溶解多肽的方法及多肽應(yīng)用的注意點(diǎn)

多肽的溶解度取決元計(jì)算的物理特性。氨基酸可分類為酸性，堿性，極性，非極性，疏水性。多肽有高含量的非極性疏水性氨基酸或極性不帶電荷的氨基酸。建議溶解在有機(jī)溶液中（例如：DMF，甲醇，丙醇，異丙醇，DMSO）�？傊�，酸性多肽一般溶解于堿性溶液中，而堿性多肽溶解在酸性溶液中。

氨基酸的屬性

堿性：Arg,His(H),Lys(K)

非極性疏水性：Ala(A),Ile（I），Len(L),Met(M),Phe(F),Pro(P),Trp(W),Val(V)

極性不帶電荷：Asn(N),Cys(C),Glg(G),Gln(Q),Ser(S),Thr(T),Tyr(Y)

酸性：Asp(D),Glu(E)

Bachem公司發(fā)布每批號(hào)的產(chǎn)品分析報(bào)告(ADS），提供在特殊溶液中的溶解度�？蛻艨梢宰们榘串a(chǎn)品分析報(bào)告中溶液來溶解多肽�；蛘呖蛻艨梢园聪铝蟹椒ㄔ囼�(yàn)小量樣品中多肽的溶解度。由于多肽的溶解特性取決于其氨基酸成分。在選擇適當(dāng)?shù)娜軇┲�前我們建議先查一下多肽的氨基酸序列，

1、  堿性多肽（堿性氨基酸數(shù)量＞酸性氨基酸數(shù)量）應(yīng)該先用小量酸性氨基酸溶液（例如：醋酸或三氟醋酸）溶解，然后稀釋劑所需的濃度。制備高濃度的儲(chǔ)存液時(shí)，應(yīng)用80%醋酸溶解多肽。也可用20%醋酸溶解減少醋酸對(duì)于檢測(cè)系統(tǒng)的不良影響。

2、  酸性多肽（酸性氨基酸數(shù)量＞堿性氨基酸數(shù)量）應(yīng)該先用小量堿性氨基酸溶液（例如0.1%氨水，NH₄OH）,然后用水稀釋到所需的濃度。應(yīng)該注意，對(duì)于含有半胱氨酸(Cysteine)的多肽要避免使用氨水，因?yàn)樵赑H堿性條件下會(huì)促使二硫鍵的形成。

3、  中性或者高度疏水性多肽，含有許多極性不帶電荷的氨基酸或非極性疏水性氨基酸，應(yīng)該用小量的有機(jī)溶劑（例如：DMF，甲醇，丙醇，異丙醇，DMSO）溶解，因?yàn)镈MSO可形成氨基酸甲風(fēng)化。

4、  離液劑（例如尿素，鹽酸胍）有時(shí)用來溶解凝聚的多肽，但如有可能應(yīng)當(dāng)盡量不用，因?yàn)殡x液劑會(huì)干擾多肽的生物學(xué)應(yīng)用。在個(gè)別情況下，多肽的溶解時(shí)間較長(zhǎng)，甚至達(dá)幾個(gè)小時(shí)，在水浴中超聲波打幾分鐘可促使大顆粒多肽的溶解。但是不要加度加熱。含有Trp,Met,Cys的多肽要額外小心避免氧化，應(yīng)該用無氧的水或還原劑（例如DTT）來溶解。儲(chǔ)藏時(shí)，多肽溶液應(yīng)該分裝后置于-15℃，可以保持穩(wěn)定幾個(gè)月，含有Trp,Met,Cys的多肽半衰期較短，不宜長(zhǎng)期保存。

 

多肽在溶解和儲(chǔ)存時(shí)，應(yīng)遵循下列要點(diǎn)：