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準(zhǔn)確檢測(cè)血清血漿樣本中microRNA的利器與應(yīng)用

瀏覽次數(shù):3689 發(fā)布日期:2012-12-4  來(lái)源:康成生物
大量研究表明,血液循環(huán)中的microRNA表達(dá)變化指征著疾病的發(fā)生和發(fā)展階段。同時(shí),血液樣品在臨床易于獲取,且穩(wěn)定不易降解,因此對(duì)于microRNA標(biāo)記物篩選具有廣闊研究前景。

 
血清/血漿樣本用于microRNA研究的挑戰(zhàn)
• 血清血漿中不包含細(xì)胞,且microRNA含量低
• microRNA高度同源,例如hsa-let-7家族各成員
• 紅細(xì)胞破裂發(fā)生溶血后,會(huì)釋放抑制RT和PCR反應(yīng)的物質(zhì)
• 常規(guī)內(nèi)參(如U6等)在血清血漿中含量不穩(wěn)定,不適合作為內(nèi)參對(duì)照基因

 
準(zhǔn)確檢測(cè)血清/血漿樣本microRNA的利器
丹麥Exiqon 公司miRCURY LNA™ Universal RT microRNA PCR芯片,將芯片的高通量?jī)?yōu)勢(shì)與PCR的準(zhǔn)確靈敏特點(diǎn)完整結(jié)合,實(shí)現(xiàn)對(duì)血清血漿等各種臨床樣本中的microRNA準(zhǔn)確特異檢測(cè):
• 基于LNA™專利技術(shù);獨(dú)特的Universal RT反應(yīng)
• 康成microRNA研究技術(shù)服務(wù)超過(guò)8年,客戶SCI文章60余篇,平均影響因子5.5分
康成生物microRNA PCR芯片技術(shù)服務(wù),點(diǎn)擊查看詳情>>

Human Serum/plasma panel (168 microRNA)
專為精確檢測(cè)血清血漿中microRNA設(shè)計(jì),可直接用于microRNA
標(biāo)記物篩選
• 重復(fù)性好:血漿樣本,兩次獨(dú)立實(shí)驗(yàn),相關(guān)系數(shù)R2達(dá)到0.96(圖一)
• 特異性強(qiáng):區(qū)分單堿基差異microRNA;區(qū)分成熟microRNA和前體
• 靈敏度高:準(zhǔn)確檢測(cè)血清血漿中microRNA,檢測(cè)限低至5個(gè)拷貝

最低僅需20μL的血清/血漿樣本,即可實(shí)現(xiàn)168個(gè)microRNA準(zhǔn)確特異檢測(cè)
• 獨(dú)特的Universal RT反應(yīng):一次逆轉(zhuǎn)錄制備的cDNA可作為所有microRNA PCR反應(yīng)的模板
• RNA需求量少,特別適合血清/血漿檢測(cè),最低于僅需20μL血清/血漿樣本(圖二)
• 統(tǒng)一逆轉(zhuǎn)錄,簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)步驟,消除技術(shù)誤差,提高準(zhǔn)確性
• 所含168個(gè)microRNA,基于大量文獻(xiàn)數(shù)據(jù)和Exiqon長(zhǎng)期積累的豐厚研究成果

嚴(yán)格的質(zhì)控系統(tǒng),保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性
• 溶血判定:實(shí)驗(yàn)前用Nanodrop檢驗(yàn)樣本溶血情況,避免抑制PCR的物質(zhì)
• 評(píng)估RT反應(yīng)效率:RT反應(yīng)設(shè)置Spike-in
• 監(jiān)測(cè)PCR反應(yīng)過(guò)程:PCR芯片內(nèi)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照
• 擴(kuò)增結(jié)果判定:采用SYBR green的PCR方法,可根據(jù)溶解曲線判斷擴(kuò)增特異性
• 內(nèi)參設(shè)置:選擇血清血漿中穩(wěn)定高表達(dá)的microRNA(miR-423-5P等)為內(nèi)參,校正數(shù)據(jù)



嚴(yán)格的質(zhì)控系統(tǒng),保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性
• 溶血判定:實(shí)驗(yàn)前用Nanodrop檢驗(yàn)樣本溶血情況,避免抑制PCR的物質(zhì)
• 評(píng)估RT反應(yīng)效率:RT反應(yīng)設(shè)置Spike-in
• 監(jiān)測(cè)PCR反應(yīng)過(guò)程:PCR芯片內(nèi)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照
• 擴(kuò)增結(jié)果判定:采用SYBR green的PCR方法,可根據(jù)溶解曲線判斷擴(kuò)增特異性
• 內(nèi)參設(shè)置:選擇血清血漿中穩(wěn)定高表達(dá)的microRNA(miR-423-5P等)為內(nèi)參,校正數(shù)據(jù)

Exiqon已在數(shù)千例癌癥、免疫病等病人的血清/血漿中進(jìn)行了microRNA篩查和驗(yàn)證




 
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聯(lián)系電話:800-820-5058,400-886-5058,021-64452021
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標(biāo)簽: 血清 血漿 MicroRNA LNA
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