基因敲入(Knockin)是在目的基因特定位點(diǎn)引進(jìn)特定的突變或外源基因,比如在目的基因引入特定點(diǎn)突變,或?qū)?bào)告基因(如EGFP、Luciferase等)或需要表達(dá)的功能性基因。
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基因敲入(Knock-in)模型的應(yīng)用:
基因敲入模型包括:
通過CRISPR基因編輯技術(shù),構(gòu)建一個(gè)基因敲入小鼠模型一般需要6-9個(gè)月。
通過ES細(xì)胞打靶技術(shù),構(gòu)建一個(gè)基因敲入小鼠模型一般需要9-12個(gè)月。
您可以聯(lián)系我們的技術(shù)顧問,為您設(shè)計(jì)并定制您的基因敲入小鼠模型。
常規(guī)基因敲入
外源基因共表達(dá)策略:
外源基因替代小鼠內(nèi)源基因表達(dá)策略(即敲入同時(shí)敲除):
條件性點(diǎn)突變
將點(diǎn)突變(人類致病候選點(diǎn)突變)與Cre-LoxP系統(tǒng)結(jié)合,引入到小鼠同源基因?qū)?yīng)位置,可實(shí)現(xiàn)組織特異性點(diǎn)突變。
通過插入Loxp位點(diǎn)和含有突變位點(diǎn)的Exon實(shí)驗(yàn)基因的條件性點(diǎn)突變。
人源化
將小鼠內(nèi)源基因替換為人源同源基因,構(gòu)建用于疾病、免疫、生理學(xué)研究以及抗體藥物篩選及藥效評(píng)價(jià)的人源化基因工程小鼠模型。
完整替換策略:
直接插入人源cDNA策略: