玉米BT11 PCR檢測試劑盒

玉米BT11 PCR檢測試劑盒規(guī)格及成分
即用型指標Mix 3.0（1.5 mL）
專一性引物對    （100 μL）
陽性對照        （50 μL）    
超純水          （1 mL）
說明書：         1 份

運輸保存：低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。
本試劑盒不但準確、快速、靈敏，還具有以下特點：
1.  即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單。
2.  預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3.  本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱：玉米BT11 PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品分類：PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品編號：BH11562P
產(chǎn)品規(guī)格：50T
使用方法    
1 實驗所需器材與試劑
1.1 器材
1）PCR儀
2）PCR反應管
3）電泳儀及水平電泳槽
4）高速離心機
5）微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1）瓊脂糖
2）EB（溴化乙錠）
3）去離子水或雙蒸水
使用方法
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取細菌樣品 DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 stn 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
1.標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。
3.先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
1.在 6 號管中加入 5  μL 10E7 拷貝/μL  的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
2.換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5 拷貝/μL 的陽性對照。
3.換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。
4.NC 管中不加任何陽性對照。
5.從 1-6 號管中分別取 5  μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值， 并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。 
玉米BT11 PCR檢測試劑盒一．PCR 檢測（20 μL 體系）
1.在 PCR 管中加入下列成分（待測樣品需要做三次重復，下表只列出一次） 
注:僅 ABI7500、7700 和 7900 儀器需要使用 ROX 作為對照，其他熒光 PCR 儀器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX。
建議 PCR 反應參數(shù)（具體 PCR 參數(shù)可以根據(jù)儀器不同而自行優(yōu)化）
3. 數(shù)據(jù)采集
按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時，最大吸收光譜在 471 nm，結(jié)合 DNA 時的最大吸收光譜在 500 nm， 最大發(fā)射光譜在 530 nm。
四、數(shù)據(jù)處理
以 stn 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
440124-96-9 依法韋侖相關(guān)物質(zhì)B標準品 cards
云南鐵杉Tsuga dumosa Alfa-鐵杉脂素 85699-62-3 C20H20O6 ≥97% 人甲肝免疫球蛋 BRP (-20°C 運輸(H0950000
奧卡西產(chǎn)雜質(zhì)B標準品10mg
Rivastigmine Tarate 卡巴拉汀標準品129101-54-8 200mg卡巴拉汀標準品
去氫木香內(nèi)酯 477-43-0 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
隱丹參酮 35825-57-1 藥理實驗專用單體 隱丹參醌
風樹Jaopha curcas 13-metxyl-8,11,13-podocarpaiene-3,12-diol 13-甲基-8,11,13-羅漢松科-3,12-二醇 769140-74-1 C18H26O2 高效錄扶青菊酯度標準物質(zhì)061099
對照品蔗糖111507-200001含量測定
Oxfendazole 奧酚噠唑標準品53716-50-0 200mg奧酚噠唑標準品
鉤吻Gelsemium Gelsemine 鉤吻堿 509-15-9
樟科山胡椒屬植物烏藥 Lindera aggregata (Sims) Kosterm. Norisoboldine 去甲異波爾定 23599-69-1 C18H19NO4 ≥98%
紫杉肽Pcclitcxql20mg
王爺葵Tithonia diversifolia Tagitinin F 圓葉腫柄菊素 F 59979-57-6 C19H24O6 本磺酸安錄地平(100 74
中藥對照藥材臭靈丹121231-200301TLC法鑒別
Acetylshikonin乙酰紫草素 度：≥98%
FWA淡水魚類瓊脂培養(yǎng)基250g用于淡水魚類腸道內(nèi)細菌檢測
Skim Milk incubation media Skim Milk
點頭根霉 支/瓶
HektoenEntericAgar
玉米BT11 PCR檢測試劑盒DTMMedium
甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)MYP28380250g用于蠟樣芽孢桿菌的菌數(shù)測定及分離培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.64，GB/T4789.03，SN02和...
W.L.營養(yǎng)肉湯 (CM0501) Oxoid incubation media W.L.營養(yǎng)肉湯 (CM0501) Oxoid
斯氏油脂酵母 可制雙鏈RNA 支/瓶
LMGAgar
三糖鐵瓊脂(TSI) 250g 用于腸桿菌科細菌的生化反應篩選(葡萄糖，乳糖，蔗糖)
注意事項   
5.1使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。
5.2 操作時應盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個檢測過程中，反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區(qū)域進行，以避免交叉污染。 5.3 實驗時，試劑盒組分中的試劑使用前應充分融化并混勻（混勻時禁止激烈振蕩，只需要進行上下倒置多次進行混勻）。
5.4 反應管中加好所有的試劑后，應盡快上PCR儀進行擴增，以免形成過多的二聚體。
5.5細胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度，建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。