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基因敲入小鼠模型建立

基因敲入小鼠模型建立


Gene Knockin Mouse Models
基因敲入(Knockin)是在目的基因特定位點(diǎn)引進(jìn)特定的突變或外源基因,比如在目的基因引入特定點(diǎn)突變,或?qū)?bào)告基因(如EGFP、Luciferase等)或需要表達(dá)的功能性基因。
服務(wù)類別:轉(zhuǎn)基因總訪問:9098
最后更新:2024-9-11半年訪問:151
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基因敲入(Knock-in)模型的應(yīng)用:

  • 模擬人類遺傳機(jī)制,探索致病機(jī)制
  • 示蹤基因表達(dá)
  • 進(jìn)行譜系示蹤,追溯細(xì)胞起源
  • 將小鼠基因人源化,加速藥物研發(fā)
  • 將分子遺傳學(xué)工具引入小鼠模型中


基因敲入模型包括

  • 常規(guī)基因敲入
  • 點(diǎn)突變
  • 條件性點(diǎn)突變
  • 人源化


通過CRISPR基因編輯技術(shù),構(gòu)建一個(gè)基因敲入小鼠模型一般需要6-9個(gè)月。

通過ES細(xì)胞打靶技術(shù),構(gòu)建一個(gè)基因敲入小鼠模型一般需要9-12個(gè)月。

您可以聯(lián)系我們的技術(shù)顧問,為您設(shè)計(jì)并定制您的基因敲入小鼠模型。


常規(guī)基因敲入

外源基因共表達(dá)策略:

image.png


外源基因替代小鼠內(nèi)源基因表達(dá)策略(即敲入同時(shí)敲除):

 image.png


點(diǎn)突變
將點(diǎn)突變(人類致病候選點(diǎn)突變)引入到小鼠同源基因?qū)?yīng)位置。
image.png


條件性點(diǎn)突變
將點(diǎn)突變(人類致病候選點(diǎn)突變)與Cre-LoxP系統(tǒng)結(jié)合,引入到小鼠同源基因?qū)?yīng)位置,可實(shí)現(xiàn)組織特異性點(diǎn)突變。

 image.png


通過插入Loxp位點(diǎn)和含有突變位點(diǎn)的Exon實(shí)驗(yàn)基因的條件性點(diǎn)突變。

條件性基因點(diǎn)突變ES打靶策略示意圖.png


人源化
將小鼠內(nèi)源基因替換為人源同源基因,構(gòu)建用于疾病、免疫、生理學(xué)研究以及抗體藥物篩選及藥效評(píng)價(jià)的人源化基因工程小鼠模型。

完整替換策略:

image.png

 

直接插入人源cDNA策略:

image.png

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