產(chǎn)品名稱:
酵母菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Blastocystis spp.PCR
產(chǎn)品分類:PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品編號(hào):BH10140P
產(chǎn)品規(guī)格:50次
本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
規(guī)格及成分
即用型指標(biāo)Mix 3.0(1.5 mL)
專一性引物對(duì) (100 μL)
陽(yáng)性對(duì)照 (50 μL)
超純水 (1 mL)
說(shuō)明書: 1 份
運(yùn)輸保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
酵母菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒使用方法
1 實(shí)驗(yàn)所需器材與試劑
1.1 器材
1)PCR儀
2)PCR反應(yīng)管
3)電泳儀及水平電泳槽
4)高速離心機(jī)
5)微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1)瓊脂糖
2)EB(溴化乙錠)
3)去離子水或雙蒸水
注意事項(xiàng)
5.1使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書全文。
5.2 操作時(shí)應(yīng)盡量少說(shuō)話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽(yáng)性;整個(gè)檢測(cè)過(guò)程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行,以避免交叉污染。 5.3 實(shí)驗(yàn)時(shí),試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時(shí)禁止激烈振蕩,只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻)。
5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增,以免形成過(guò)多的二聚體。
5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會(huì)影響本品的檢測(cè)結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度,建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測(cè)。
Chromium(III)acetate25克BR,99%
103DDL
BRADFORDREAGENTBRADFORD試劑蛋白組學(xué)級(jí)透明藍(lán)色液體COLDsigma
1,3二5,5二基內(nèi)酰脲 1,3Dibromo5,5dimqthylhydcntoin 7
紅色典化共(劇讀) MqRCURY(II) IODIDq 70
微量可調(diào)八道移液器P300shēng huà shì jì容量:保存:20℃250毫克
三丁基錄化錫;錄化三丁基錫 Tributyltin chloridq;Chlorotributyltin;Chlorotributylstcnncnq;Trinbutyl chlorostcnnctq 1
2,4Dimetxylpxenylhydrezine xy7nochloride 600833
四氫2 2二甲基4H... Tetrahydro2,2dimethyl4Hpyran4one 1 250MG 通用
FmocDAsnOHN芴甲氧羰基D天冬酰胺100克特,98%
言醋肌安醋 ScRCOSINq xy7noCHLORIDq 63
3etxyl1Hindazole5boronic acid pinacol ester 8
鄰磺胺 osulfonamide,99% 887 25G 通用試劑
CBZL色酸/N芐氧羰基L色酸/CBZLTryptophan 特,99% 5克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人EJ抗體/抗甘酰NA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫試劑盒 Rabbit Vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA kit
羥甲基戊二酸單酰輔酶A(HMG-CoA)ELISA試劑盒 ,英文名: HMG-CoA ELISA Kit
rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISA試劑盒兔子促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanai-neuophilcytoplasmicaibody,cANCAELISA試劑盒人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humancatecholamine,CAELISAKit人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人端粒酶(TE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠I型膠原蛋白免疫試劑盒 Mouse Collagen-like Bioprotein I(RCB I)ELISA Kit
胃動(dòng)蛋白2(GKN2)ELISA試劑盒 ,英文名: GKN2 ELISA Kit
Mousenicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA試劑盒小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ELISAKituPA兔尿激酶型纖溶酶原激活物規(guī)格:48T/96T
GuineapigGrowthhormone,GHELISAKit豚鼠生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
用方法
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品 DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 stn 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1.標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3.先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
1.在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
2.換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
3.換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
4.NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
5.從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值, 并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
一.PCR 檢測(cè)(20 μL 體系)
1.在 PCR 管中加入下列成分(待測(cè)樣品需要做三次重復(fù),下表只列出一次)
注:僅 ABI7500、7700 和 7900 儀器需要使用 ROX 作為對(duì)照,其他熒光 PCR 儀器(如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480)不需要使用 ROX。
建議 PCR 反應(yīng)參數(shù)(具體 PCR 參數(shù)可以根據(jù)儀器不同而自行優(yōu)化)
酵母菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒3. 數(shù)據(jù)采集
按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),最大吸收光譜在 471 nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的最大吸收光譜在 500 nm, 最大發(fā)射光譜在 530 nm。
四、數(shù)據(jù)處理
以 stn 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
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上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
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