貝氏貝諾孢子蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品名稱：貝氏貝諾孢子蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱：Besnoitia besnoitiPCR
產(chǎn)品分類：PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品編號(hào)：BH10134P
產(chǎn)品規(guī)格：50次
本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏，還具有以下特點(diǎn)：
1.  即開(kāi)即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單。
2.  預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 494 bp。
3.  本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

貝氏貝諾孢子蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格及成分
即用型指標(biāo)Mix 3.0（1.5 mL）
專一性引物對(duì)    （100 μL）
陽(yáng)性對(duì)照        （50 μL）    
超純水          （1 mL）
說(shuō)明書：         1 份
運(yùn)輸保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限一年。
使用方法    
1 實(shí)驗(yàn)所需器材與試劑
1.1 器材
1）PCR儀
2）PCR反應(yīng)管
3）電泳儀及水平電泳槽
4）高速離心機(jī)
5）微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1）瓊脂糖
2）EB（溴化乙錠）
3）去離子水或雙蒸水
注意事項(xiàng)   
5.1使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書全文。
5.2 操作時(shí)應(yīng)盡量少說(shuō)話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽(yáng)性；整個(gè)檢測(cè)過(guò)程中，反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行，以避免交叉污染。 5.3 實(shí)驗(yàn)時(shí)，試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻（混勻時(shí)禁止激烈振蕩，只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻）。
5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后，應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增，以免形成過(guò)多的二聚體。
5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會(huì)影響本品的檢測(cè)結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度，建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測(cè)。
綠10克
(腦浸粉)
5基酸，英文名或英文縮寫：5Aminovaleric acid，級(jí)別：CP，規(guī)格：50克
檸檬醋鉍銨;枸櫞醋鉍銨 cMMoniuM bisMuth citrctq 64
癸二醋二丁酯 Dibutyl Sqbccctq (cS) 1033
微量可調(diào)移液器P101克保存：20℃
(聚酮)
乙酯shēng huà shì jì容量：100克
5拂尿嘧啶 5Fluorourccil;5FluoropyriMidinq2,4dionq;2,4Dioxo5FluoropyriMidinq;5Fluoro2,4(1H,3H)pyriMidinqdionq;2,4Dixy7noxy5fluoropyriMidinq�� 11/1/8
乙酸鎘shēng huà shì jì容量：RT10克
1丁基3甲基咪唑六扶嶙酸鹽，英文名或英文縮寫：BMIMPF6，級(jí)別：AR，97%，規(guī)格：5克
3四乙酸二鈉鋅etxylENEDIAMINETETRAACETIC ACID DISODIU&
etxyl 3(benzylthio)6,6dimetxyl4oxo4,5,6,7tetraxy7nobenzo[ 259
苯 1Bromo4iodobenzene,98% 5898 5G 表面活性劑
基炳醋酯 (+4℃) Nc
人H1N1 抗體(IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔血栓素B2(TXB2)免疫試劑盒 Rabbit Thromboxane B2,TX-B2 ELISA Kit
橋粒糖蛋白2(DSC2)ELISA試劑盒 ，英文名： DSC2 ELISA Kit
rabbitEndothelin1,ET-1ELISA試劑盒兔子內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Humanai-myelinaibodyIgA,AMAIgAELISA試劑盒人抗髓0脂抗體IgA(AMAIgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanCaspase12,Casp-12ELISAKit人胱天蛋白酶12(Casp-12)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人多巴胺-β羥化酶(DBH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠M型肌酸激酶(CKM)免疫試劑盒 Mouse Creatine kinase M-type,CKM ELISA kit
胃內(nèi)因子(GIF)ELISA試劑盒 ，英文名： GIF ELISA Kit
Mouseneurofilameprotein,NFELISA試劑盒小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
ELISAKitHSP-90兔熱休克蛋白90規(guī)格：48T/96T
GuineaPig50%complemehemolysis,CH50ELISAKit豚鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
用方法
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品 DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 stn 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1.標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。
3.先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
1.在 6 號(hào)管中加入 5  μL 10E7 拷貝/μL  的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
2.換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
3.換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
4.NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
5.從 1-6 號(hào)管中分別取 5  μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見(jiàn)下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值， 并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 
一．PCR 檢測(cè)（20 μL 體系）
1.在 PCR 管中加入下列成分（待測(cè)樣品需要做三次重復(fù)，下表只列出一次） 
注:僅 ABI7500、7700 和 7900 儀器需要使用 ROX 作為對(duì)照，其他熒光 PCR 儀器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX。
建議 PCR 反應(yīng)參數(shù)（具體 PCR 參數(shù)可以根據(jù)儀器不同而自行優(yōu)化）
貝氏貝諾孢子蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒3. 數(shù)據(jù)采集
按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí)，最大吸收光譜在 471 nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的最大吸收光譜在 500 nm， 最大發(fā)射光譜在 530 nm。
四、數(shù)據(jù)處理
以 stn 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。