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還原糖測定儀使用手冊

瀏覽次數(shù)：7872　發(fā)布日期：2010-10-20　來源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

SGD-Ⅳ型

全自動還原糖測定儀

使用說明書

山東省科學(xué)院生物中心（生物研究所）

山東省生物傳感器重點實驗室

一、基本原理

全自動還原糖測定儀（SGD-Ⅳ型）是根據(jù)費林試劑測定原理設(shè)計而成的，其原理與目前國家標(biāo)準(zhǔn)一致；費林試劑是一種氧化劑，由甲、乙液組成。測定時一定量的甲乙液混合，首先形成氫氧化銅，然后形成酒石酸鉀銅絡(luò)合物。次甲基藍(lán)作為滴定終點指示劑，在氧化溶液中呈藍(lán)色，被還原后呈無色。用標(biāo)準(zhǔn)還原糖滴定時，還原糖首先使銅還原，至銅被還原完畢，才使次甲基藍(lán)還原成無色，即為滴定終點。

在滴定過程中，溶液顏色逐漸變化：藍(lán)色→深藍(lán)色→淺藍(lán)色→紫紅色→淡紫紅色→在終點時突然變化至無色透明。

采用光電轉(zhuǎn)換裝置，檢測滴定過程中透光率的變化（見圖一）；根據(jù)電壓變化曲線由儀器控制系統(tǒng)自動記錄、采樣、確定滴定終點；根據(jù)達到滴定終點時消耗的標(biāo)準(zhǔn)還原糖量，由控制系統(tǒng)自動計算出樣品中還原糖含量，并顯示和打印結(jié)果。滴定過程電信號變化及控制原理（見圖二）如下：

圖一滴定電壓的變化曲線

圖二全自動還原糖測定儀控制原理圖

二、儀器結(jié)構(gòu)

儀器由反應(yīng)系統(tǒng)、自動控制系統(tǒng)和機殼三部分組成。

1、反應(yīng)系統(tǒng)

核心部件為反應(yīng)池，其剖面結(jié)構(gòu)如圖三所示。

圖三全自動還原糖測定儀反應(yīng)池結(jié)構(gòu)圖

反應(yīng)系統(tǒng)由滴定池主體構(gòu)成；滴定池左右兩側(cè)有入射光源和光電轉(zhuǎn)換器，滴定池前后兩側(cè)有液體進出管道，滴定池內(nèi)側(cè)有溫度傳感器和液體加熱電極，根據(jù)需要調(diào)整液體溫度；滴定池底部有電磁攪拌器，使滴定液體均勻混合；上部是進樣口，可用移液器將被測樣品注入滴定池。

2、自動控制系統(tǒng)

包括電源電路、控制電路、控制面板、微型打印機；按設(shè)定程序控制滴定池液體的進出、液體溫度、攪拌、光電反應(yīng)信息的收集和轉(zhuǎn)換、計算、測定結(jié)果顯示及打印。注射泵自動加入標(biāo)準(zhǔn)液、滴定液、兩個蠕動泵可自動完成清洗和排空。全自動還原糖測定儀泵系統(tǒng)如圖四所示。

圖四全自動還原糖測定儀泵系統(tǒng)結(jié)構(gòu)圖

泵管連接：

（1）清洗泵右端口連接硅膠管接蒸餾水瓶（需將該連接硅膠管置于蒸餾水中），左端口連接硅膠管接反應(yīng)池最上面不銹鋼管道（出廠時已連接上）。

（2）排空泵左端口連接硅膠管接廢液瓶（需將該連接硅膠管置于自備廢液瓶水中），右端口連接硅膠管接反應(yīng)池最下面不銹鋼管道（出廠時已連接上）。

（3）試劑泵甲、乙液注射器端口各自接相應(yīng)電磁閥的2號口連接硅膠管（出廠時已連接上），電磁閥1號口連接硅膠管接相應(yīng)甲、乙液試劑瓶（需分別將該連接硅膠管置于按說明書配置的甲、乙液中），電磁閥3號口連接硅膠管接反應(yīng)池的甲、乙液不銹鋼管道（出廠時已連接上）。

（4）滴定泵端口接電磁閥2號口連接硅膠管，電磁閥1號口連接硅膠管接滴定糖瓶（需將該連接硅膠管置于按說明書配置的0.7%滴定糖液中），電磁閥3號口連接硅膠管接反應(yīng)池滴定糖不銹鋼管道（出廠時已連接上）。

三、試劑配制

1、試劑名稱：

（1）硫酸銅（CuSO₄•5H₂O）

（2）氫氧化鈉（NaOH）

（3）酒石酸鉀鈉（C₄H₄O₆KNa•4H₂O）

（4）亞鐵氰化鉀（K₄F₄(CN)₆•3H₂O）

（5）無水葡萄糖（C₆H₁₂O₆）

（6）次甲基藍(lán)（C₁₆H₁₈CIN₃S•3H2O）

（7）蒸餾水

（8）鹽酸

2、試劑準(zhǔn)備

無水葡萄糖（C₆H₁₂O₆）烘干：103℃烘3小時，常溫后放干燥器儲存?zhèn)溆谩?/DIV>

3、試劑配制:

