升

溶解液 10毫升

產(chǎn)品說明書   1份

保存方式

保存在4℃冰箱里

用戶自備

1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器

臺式微型離心機：用于沉淀核酸

渦旋震蕩儀：用于混勻化學(xué)試劑

實驗步驟

方法一：多孔板細胞核酸純化

• 抽掉多孔細胞培養(yǎng)板（6孔板至48孔板）中任一孔的細胞培養(yǎng)液
• 加入300微升細胞溶解液到該培養(yǎng)孔里，混勻細胞
• 移出細胞混懸液到1.5毫升離心管
• 加入150微升核酸鹽析液
• 渦旋震蕩15秒
• 放進臺式微型超速離心機離心30分鐘，速度為4500g
• 移出上清液到新的1.5毫升離心管
• 加入900微升核酸沉淀液A
• 輕輕混勻，直到DNA沉淀物出現(xiàn)
• 放進臺式微型超速離心機離心5分鐘，速度為4500g
• 小心抽掉上清液
• 加入500微升核酸沉淀液B
• 放進臺式微型超速離心機離心5分鐘，速度為4500g
• 小心抽掉上清液
• 室溫下晾干
• 加入15微升核酸緩沖液
• 放進4℃冰箱過夜
• 次日，取1微升進行50微升的PCR反應(yīng)

方法二：懸浮細胞核酸純化

• 移入1毫升懸浮細胞（總量約100000細胞）到1.5毫升離心管
• 放進臺式微型超速離心機離心5分鐘，速度為4500g
• 小心抽掉上清液
• 加入300微升細胞溶解液，混勻細胞
• 加入150微升核酸鹽析液
• 渦旋震蕩15秒
• 放進臺式微型超速離心機離心30分鐘，速度為4500g
• 移出上清液到新的1.5毫升離心管
• 加入900微升核酸沉淀液A
• 輕輕混勻，直到DNA沉淀物出現(xiàn)
• 放進臺式微型超速離心機離心5分鐘，速度為4500g
• 小心抽掉上清液
• 加入500微升核酸沉淀液B
• 放進臺式微型超速離心機離心5分鐘，速度為4500g
• 小心抽掉上清液
• 室溫下晾干
• 加入15微升核酸緩沖液
• 放進4℃冰箱過夜
• 次日，取1微升進行50微升的PCR反應(yīng)

注意事項

• 本操作前無需酚氯仿萃取
• 如果細胞量大，則相應(yīng)增加操作容量

質(zhì)量標(biāo)準

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定與酚氯仿萃取相比，去蛋白程度和DNA分離產(chǎn)量無特別差異