粉碎法聚丙烯酰胺膠回收試劑盒

粉碎法聚丙烯酰胺膠回收試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

主要用途

粉碎法聚丙烯酰胺膠回收試劑是一種旨在直接通過離心粉碎和濾芯離心來收集聚丙烯酰胺凝膠上DNA或RNA的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種大小DNA、寡核苷酸合成以及SAGE技術(shù)等。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，簡便有效，純化程度和產(chǎn)量皆高。

技術(shù)背景

變性聚丙烯酰胺凝膠電泳（denaturing polyacrylamide gel eletrophoresis）是一種完全基于核酸分子量而不是分子結(jié)構(gòu)達(dá)到高分辯力的分離核酸分子的技術(shù)方法。無論是單鏈還是雙鏈、DNA還是RNA、合成的還是酶切的寡核苷酸，都能獲得滿意的純化結(jié)果。

產(chǎn)品內(nèi)容

穿孔離心管 20套

濾芯離心管 20套

擠壓塞 1件

洗脫液（Reagent A） 5毫升

產(chǎn)品說明書    1份

保存方式

保存洗脫液（Reagent A）在4℃冰箱里，其余的保存在室溫下，有效保證6月

用戶自備

刀片：用于切割膠體

1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器

微型臺式離心機(jī)：用于沉淀DNA

實驗步驟

• 仔細(xì)切下電泳后聚丙烯酰胺凝膠上的DNA條帶
• 放進(jìn)穿孔離心管
• 放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心3分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
• 仍掉穿孔離心管，確保沒有凝膠物質(zhì)殘留
• 加入50或100微升洗脫液（Reagent A）
• 渦旋震蕩15秒
• 放進(jìn)65℃恒溫水槽孵育15分鐘，期間渦旋震蕩15秒二次
• 移出50或100微升液體到濾芯離心管
• 放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
• 用刀片切去2毫升離心管底部
• 用擠壓塞擠出2毫升離心管內(nèi)所有膠體到濾芯離心管
• 放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
• （選擇步驟）轉(zhuǎn)180度方向再離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
• 去掉濾芯
• 放進(jìn)4℃冰箱保存或即刻進(jìn)行PCR操作
• 或繼續(xù)濃縮以及高質(zhì)純化

注意事項

• 本產(chǎn)品為20次操作
• 本產(chǎn)品適合于各種染色條件的DNA條帶，包括溴化乙腚染色、銀染、SYBR Green染色等
• 操作時須戴手套
• 使用新的或經(jīng)過酒精消毒的刀片切割條帶膠體和2毫升離心管底部
• 擠壓塞使用后，須酒精處理
• 洗脫液的量取決于條帶膠體的大小，一個條帶50微升。不要超過6個條帶
• 必要時，可以采�。�70℃冷凍法（孵育60分鐘）增加膠回收效率
• 必要時，可以增加孵育時間，加強(qiáng)核酸滲透
• 高質(zhì)純化回收產(chǎn)物用于測序等為理想選擇
• 高質(zhì)純化廣泛應(yīng)用于尖端基因技術(shù)操作，例如SAGE技術(shù)、數(shù)字化染色體基因型完全分析技術(shù)、克隆純化技術(shù)等
• 本公司提供系列膠回收試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定回收產(chǎn)量和純度顯著