條件性基因敲除
利用條件性基因敲除(Conditional knockout,簡(jiǎn)稱CKO),可以通過時(shí)間或組織特異性敲除您感興趣的靶基因,實(shí)現(xiàn)更精準(zhǔn)的基因敲除,進(jìn)行更有針對(duì)性的研究。
條件性基因敲除主要是通過染色體位點(diǎn)特異性重組酶系統(tǒng)Cre-LoxP、 FLP-Frt和Dre-Rox來實(shí)現(xiàn)的。其中最為常用的是Cre-LoxP系統(tǒng),在待敲除的一段目的DNA序列的兩端各放置一個(gè)LoxP序列,得到Flox (Flanked by loxP) 小鼠。將Flox小鼠與特異性表達(dá)Cre的工具鼠交配,即可獲得具有組織或細(xì)胞特異性敲除目的基因的小鼠。
這樣的Flox小鼠避免了全身敲除小鼠可能出現(xiàn)的胚胎或新生致死,并且與不同的Cre工具鼠組合,可以使目的基因的表達(dá)或缺失發(fā)生在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)育的任一階段或組織器官。此外,若與控制Cre表達(dá)的其他誘導(dǎo)系統(tǒng)相結(jié)合,還可以對(duì)某一基因同時(shí)實(shí)現(xiàn)時(shí)空兩方面的調(diào)控,應(yīng)用最為廣泛的是Cre/ERT系統(tǒng)。
通過CRISPR基因編輯技術(shù),構(gòu)建一個(gè)條件性基因敲除小鼠模型一般需要6-9個(gè)月。
通過ES細(xì)胞打靶技術(shù),構(gòu)建一個(gè)條件性基因敲除小鼠模型一般需要9-12個(gè)月
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上海南方模式生物科技股份有限公司(簡(jiǎn)稱“南模生物”)成立于2000年9月,始終以編輯基因、解碼生命為己任,專注于模式生物領(lǐng)域,專業(yè)從事遺傳修飾動(dòng)物模型的研發(fā)、飼養(yǎng)繁育和分析檢測(cè),致力于為全球高校、科研院所、醫(yī)院、制藥企業(yè)提供全面、便捷、專業(yè)的模式生物技術(shù)服務(wù)和模型資源。
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