鼠尾菌使用說明書

鼠尾菌使用說明書微生物培養(yǎng)方法：
1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù)，而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜，對平板的要求比較高，可參照以下步驟：
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃，向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿，輕輕搖動培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部，待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置，用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展，使之分布均勻。
資源名稱  鼠尾菌使用說明書
種屬 Muricauda sp.
分離基物  水樣/表層海水
提供形式  凍干物
安全等級  1
模式菌株  no
應(yīng)用領(lǐng)域  近海細(xì)菌
鼠尾菌使用說明書培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基  471
生長條件  25℃
存儲條件  液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
詳細(xì)說明
描述  與模式菌株Muricauda lutimaris SMK-108(T) EU156065的相似性為94.219%（Diff/Total nt84/1453）；在2216E培養(yǎng)上25°C培養(yǎng)5天，菌落圓形，金黃色不透明，表面光滑濕潤，微凸，邊緣規(guī)則，無暈環(huán)，直徑1-2mm。
鼠尾菌使用說明書實驗內(nèi)容：
1.稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查 
2.干熱滅菌：裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物 
3.高壓蒸汽滅菌：加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查 
4.過濾除菌：組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌
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透析用玻璃紙100毫克保存：-20℃
61791-12-6聚氧醚(35)蓖麻油Polyoxyl 35 Castor Oil
ANODEBUFFER陽極緩沖液,10X超純級1LRT
酵母膏 Yeast extract 8013-1-2 250G 培養(yǎng)基
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十四烷基鈉 Sodium 1-tetradecanesulfonate (99%) 6994-45-2 1G 通用試劑
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Trypanblue臺盼藍(lán)5克超純，99%
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鼠尾菌使用說明書的保存方法：
傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。
懸液保存法：
① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法：
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍最廣的微生物保存法。