使用Minilys均質(zhì)器從植物葉子中提取DNA
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簡介 |
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Minilys與Precellys 24均是集研磨、裂解、均質(zhì)為一體的多功能均質(zhì)器。專門用來提取各種各樣生物樣本的DNA、RNA或蛋白質(zhì)。其工作原理是通過三維高速振動和輔助研磨珠（玻璃珠、陶瓷珠、鋼珠等）的敲打，達到對樣品進行研磨、裂解、均質(zhì)的目的。Minilys小巧、簡潔，屬于個人型均質(zhì)器，而Precellys 24能應(yīng)付較高的通量。兩種型號都能夠在0.5mL, 2mL或 7mL 管子中對樣本進行均質(zhì)、研磨和裂解。通過這種機械化裂解得到的樣品能夠進一步使用多種分析方法進行分析，比如DNA-RNA電泳、實時定量PCR、Western-blot分析、氣相色譜法-質(zhì)譜法聯(lián)用分析、液相色譜法－質(zhì)譜法聯(lián)用分析等等。本文此次介紹Minilys與Precellys 24研磨植物葉子提取DNA并進行定量分析，對比兩種型號的均質(zhì)效果。 | ||||||||||||||||
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材料 |
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Minilys均質(zhì)器 |
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瓷珠(Precellys kit: 0 | |||||||||||||||
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DNA提取液（peqGOLD Plant DNA mini Kit） | |||||||||||||||
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樣本: 100 mg植物葉子 | |||||||||||||||
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緩沖液: 100 μl TE buffer | |||||||||||||||
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Minilys |
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方法 |
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Minilys: 5000 rpm, 30 sec 數(shù)據(jù)分析: 使用DNA提取液直接從裂解樣本中提取總基因組DNA，然后使用分光光度計檢測DNA的含量。 | ||||||||||||||||
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結(jié)果 |
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使用Minilys提取植物葉子的總基因組DNA，使用分光光度計(BMG Labtech)測定DNA的濃度和吸光度比值，如Figure 1所示。使用Minilys得到的總基因組DNA量與使用Precellys得到的量相當(dāng)。 | ||||||||||||||||
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Figure 1: mean concentration of total genomic DNA from 3 extracted samples of leaves with Minilys (run 1 and 2) in comparison with Precellys 24. The corresponding mean absorption ratios (260/280; 260/230) are also plotted. |
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Figure 2: illustration of absorption analysis using a BMG microplate reader. | ||||||||||||||
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無論是Minilys還是Precellys 24均質(zhì)器都能得到高質(zhì)量且相當(dāng)質(zhì)量的總基因組DNA. 在低通量的實驗需求中Minilys具備高效、省時、易用等多個方面的優(yōu)勢。相比傳統(tǒng)的研缽研磨破碎方法，Minilys能使均質(zhì)化過程中可能會遇到的交叉污染問題得到克服。 | ||||||||||||||||