（1）次甲基藍(lán)容液（1.0%）：

精確稱量次甲基藍(lán)10.0g，蒸餾水完全溶解后定容至1000mL，放置于棕色瓶中備用。

（2）1.00%葡萄糖溶液（定標(biāo)糖）即10.00克/升葡萄糖溶液：

精確稱量烘干無水葡萄糖10.000g，蒸餾水溶解后加入5mL鹽酸，定容至1000mL，放冰箱中備用。

（3）滴定糖溶液（0.7%）：

精確稱量烘干無水葡萄糖7.0g，蒸餾水溶解后加入5.0mL鹽酸，定容至1000mL，放冰箱中備用。

（4）甲液：

精確稱量11.74g硫酸銅（CuSO₄•5H₂O），溶解后加入7.0mL次甲基藍(lán)容液（1.0%），定容至1000mL。

（5）乙液：

精確稱量4.70g亞鐵氰化鉀（K₄F₄(CN)₆•3H₂O），63.20g氫氧化鈉（NaOH），58.50g酒石酸鉀鈉（C₄H₄O₆KNa•4H₂O）依次溶解后定容至1000mL。

（6）特殊樣品測定時，根據(jù)待測液濃度范圍，可選定經(jīng)我方技術(shù)人員確定的費林甲乙液濃度。

四、面板

控制面板如圖四所示：

圖五全自動還原糖測定儀控制面板示意圖

模式鍵:

待機狀態(tài)下，按【定標(biāo)】鍵定標(biāo)T2。

功能鍵：

開機（接通電源）后，每按一次【功能】鍵屏幕顯示依次顯示如下設(shè)置參數(shù)選項:

“排空”：排空泵（1）（默認(rèn)值為11秒），設(shè)定排空泵轉(zhuǎn)動時間。

“清洗”：清洗泵（2）（默認(rèn)值為6秒），設(shè)定清洗泵轉(zhuǎn)動時間。

“試劑”：試劑泵（3）（默認(rèn)值為11秒），設(shè)定試劑泵轉(zhuǎn)動時間，即控制費林試劑進樣量。

“復(fù)位1”：試劑泵復(fù)位時間（默認(rèn)值為19秒）。

“復(fù)位2”：滴定泵復(fù)位時間（默認(rèn)值為19秒）。

“差值”：采樣電壓，根據(jù)不同的樣品選擇（默認(rèn)值為3）。

“次數(shù)”：連續(xù)測定次數(shù)（默認(rèn)值為10次）。

以上參數(shù)可滿足特殊用戶的需求設(shè)定，如設(shè)定某項，在其顯示狀態(tài)下輸入數(shù)值（**.0）并按下輸入鍵，即完成設(shè)定，但每次開機均需重復(fù)同樣的設(shè)置。一般用戶無需設(shè)定。

打印鍵：按鍵一次取消打印功能，再按一次恢復(fù)打印功能。

清洗鍵：正在進行滴定（反應(yīng)）時，按下此鍵，即可終止當(dāng)前反應(yīng)，進入排空清洗，完成后自動進入下一次測定。

復(fù)位1：按下此鍵，試劑泵自動排出進樣管道中的氣泡。如果一次沒有完成排空氣泡的話，請再按一次該鍵，直到管路中無氣泡為止。（注意：第一次使用時，由于管路中氣泡較多，需要連續(xù)幾次操作。）

復(fù)位2：按下此鍵，滴定泵自動排出滴定糖管道中的氣泡。一次沒有完成排空氣泡的話，請再按一次該鍵，直到管路中無氣泡為止。

（注意：第一次使用時，由于管路中氣泡多，需要連續(xù)幾次操作。）

測定鍵：滴定反應(yīng)進行中，液晶顯示屏上數(shù)字變化時，按下此鍵，該次測定完成后自動進入待機狀態(tài)，再次按下此鍵，又開始下一次測定。待機狀態(tài)時，按下該鍵自動進行設(shè)定次數(shù)的測定，默認(rèn)10次（“次數(shù)”設(shè)定項）。

開始鍵：儀器接通電源后，按下【開始】鍵，進入完整測定程序（空白、標(biāo)定，測定）。

數(shù)字符號鍵：用于進行參數(shù)設(shè)置時的數(shù)字輸入。

小數(shù)點鍵：用于進行參數(shù)設(shè)置時的小數(shù)點輸入。

五、操作步驟

1、接通電源，打開儀器后部右下側(cè)的電源開關(guān)，進入待機狀態(tài)。

2、按【開始】鍵，儀器運行。自動進入穩(wěn)定程序及定標(biāo)值T1（空白）、T2（標(biāo)準(zhǔn)）的確定，并按照內(nèi)存設(shè)定次數(shù)（默認(rèn)值為10次）完成一組測定。

