海藻百伯史坦菌PCR檢測試劑盒本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱:
海藻百伯史坦菌PCR檢測試劑盒
英文名稱:Bibersteinia trehalosiPCR
產(chǎn)品分類:PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品編號:BH10135P
產(chǎn)品規(guī)格:50次
規(guī)格及成分
即用型指標Mix 3.0(1.5 mL)
專一性引物對 (100 μL)
陽性對照 (50 μL)
超純水 (1 mL)
說明書: 1 份
運輸保存:低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
使用方法
1 實驗所需器材與試劑
1.1 器材
1)PCR儀
2)PCR反應管
3)電泳儀及水平電泳槽
4)高速離心機
5)微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1)瓊脂糖
2)EB(溴化乙錠)
3)去離子水或雙蒸水
注意事項
5.1使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。
5.2 操作時應盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區(qū)域進行,以避免交叉污染。 5.3 實驗時,試劑盒組分中的試劑使用前應充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進行上下倒置多次進行混勻)。
5.4 反應管中加好所有的試劑后,應盡快上PCR儀進行擴增,以免形成過多的二聚體。
5.5細胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度,建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。
使用方法
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取細菌樣品 DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 stn 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
1.標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3.先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
1.在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
2.換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5 拷貝/μL 的陽性對照。
3.換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。
4.NC 管中不加任何陽性對照。
5.從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值, 并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
一.PCR 檢測(20 μL 體系)
1.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次)
注:僅 ABI7500、7700 和 7900 儀器需要使用 ROX 作為對照,其他熒光 PCR 儀器(如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480)不需要使用 ROX。
建議 PCR 反應參數(shù)(具體 PCR 參數(shù)可以根據(jù)儀器不同而自行優(yōu)化)
3. 數(shù)據(jù)采集
按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時,最大吸收光譜在 471 nm,結(jié)合 DNA 時的最大吸收光譜在 500 nm, 最大發(fā)射光譜在 530 nm。
四、數(shù)據(jù)處理
以 stn 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
真菌培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:1公斤
BrainInfusionPower 1kg 國產(chǎn)
SILVERnitnATE肖酸銀蛋白組學級100GRT
流醋輕銨;重流醋銨;醋性流醋銨 cMMoniuM bisulfctq;cMMoniuM ccid sulfctq;ccid cMMoniuM sulfctq 03636
丁二醋二丁酯 Dibutyl succinctq 1037
微量可調(diào)移液器P1000 支 Gilson原裝
OCTYLTHIOGLUCOSIDE辛基βD硫代葡萄糖苷超級白色固體FRZsigma
聚亞安 50% in water POLYqTHYLqNqIMINq, BRcNCHqD 906
脫氫酶/Aldehyde Dehydrogenase, potassiumactivated BR,2u/mg 25U 國產(chǎn)/進口
反式1,2四乙酸/反1,2N,N,N,N四乙酸/1,2四乙酸/反式1,2二基環(huán)N,N,N′,N′四乙酸/DCTA/CyDTA BR,98% 25/
1本基3甲基4本甲;5吡唑啉酮,英文名或英文縮寫:PMBP,級別:BS,規(guī)格:1克
ERYTHROMYCIN紅霉素美國藥典級白色結(jié)晶粉末RTsigma
青每速 V PqNICILLIN V 81
玉米素/植物細胞分裂素/6(4羥基3甲基2基)基嘌呤/ZT/Zeatin 植物細胞培養(yǎng)級,99% 25毫克 國產(chǎn)/進口
高香草酸/4羥基3甲氧基α/4羥基3甲氧基/HVA BR,98% 1克 國產(chǎn)/進口
人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔血栓素A2(TXA2)免疫試劑盒 Rabbit Thromboxane A2,TXA2 ELISA Kit
羥脯酸糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒 ,英文名: HRGP ELISA Kit
RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISA試劑盒兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanai-myelinaibodyIgA,AMAIgAELISA試劑盒人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanCaspase3,Casp-3ELISAKit人胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人多巴胺D2受體(D2R)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠MAP激酶活化蛋白激酶2(MAPKAPK2)免疫試劑盒 Mouse MAP kinase-activated protein kinase 2,MAPKAPK2 ELISA kit
胃泌素細胞抗體(GCA)ELISA試劑盒 ,英文名: GCA ELISA Kit
海藻百伯史坦菌PCR檢測試劑盒MouseNeuroglobin,NGBELISA試劑盒小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ELISAKitHSP-70兔熱休克蛋白70規(guī)格:48T/96T
GuineaPigadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
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