ACQUITY UPLC I-Class系統(tǒng):優(yōu)化的系統(tǒng)擴(kuò)散性,優(yōu)化的UPLC性能
瀏覽次數(shù):1676 發(fā)布日期:2012-2-23
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目的
為證實(shí)ACQUITY UPLC® I-Class系統(tǒng)可使柱外譜帶擴(kuò)展達(dá)到最低,從而使進(jìn)行高分離度及高通量UPLC®分離時(shí)的分離效果更佳。以下將通過雜質(zhì)分析以及彈道梯度說明這些改善的重要性。
背景
已證實(shí)在多種應(yīng)用中,采用填裝亞2-_m顆粒的色譜柱能夠改善色譜分離的峰容量以及分離度,從而大幅度提高分離度以及通量。
然而,為使一項(xiàng)指定分離所可能達(dá)到的分離度達(dá)到最大,需要使系統(tǒng)擴(kuò)散性達(dá)到最小。屬于進(jìn)樣器后系統(tǒng)流路的任何液體管路或連接均可導(dǎo)致柱外譜帶展寬。包括進(jìn)樣閥、溶劑預(yù)熱裝置、連接管路、配件、及光學(xué)流通池。許多供應(yīng)商已嘗試改善UHPLC系統(tǒng)的擴(kuò)散性,但收效甚微。雖然可減小擴(kuò)散性,但仍無法達(dá)到最佳從而可獲得窄孔UPLC色譜柱(內(nèi)徑2.1 mm)的全部?jī)?yōu)點(diǎn)。這些色譜柱要求較低的流速,這使得分析每份樣品時(shí)的投資回報(bào)率更高,從而可在足夠的分離度下進(jìn)行高效分離.
解決方案
ACQUITY UPLC I-Class系統(tǒng)可減小柱外譜帶分布。新設(shè)計(jì)的UV檢測(cè)器流通池的光學(xué)路徑與先前的ACQUITY UPLC的光學(xué)路徑相同,可獲得同樣高的靈敏度;另外,已重新設(shè)計(jì)流體管路以及連接,以使譜帶擴(kuò)散進(jìn)一步減小。必須使用溶劑預(yù)熱器以使可導(dǎo)致柱上分散效應(yīng)的溫度梯度減至最低。因此,溶劑預(yù)熱器的體積應(yīng)足夠小,以確保使樣品簇(sample plug)以最小的擴(kuò)散度到達(dá)色譜柱頭部,而且即使在高溫及高流速下也可提供極佳的溶劑加熱性能。根據(jù)您實(shí)驗(yàn)室的需求,可在兩種樣品管理器(Sample Manager)中選擇一種來構(gòu)成ACQUITYUPLC I-Class系統(tǒng)。不管是使用固定定量環(huán)式(SM-FL)還是流通針式(SM-FTN)進(jìn)樣器,均已通過采用小體積的針頭端口、連接管路、及內(nèi)部閥門通道使由進(jìn)樣器所導(dǎo)致的擴(kuò)散性減至最低。通常,固定環(huán)式進(jìn)樣器的設(shè)計(jì)可使柱外譜帶擴(kuò)展程度更小,這是由于其減小了注射器流動(dòng)路徑的體積。通過對(duì)每一組件進(jìn)行優(yōu)化,已使柱外譜帶擴(kuò)展較之任一其他市售LC系統(tǒng)顯著降低。表1總結(jié)了在使用多種系統(tǒng)(包括UHPLC系統(tǒng))后所獲得的譜帶擴(kuò)展數(shù)值。
ACQUITY UPLC家族在保持超高效分離的整體性方面的性能優(yōu)于所有其他系統(tǒng),其中ACQUITY
UPLC H-Class系統(tǒng)的譜帶擴(kuò)展減少至9 _L,而ACQUITY UPLC I-Class系統(tǒng)則減少至低至5.5 _L。
降低的系統(tǒng)擴(kuò)散性可直接導(dǎo)致ACQUITY UPLCI-Class系統(tǒng)的分離度增加。分離可以達(dá)到彈道梯度,同時(shí)保持典型分析梯度中的分離度。圖2說明對(duì)丁卡因進(jìn)行雜質(zhì)分析的結(jié)果。
采用ACQUITY UPLC I-Class系統(tǒng)及購(gòu)自供應(yīng)商B的UHPLC系統(tǒng),在相同條件下進(jìn)行分離,結(jié)果
ACQUITY UPLC I-Class的分離度顯著更佳。供應(yīng)商B的系統(tǒng)按其建議安裝有光路長(zhǎng)度為60 mm的流動(dòng)池,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其產(chǎn)生了明顯的譜帶擴(kuò)展,以至于測(cè)不到肩峰。
小結(jié)
ACQUITY UPLC I-Class系統(tǒng)具有不可比擬的性能,可用于當(dāng)今最具挑戰(zhàn)性的分離任務(wù)。不管您的實(shí)驗(yàn)室需要增加分離時(shí)的分離度還是需要增加樣品通量,它靈活的系統(tǒng)構(gòu)造都可使得UPLC色譜柱上的柱外譜帶擴(kuò)展最低,從而獲得最佳的分離性能。