3、若特殊設(shè)置需要調(diào)整參數(shù)設(shè)定，需在打開電源開關(guān)后按【開始】鍵前，重復(fù)按壓【功能】鍵進行各參數(shù)值設(shè)定（如不輸入?yún)?shù)值，各參數(shù)值則為儀器的初始默認(rèn)值），按【輸入】鍵完成參數(shù)設(shè)置。一般不需要重新設(shè)定參數(shù)，此步驟跳過。

4、儀器打印機打印出T1值之后，需手工進行T2值的標(biāo)定。待液晶屏顯示“定標(biāo)進樣”時，用移液器吸取500微升定標(biāo)用標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖（1.00％即10.000克/升）溶液注入反應(yīng)池進行定標(biāo)，反應(yīng)完成后儀器自動打印出定標(biāo)值T2。

5、T1、T2值定標(biāo)完成后，儀器自動進入測定程序。待液晶屏顯示“樣品進樣”時，用移液器吸取500微升待測樣品注入反應(yīng)池，儀器自動完成樣品的測定，計算并打印出測定結(jié)果。

6、一組樣品（按“次數(shù)”顯示設(shè)定的測定次數(shù)，不進行設(shè)定儀器按默認(rèn)值為10次）測定完成后，儀器進入待機狀態(tài)。如需繼續(xù)測定，直接按【測定】鍵，進入下一個設(shè)定次數(shù)的測定循環(huán)（如不設(shè)定，儀器按默認(rèn)值為10次）。

特別提示：測定過程中如果需要暫停，可在滴定過程中（液晶顯示屏?xí)r間數(shù)字跳動時）按下【測定】鍵，該次測定完成后，自動停機；再次測定只需按下【測定】鍵，可繼續(xù)本輪次測定，無需重新定標(biāo)。

7、待機狀態(tài)下關(guān)閉電源開關(guān)，即可關(guān)機。

8、特殊操作說明：

（1）滴定過程中（顯示屏?xí)r間數(shù)字跳動時），按下【清洗】鍵，即可結(jié)束該次測定，儀器不打印測定結(jié)果，自動重復(fù)本次操作。

（2）重新定標(biāo)T2值。在儀器一組測定循環(huán)完成后的待機狀態(tài)下，按下【定標(biāo)】鍵，根據(jù)液晶屏顯示“定標(biāo)進樣”提示時，注入500微升定標(biāo)用標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖（1.00％即10.00克/升）溶液，儀器自動完成定標(biāo)并重新打印T2值。再次按下【測定】鍵，則按照重新定標(biāo)的T2值完成下一組測定。

（3）重新定標(biāo)T1值。T1值不能單獨定標(biāo)，如需要重新定標(biāo)T1值，須在待機狀態(tài)下，按【開始】鍵完成T1、T2值定標(biāo)并進入常規(guī)測定程序。

六、注意事項

1、儀器使用穩(wěn)壓電源。

2、儀器使用兩周后反應(yīng)池要清洗,用清洗液浸泡二分鐘,再用注射器排出。

3、謹(jǐn)防反應(yīng)液濺出。

4、反應(yīng)池裝好后請勿隨便轉(zhuǎn)動反應(yīng)池左右兩側(cè)耳朵,謹(jǐn)防漏液。

5、正確使用移液器。

6、儀器長時間不用時，排除管道中的試劑，注入蒸餾水。

七、常見問題及處理措施

出現(xiàn)問題	檢查項目	處理措施
開機無反應(yīng)	檢查電源線、保險管	連接好電源線，保持保險管完好。
反應(yīng)池加熱不停	檢查溫度控制器、反應(yīng)池右耳、攪拌轉(zhuǎn)子	連接好溫度控制器插頭、反應(yīng)池右耳旋緊
反應(yīng)時間顯示為99秒	檢查甲乙液、注射器、連接管道、攪拌轉(zhuǎn)子、加熱溫度、發(fā)光二極管亮度是否正常，觀察滴定是否到終點	保持試劑瓶液面高度，注射器、管道內(nèi)無氣泡、破損、適當(dāng)調(diào)整試劑濃度
測定值漂移	檢查注射器、連接管道，攪拌轉(zhuǎn)子、光源、電磁閥、加熱溫度、反應(yīng)池進出口堵塞	保持注射器、連接管道無氣泡、破損，攪拌轉(zhuǎn)子、光源工作正常。更換電磁閥，疏通進出口
打印機不走紙	檢查打印機、打印紙	更換打印紙
如遇其他問題，請與本中心技術(shù)人員聯(lián)系

附：

裝機清單：

1 還原糖測定儀一臺

2 微量進樣器一個

3 使用說明書一本

來源：山東省科學(xué)院生物中心
聯(lián)系電話：0531-82605595
E-mail：mengqjun2008@126.com

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