玉米T25 PCR檢測試劑盒

玉米T25 PCR檢測試劑盒本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏，還具有以下特點(diǎn)：
1.  即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單。
2.  預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3.  本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱：玉米T25 PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品分類：PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品編號：BH11573P
產(chǎn)品規(guī)格：50T

規(guī)格及成分
即用型指標(biāo)Mix 3.0（1.5 mL）
專一性引物對    （100 μL）
陽性對照        （50 μL）    
超純水          （1 mL）
說明書：         1 份
運(yùn)輸保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限一年。
使用方法    
1 實(shí)驗(yàn)所需器材與試劑
1.1 器材
1）PCR儀
2）PCR反應(yīng)管
3）電泳儀及水平電泳槽
4）高速離心機(jī)
5）微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1）瓊脂糖
2）EB（溴化乙錠）
3）去離子水或雙蒸水
注意事項(xiàng)   
5.1使用本試劑前請仔細(xì)閱讀本說明書全文。
5.2 操作時應(yīng)盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個檢測過程中，反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行，以避免交叉污染。 5.3 實(shí)驗(yàn)時，試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻（混勻時禁止激烈振蕩，只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻）。
5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后，應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增，以免形成過多的二聚體。
5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測靈敏度，建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。
使用方法
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品 DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 stn 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
1.標(biāo)記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。
3.先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
1.在 6 號管中加入 5  μL 10E7 拷貝/μL  的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
2.換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5 拷貝/μL 的陽性對照。
3.換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。
4.NC 管中不加任何陽性對照。
5.從 1-6 號管中分別取 5  μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值， 并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 
一．PCR 檢測（20 μL 體系）
1.在 PCR 管中加入下列成分（待測樣品需要做三次重復(fù)，下表只列出一次） 
注:僅 ABI7500、7700 和 7900 儀器需要使用 ROX 作為對照，其他熒光 PCR 儀器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX。
建議 PCR 反應(yīng)參數(shù)（具體 PCR 參數(shù)可以根據(jù)儀器不同而自行優(yōu)化）
3. 數(shù)據(jù)采集
按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時，最大吸收光譜在 471 nm，結(jié)合 DNA 時的最大吸收光譜在 500 nm， 最大發(fā)射光譜在 530 nm。
四、數(shù)據(jù)處理
以 stn 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
二十七碳酸 Heptacosanoic acid 分 子 量：410.7200 CAS編號：7138-40-1 分子式：C27H54O2; CH3(CH2)25COOH 物理化學(xué)性質(zhì)：
云南松Pinus yunnanensis Massonianoside B none 188300-19-8 C25H32O10 β-1(C14072000
含量測定α-蒎烯110897-200001常溫，避光0.1ml
Carvedilol卡維地洛標(biāo)準(zhǔn)品72956-09-3200mg
四葉蘿芙木Rauvolfia tea
玉米T25 PCR檢測試劑盒銀杏內(nèi)酯J Ginkgolide J (≥98%,HPLC) 107438-79-9 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
野馬追Eupatorii Lindleyani Herba 野馬追內(nèi)酯 A 877822-41-8 C24H30O9 ≥98% 錄雷他定：用于系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(Y000060
對照品果糖100231-200303HPLC含量測定
釓特醇相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品112188-16-6 50mg釓特醇相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品
云南紅豆杉Taxus yunnanensis Baccatin IV 漿果赤霉素IV 57672-7
川芎 Ligusticum chuanxiong Ho Senkyunolide A 洋川芎內(nèi)酯A 62006-39-7 C12H16O2 ≥98%
D-(-)-奎寧醋D-(-)-inoneicccid≥98%，20mg/支
丹參同IIA;丹參同2A Tanshinone IIA 568-72-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
標(biāo)準(zhǔn)品鏈霉素0308-200012效價(jià)測定
Allylpyrocatechol -3,4-diacetate 3，4-烯丙基焦兒茶酚雙醋酸酯度：>95%
多價(jià)蛋白胨-酵母膏(PY)培養(yǎng)基250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))
SOC培養(yǎng)基 SOC Medium 用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)
指示選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250 用于炭疽桿菌的分離鑒別
沙氏BHI瓊脂250g/瓶用于真菌的檢測incubationmedia沙氏BHI瓊脂250g/瓶用于真菌的檢測
StandardIINutrientAgar
EthylVioletAziodeBroth
VJ Agar Vogel-Johnson incubation media VJ Agar Vogel-Johnson
長赤細(xì)菌 模式菌株，產(chǎn)生細(xì)菌葉綠素 支/瓶
aClTrypticaseSoyBroth
RV沙門菌增菌培養(yǎng)基(中國藥典) 250g 用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)