作者: 潘剛(密理博中國生命科學部)
前言:本文摘選自《××農(nóng)業(yè)大學高通量疫苗、獸藥研發(fā)及農(nóng)藥殘留檢測公共平臺的認證報告》,分為上下兩篇。該系列分為,,共三期,希望對廣大動物科學研究者有所幫助。
【平臺簡介】
高通量的疫苗、獸藥研發(fā)及獸藥殘留檢測公共平臺主要采用懸浮芯片技術及獨特的微毛細管技術的流式細胞術為主要研發(fā)平臺。對病原體的檢測主要采用PCR技術擴增后,應用懸浮芯片的xTAG編碼小球進行高通量的篩查,并可利用xMAP編碼小球來進行膜組分的蛋白質組學分析。采用8通道的微毛細管流式細胞術進行細胞計數(shù)及抗原表位的鑒定。特別重要的是在后期篩選檢測疫苗時,配合高通量的全自動化樣品處理系統(tǒng)、高通量的懸浮芯片檢測系統(tǒng)及6色熒光8參數(shù)檢測的easyCyte 8HT(蛋白質分析的4G平臺),將大大加快疫苗的研發(fā)及篩選工作,并同時得到大量的高質量的體內和體外的實驗數(shù)據(jù),這可以大大提高疫苗研發(fā)的質量。
【平臺組成】
Luminex FLEXMAP 3D懸浮芯片檢測及研發(fā)平臺
【FLEXMAP 3D簡介】
FLEXMAP 3D系統(tǒng)由Millipore攜手Luminex公司,聯(lián)手打造的新一代高通量懸浮芯片分析和檢測系統(tǒng)。該系統(tǒng)較上一代Luminex200在速度、多路檢測和工作流程上都有了質的飛躍。借助于xMAP技術,能極大提高臨床研究、制藥、疫苗研發(fā)及學術核心實驗室的研究水平和工作效率。
【三大突出特點】
1.創(chuàng)新的三色染色技術,最多能同時分析和檢測微量樣品中的500個指標。FLEXMAP 3D系統(tǒng)與Luminex200系統(tǒng)最大的創(chuàng)新點在于微球的染色技術,采用獨特的三色染色技術,能同時完成對一個微量樣品進行多達500種不同待測物的分析和檢測;
2.雙通道進樣系統(tǒng),極大提升數(shù)據(jù)獲取速度和質量。2μl/s的高速雙通道進樣系統(tǒng),可在一小時內最多獲得48,000個高質量的分析數(shù)據(jù);
3.96孔板與384孔板兼容。提供兩種孔板選擇,滿足不同實驗通量的需求。
【整合優(yōu)勢】
FLEXMAP3D系統(tǒng)將SD鞘液分配系統(tǒng)、主機及操作平臺三者合而為一,具有高度整合的特性,系統(tǒng)優(yōu)勢主要有:
【Milliplex Biomarkers配套研究工具】
多達150多種Biomarkers可供選擇,涉及Biomarker研究的12個應用領域;
微毛細管流式細胞檢測及研發(fā)平臺
【簡介】
新一代的與傳統(tǒng)采用鞘流系統(tǒng)的流式細胞儀不同,是采用獨特微毛細管細胞專利分析技術 (Micro-Capillary)的新一代流式細胞分析系統(tǒng),它能對細胞等生物粒子的理化及生物學特性(細胞大小、DNA/RNA含量、細胞表面抗原表達等)進行定量、快速、客觀多參數(shù)相關檢測分析的新技術。它借鑒了熒光顯微鏡技術與血球計數(shù)原理,同時利用熒光染料、激光技術、單抗技術以及計算機技術的發(fā)展,大大提高了檢測速度與統(tǒng)計精確性,而且從同一個細胞中可以同時測得多種參數(shù),為生物醫(yī)學與臨床檢驗學發(fā)展提供了一個全新的視角和強有力的手段。
【特色與優(yōu)勢】
1.樣品需求量少,1000-10000個細胞/分析
2.無鞘液,最大程度減少廢液產(chǎn)生,每8小時產(chǎn)生的廢液量少于50ml
3. 儀器體積小,可直接放入超凈臺中進行無菌操作
4.高壓注射泵與PEEK管路系統(tǒng)雙重保證,免除流路阻塞(Clog)的煩惱
5.固化細胞流路,建立自穩(wěn)流系統(tǒng)
6.上樣體積精確可測,可實現(xiàn)直接的細胞絕對計數(shù)
【微毛細管細胞分析的基本原理】
待測標本制備成單細胞懸液通過熒光染色后進入微毛細管的流動室,由于微毛細管的虹吸作用樣品流中細胞排成單列逐個經(jīng)過激光聚焦區(qū)。如果我們將細胞中感興趣的部分特異性的標上熒光染料,那么這些染料將在細胞通過激光檢測區(qū)時受激光發(fā)出特定波長的熒光,通過一定波長選擇通透性的濾色片,我們可將不同波長的散射光、熒光信號區(qū)分開來,并送到不同的光電倍增管中,經(jīng)過一系列的信號轉換、放大,數(shù)字化處理,我們就可以在計算機直觀的統(tǒng)計染上各種熒光染料的細胞各自的百分率。選擇不同的單克隆抗體及熒光染料,我們可以利用FSC、SSC同時測定一個細胞上的多種不同特征。
Guava專利的微毛細管系統(tǒng)
傳統(tǒng)的鞘液流系統(tǒng)
【應用范圍】
Micro-Capillary與單克隆抗體技術結合,可對細胞表面和細胞內抗原、癌基因蛋白及膜受體進行定量檢測,流式免疫熒光技術不僅能將表達位點的細胞群區(qū)分開來,而且還能進一步區(qū)分各細胞亞群,及對抗原表位進行定量和定性檢測。可廣泛應用于疫苗研發(fā),新型獸藥研制及農(nóng)藥殘留檢測等。
Guava easyCyte 8HT系統(tǒng)配備488nm與635nm的高功率全固態(tài)半導體激光器,全固態(tài)半導體激光器使用壽命在25000小時以上。
easyCyte 8HT配置為:488nm與635nm固態(tài)激光器;FSC與SSC檢測器;所有6色熒光檢測皆適用PMT檢測器;96孔板與10個Tube單管上樣;InCyte數(shù)據(jù)獲取及分析軟件,兼容IC50/EC50分析功能。
適用于目前全部的細胞生物學分析實驗。具有很好的開放型與適用性。軟件操作簡單,無需專人管理,體積小巧不需要專門房間放置。
更多詳細參數(shù),請進入
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https://millipore.wufoo.com/forms/cell-culture-protein-purification/