熒光染料-CFSE活細(xì)胞標(biāo)記的特點(diǎn)

熒光染料CFSE(CFDA-SE)，是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料，可以標(biāo)記活體細(xì)胞。其基本原理如下：CFSE能夠輕易穿透細(xì)胞膜，在活細(xì)胞內(nèi)與胞內(nèi)蛋白共價(jià)結(jié)合，水解后釋放出綠色熒光。在細(xì)胞分裂增殖過(guò)程中，它的熒光強(qiáng)度會(huì)隨著細(xì)胞的分裂而逐級(jí)遞減，標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中，因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半，根據(jù)這一特性，它可被用于檢測(cè)細(xì)胞增殖，細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面。另外，CFSE標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長(zhǎng)達(dá)數(shù)周之久，它常被用來(lái)做活體細(xì)胞檢測(cè)實(shí)驗(yàn)和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長(zhǎng)期活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)。熒光探針CFSE進(jìn)入細(xì)胞后定位于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，在細(xì)胞核的熒光染色最強(qiáng)，并證實(shí)CFSE不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡(jiǎn)單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患�？梢愿�快速，更準(zhǔn)確和更安全的得到想要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
CFSE：羧基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺酯(5- or 6-(N-Succinimidyloxycarbonyl)-3',6'-O,O'-diacetylfluorescein)

優(yōu)點(diǎn)：
1.      活體標(biāo)記：可以追蹤細(xì)胞在體內(nèi)的分裂增殖過(guò)程。
2.      時(shí)間長(zhǎng)：標(biāo)記的熒光可以維持長(zhǎng)達(dá)數(shù)周之久。
3.      安全：不需使用放射性同位素。
4.      相關(guān)性高：與H3摻入法結(jié)果一致，可代替后者。
5.      特定跟蹤：可以與細(xì)胞亞群特定抗體結(jié)合使用。
6.      簡(jiǎn)單：操作簡(jiǎn)單，可靠。
7.      穩(wěn)定：進(jìn)入細(xì)胞后熒光不受內(nèi)環(huán)境影響。
8.      結(jié)果客觀：對(duì)細(xì)胞生理活動(dòng)沒(méi)有任何影響。
9.      經(jīng)濟(jì)實(shí)惠：費(fèi)用經(jīng)濟(jì)，效率高。

用途：
1.       細(xì)胞增殖檢測(cè)（尤其是淋巴細(xì)胞的增殖檢測(cè)）。
2.       體內(nèi)示蹤。
3.       細(xì)胞熒光標(biāo)記。
4.       細(xì)胞毒性檢測(cè)。

其他：
1.      檢測(cè)儀器：熒光電鏡，流式細(xì)胞儀，CO2培養(yǎng)箱，移液器等
2.      激發(fā)波長(zhǎng)：500nm
3.      發(fā)射波長(zhǎng)：520nm