冷凍切片機(jī)的基本操作:
1.在使用前2小時(shí)開啟電源,并將溫度設(shè)定在-25℃;
2.將適當(dāng)大小和厚度的標(biāo)本放在蘑菇狀杯上,加上冷凍蠟,夾在切片機(jī)的固定槽內(nèi);
3.準(zhǔn)備好玻片,選擇切片厚度,搖動(dòng)手柄,即可做成切片;
4.將做成的切片小心的吸附在玻璃片上;
5.使用結(jié)束后關(guān)閉電源,清潔腔體和擦干水氣, 做好使用記錄。
6.為讓水蒸氣蒸發(fā),請(qǐng)不要馬上關(guān)閉切片機(jī)的上蓋移門,應(yīng)到第二天再關(guān)。如需詳細(xì)說明,請(qǐng)借閱說明書。
冷凍切片機(jī)的維修與保養(yǎng):
冷凍切片機(jī)是醫(yī)院病理科必備的設(shè)備,用于手術(shù)中提取組織的快速冷凍切片,為手術(shù)提供病理依據(jù)。冷凍切片機(jī)的制冷溫度在-30℃以下,加半導(dǎo)體制冷臺(tái),可使溫度達(dá)到-50℃。各種品牌設(shè)備的工作原理基本一致,下面以山頓620E型冷凍切片機(jī)為例,結(jié)合幾種故障介紹其維修保養(yǎng)方法。
故障一: 搖柄與進(jìn)刀位置不對(duì)應(yīng),原因:機(jī)械傳動(dòng)部分錯(cuò)位,維修方法:調(diào)整對(duì)應(yīng)位置后再安裝皮帶并擰緊定位卡,在運(yùn)動(dòng)摩擦部位加機(jī)油潤滑。
故障二: 冷臺(tái)溫度顯示錯(cuò)誤代碼F13、F7操作失靈,原因:冷臺(tái)溫度傳感器失效。此傳感器為負(fù)溫度系數(shù)熱敏電阻,25℃時(shí)電阻約為6kΩ,應(yīng)急使用時(shí)可在P5插口上串10K電位器將冷臺(tái)顯示溫度調(diào)成-40℃,或者直接拔去P5插頭。除冷臺(tái)溫度顯示“—”外,其他一切正常,不影響使用。
故障三: 制冷效果降低,原因有二:一是冷凝散熱器散熱不良,二是蒸發(fā)器結(jié)霜嚴(yán)重。處理方法:一是清潔散熱器,可用水沖洗;二是除霜,每停機(jī)除霜一次,特別是夏季濕度溫度較高極易結(jié)霜盡量減少開門次數(shù)。
故障四: 不制冷,該機(jī)使用的制冷劑為R502,極易揮發(fā),若制冷系統(tǒng)漏氣R502會(huì)在幾天內(nèi)全部揮發(fā),注意避免使用有腐蝕性的消毒劑清潔機(jī)器和消毒房間。制冷系統(tǒng)檢查補(bǔ)漏后加制冷劑R502約600g,壓縮機(jī)工作時(shí)顯示高壓8.5kg/cm2,低壓0.1kg/cm2。
冷凍切片實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?BR> 1 掌握冷凍切片的方法
2 掌握冷凍切片的用途
實(shí)驗(yàn)原理
冷凍切片是借助低溫使組織凍結(jié)達(dá)到一定的硬度并通過冰起支撐作用來進(jìn)行切片的一種方法。
速凍 可減小冰晶直徑,避免組織細(xì)胞損傷。
制冷 壓縮機(jī)佛里昂制冷、半導(dǎo)體溫差電制冷
實(shí)驗(yàn)材料
新鮮動(dòng)物肝臟
實(shí)驗(yàn)方法
1 準(zhǔn)備 將儀器打開,樣品臺(tái)溫度調(diào)至-40 ℃。
2 取材 組織必須新鮮,盡可能不經(jīng)水洗。取材時(shí)應(yīng)避免組織擠壓,防止人為假象 。樣品大小5X5X3mm。
3 速凍 將樣品放在樣品臺(tái)上,樣品四周加水加固,冷凍5-10min.
4 切片 升高溫度至-15℃(視樣品而定),約5min后開始切片,厚度6-15um。
5 制片 將切片直接放在載波片上或先放在盛水(固定液)的培養(yǎng)皿中再轉(zhuǎn)移到載波片上。
6 染色觀察 吸干水,加一滴蘇木精,加蓋玻片,用顯微鏡觀察。
7 記錄 將觀察的結(jié)果繪于實(shí)驗(yàn)報(bào)告上,整理自己用過的物品。
附:切片溫度的設(shè)定
腦 -12℃
肝臟 -14℃
腎臟 -16℃
肌肉 -20℃
皮膚 -25℃
多脂肪組織 -30℃
經(jīng)過固定的組織 -5℃ ~-10℃
附:快速永久制片
1 固定 70%乙醇5~10min;
2 水洗 2min;
3 蘇木精染色 5~10min;
4 脫色 0.1%HCl 至變紅;
5 藍(lán)化0.1NaOH 變藍(lán);
6 水洗 5~10s ;
7 脫水 70% 2min ;
8 伊紅染色 5~10min ;
9 脫水 100%乙醇2minX2;
10 透明 二甲苯 3min;
11 封片 中性樹膠封片。