獨(dú)島極地桿菌使用說明書

資源名稱 獨(dú)島極地桿菌使用說明書
種屬 Polaribacter dokdonensis
分離基物    水樣/上層海水
提供形式    凍干物
安全等級(jí)    1
模式菌株  no
應(yīng)用領(lǐng)域    潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油污染海域菌群
獨(dú)島極地桿菌使用說明書培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基    471
生長條件    28℃
存儲(chǔ)條件    液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
詳細(xì)說明
描述    與模式菌株P(guān)olaribacter dokdonensis DSW-5(T) DQ004686 相似性為98.143%；在2216E培養(yǎng)基28℃條件下生長3天，菌落呈圓形,黃色不透明,表面光滑濕潤,邊緣規(guī)則,無暈環(huán)，中央凸起
獨(dú)島極地桿菌使用說明書的保存方法：
傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。
懸液保存法：
① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法：
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍最廣的微生物保存法。
獨(dú)島極地桿菌使用說明書微生物培養(yǎng)方法：
1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對菌落計(jì)數(shù)，而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜，對平板的要求比較高，可參照以下步驟：
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃，向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿，輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部，待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置，用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展，使之分布均勻。
以下是 獨(dú)島極地桿菌使用說明書相關(guān)產(chǎn)品:
銅shēng huà shì jì容量：100克
56602-33-6本丙三唑-1-三(基)-三扶磷酸酯 (BOP)Benzotriazol-1-yloxytris(dimetxylamino)-phosphonium hexafluorophosphate
0.5ml薄壁管5毫克
1,2-二氫-2-異丁氧... Isobutyl 1,2-dihydro-2-isobutoxy-1-qui... 38428-14-7 5G 通用試劑
言醋-L-谷安醋 L-(+)-Glutcmic ccid xy7nochloridq 138-12-8
兔血清(無菌)500克
1317-40-4硫化銅COPPER(II) SULFIDE
鄰硝基本胺125ku
1,2,4-氧基苯 1,2,4-Trimethoxybenzene,97% 135-77-3 5G 通用試劑
滌丹諾忻系統(tǒng)適用性合劑 Didcnosinq SystqM Suitcbility Mixturq 69622-02-6
Fmoc-Ser-OHN-芴甲氧羰基-L-絲酸10克特純，98%
9047-09-0血紅蛋白(牛,粉末)HEMOGLOBIN
metxyl 3-isothiocyanato-4-metxylthiopxene-2-carboxylate 81321-15-5
丙烯酸異丁酯 Isobutyl Acrylate,≥99.0% 106-63-8 100ML 通用試劑
順-15-二十四碳單烯酸/神經(jīng)酸/順-15-二十四碳烯酸/鯊油酸/二十四烯酸/Nervonic acid BR，99% 100毫克 國產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠狀腺原酸(T3)ELISA試劑盒 ，英文名： T3 ELISA Kit
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA檢測試劑盒Mousemonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAkit 96T/48T
人干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)免疫試劑盒 Human IFITM1 ELISA kit
RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit大鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
BrdU標(biāo)記法組織石蠟切片細(xì)胞繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MouseLaminin,LNELISA試劑盒小鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
豚鼠白介素22(IL-22)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-22 ELISA Kit
Human ubiquitin protein (Ub) ELISA Kit 人泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒
RabbitIerleukin1β,IL-1βELISAKit 兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBeta-EP(RabbitBeta-Endorphin)ELISAKit兔子β內(nèi)啡肽規(guī)格：48T/96T
細(xì)菌樣品二維電泳裂解液用于細(xì)菌蛋白二維電泳
RabbitGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
獨(dú)島極地桿菌使用說明書小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat leptin receptor (LR/Ob-R) ELISA Kit 大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒
Human50%complemehemolysis,CH50ELISAKit 人血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2ELISA試劑盒人抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物細(xì)胞色素C釋放凋亡檢測試劑盒10次
Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,AIL-R4ELISAKit人壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(AIL-R4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
 獨(dú)島極地桿菌使用說明書實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：
1.稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查 
2.干熱滅菌：裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物 
3.高壓蒸汽滅菌：加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查 
4.過濾除菌：組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