人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 HCC38通用/穩(wěn)轉(zhuǎn)/LUC活體成像

通用細(xì)胞株/耐藥株/Cas9穩(wěn)定持續(xù)表達(dá)細(xì)胞株/CRISPRi穩(wěn)定持續(xù)表達(dá)細(xì)胞株/Cas9誘導(dǎo)性表達(dá)細(xì)胞株/CRISPRi穩(wěn)定持續(xù)表達(dá)細(xì)胞/LUC1成瘤活體成像示蹤細(xì)胞株/LUC2單細(xì)胞活體成像示蹤細(xì)胞株/基因敲除、敲入穩(wěn)轉(zhuǎn)株/STR鑒定/支原體檢測(cè)

規(guī)格：T12.5*2

產(chǎn)品描述：
種屬：人源
組織來(lái)源：乳腺
疾�。涸�發(fā)性導(dǎo)管癌
年齡：50歲
性別：女
細(xì)胞類型：表皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)方式：
該細(xì)胞系培養(yǎng)所用基本培養(yǎng)基為RPMI1640 Medium, ,配置完全培養(yǎng)基時(shí)需加入10% FBS。

生物安全等級(jí)：1級(jí)

拆包 & 存儲(chǔ)：
1. 請(qǐng)立即檢查包裝袋是否有破損或漏液
2. 請(qǐng)立即將細(xì)胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出，并按照下方操作步驟進(jìn)行培養(yǎng)傳代
注意：如為凍存管，請(qǐng)收到后立即解凍培養(yǎng)

培養(yǎng)瓶中細(xì)胞操作步驟：
對(duì)于貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，寄送前，我們會(huì)將培養(yǎng)基充滿整個(gè)培養(yǎng)瓶，以減少產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中貼壁細(xì)胞的脫落。
1.收到細(xì)胞產(chǎn)品后，請(qǐng)注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細(xì)檢查是否渾濁、是否細(xì)菌污染。因在運(yùn)輸過(guò)程中存在顛簸，且有些細(xì)胞對(duì)溫度變化也很敏感，可能存在一些細(xì)胞脫落漂浮的情況，這些細(xì)胞仍是活細(xì)胞，請(qǐng)勿丟棄，可離心富集后傳代使用。
2.對(duì)于貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，在生物安全柜環(huán)境中，用真空泵去除培養(yǎng)瓶中的多余培養(yǎng)基，至剩余5-8mL左右，隨后將細(xì)胞置于含有5%CO2的37°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿培養(yǎng)瓶，請(qǐng)立即傳代
3.對(duì)于懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞，在生物安全柜環(huán)境中，轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞至離心管中，離心200×g/5-10min，去除上清后，用5mL培養(yǎng)基吹散細(xì)胞，轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，隨后置于含有5%CO2的37°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

凍存細(xì)胞操作步驟：
注意：為保存細(xì)胞的高存活率，請(qǐng)收到產(chǎn)品后，立即解凍培養(yǎng)。
1.將凍存管置于37°C水浴中來(lái)回晃動(dòng)，迅速解凍。為避免污染，確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速，大約2分鐘。
2. 一旦凍存管中液體融化后，立即取出，采用 70%酒精噴拭凍存管表面。從此步開始，后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。
3.將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mL完全培養(yǎng)基的離心管中， 離心200×g/5-10min，用真空泵去除含有凍存液的上清。
4. 用完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細(xì)胞復(fù)蘇的存活率，請(qǐng)將培養(yǎng)基在37°C水浴預(yù)熱后使用。
5. 將細(xì)胞置于含有5%CO2的37°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：
1. 吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基。
2. 加入1.0 mL0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37°C培養(yǎng)箱中孵育，直至細(xì)胞從壁上脫落分離。此過(guò)程大約需要3至5分鐘（此處為12.5 cm2培養(yǎng)瓶所用體積，可根據(jù)實(shí)際情況增減用量）
3. 加入2mL完全培養(yǎng)基中和胰蛋白酶，并輕輕吹打?qū)⒓?xì)胞從培養(yǎng)瓶表面吹落，并使細(xì)胞分散。
4. 離心200xg/5min，去除上清后，取適量的培養(yǎng)基將細(xì)胞重懸,取適量懸液置于新的培養(yǎng)瓶中，并加入新鮮細(xì)胞完全培養(yǎng)基至總體積為4mL。
5. 將細(xì)胞置于含有5%CO2的37°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
傳代比例：建議 1:2至1:4
培養(yǎng)基換液: 每隔2 至 3 天。