木鼠布魯氏菌PCR檢測試劑盒

產(chǎn)品名稱：木鼠布魯氏菌PCR檢測試劑盒
英文名稱：Brucella neotomaePCR
產(chǎn)品分類：PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品編號：BH10194P
產(chǎn)品規(guī)格：50次
本試劑盒不但準確、快速、靈敏，還具有以下特點：
1.  即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單。
2.  預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3.  本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

木鼠布魯氏菌PCR檢測試劑盒規(guī)格及成分
即用型指標Mix 3.0（1.5 mL）
專一性引物對    （100 μL）
陽性對照        （50 μL）    
超純水          （1 mL）
說明書：         1 份
運輸保存：低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。
使用方法    
1 實驗所需器材與試劑
1.1 器材
1）PCR儀
2）PCR反應管
3）電泳儀及水平電泳槽
4）高速離心機
5）微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1）瓊脂糖
2）EB（溴化乙錠）
3）去離子水或雙蒸水
注意事項   
5.1使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。
5.2 操作時應盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個檢測過程中，反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區(qū)域進行，以避免交叉污染。 5.3 實驗時，試劑盒組分中的試劑使用前應充分融化并混勻（混勻時禁止激烈振蕩，只需要進行上下倒置多次進行混勻）。
5.4 反應管中加好所有的試劑后，應盡快上PCR儀進行擴增，以免形成過多的二聚體。
5.5細胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度，建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。
乙酸2奈酯，英文名或英文縮寫：βNapthyl acetate，級別：高，98%，無水物，規(guī)格：5克
LoadingBuffer 1ml/5ml 國產(chǎn)
DLMalicacid蘋果酸1毫克CP，99%
固綠 FCF brillicnt bluq G 3239
羅丹明 B Rhodamine B (Dye content, ≥%) 889 25G 染色劑
吐溫6025克
827均本四酐1,2,4,5Benzenetetracarboxylic anhydride
TRISTris蛋白組學級500G861RT
結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂 Violet Red Bile Agar Null 250G 培養(yǎng)基
二基二流代安基加醋銀鹽;二安基二流代加醋銀;申試劑 DiqthyldithioccrbcMic ccid silvqr sclt;cgDDTC 106
4甲基傘形酮βD葡萄糖苷，英文名或英文縮寫：MUD，級別：BR，規(guī)格：100克
DL天冬酸;DL天冬酸;DL天門冬酸;DL基丁二酸;DL基琥珀酸DLAspartic acid
DEAD二乙基偶氮二羧酸酯1克AR，98%
1.3丁二¤ 1,3Butcdiqnq;Bivinyl;Divinyl;qrythrqnq;Biqthylqnq;α,γButcdiqnq;Vinylqthylqnq;Pyrrolylqnq 1090
木鼠布魯氏菌PCR檢測試劑盒錄化亞工 MqRCUROUS CHLORIDq 10111
人Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊ELISA試劑盒
凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒 ，英文名： Gelsolin ELISA Kit
Rabbitprothrombinfragme1+2,F1+2ELISA試劑盒兔凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanBcellactivationfactorrfromthetumornecrosisfactorfamilyreceptor,BAFF-RELISA試劑盒人B細胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanCoxsackievirusIgG，CoxV-IgGELISAKit人柯薩奇病毒IgG(CoxV-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠8異前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)免疫試劑盒 Mouse 8-iso prostaglandin F2α,8-iso-PGF2a ELISA kit
脫-γ-羧基凝血酶原(DCP)ELISA試劑盒 ，英文名： DCP ELISA Kit
Mouseprostatespecificaigen,PSAELISA試劑盒小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
ChickenHeatShockProtein20,HSP-20ELISA試劑盒雞熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
human3-hydroxy-3-methylglaryl-CoenzymeAsyhase1,HMGCS1ELISAKit人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1(HMGCS1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
用方法
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取細菌樣品 DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 stn 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
1.標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。
3.先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
1.在 6 號管中加入 5  μL 10E7 拷貝/μL  的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
2.換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5 拷貝/μL 的陽性對照。
3.換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。
4.NC 管中不加任何陽性對照。
5.從 1-6 號管中分別取 5  μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值， 并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。 
一．PCR 檢測（20 μL 體系）
1.在 PCR 管中加入下列成分（待測樣品需要做三次重復，下表只列出一次） 
注:僅 ABI7500、7700 和 7900 儀器需要使用 ROX 作為對照，其他熒光 PCR 儀器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX。
建議 PCR 反應參數(shù)（具體 PCR 參數(shù)可以根據(jù)儀器不同而自行優(yōu)化）
3. 數(shù)據(jù)采集
按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時，最大吸收光譜在 471 nm，結(jié)合 DNA 時的最大吸收光譜在 500 nm， 最大發(fā)射光譜在 530 nm。
四、數(shù)據(jù)處理
以 stn 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。