為你的植物選擇合適的培養(yǎng)基

植物組織培養(yǎng)基包括多種成分：無(wú)機(jī)鹽、維生素、氨基酸、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、糖類、瓊脂（或結(jié)冷膠）和水。所有這些成分在植物組織培養(yǎng)中至少有1種或多種作用。

 

植物組織培養(yǎng)基中的礦質(zhì)元素進(jìn)入植物細(xì)胞后用于合成有機(jī)分子或作為酶反應(yīng)中的催化劑�？扇苄喳}離子在植物電離分子運(yùn)輸中作為平衡離子，滲透壓的調(diào)節(jié)以及維持植物體電化學(xué)勢(shì)的平衡都起著重要的作用。

 

氮、硫和磷是蛋白質(zhì)和核酸的組成成分。鎂離子和許多的微量元素是許多酶和細(xì)胞器的基本組成部分，因此在多種反應(yīng)中起著重要的催化作用。鈣離子和硼酸主要存在植物的細(xì)胞壁中，尤其是鈣離子在維持生物膜穩(wěn)定性起著重要作用。相反，鉀離子和氯化物在滲透調(diào)節(jié)中起著重要作用，參與維持電化學(xué)勢(shì)的平衡，同時(shí)也是許多酶的活化劑。

 

下面對(duì)常用培養(yǎng)基做一個(gè)介紹：

MS培養(yǎng)基，最初是 Murashige 和 Skoog 于1962年為煙草細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)的，經(jīng)過(guò)改良后，現(xiàn)今可以用于多種植物的組織培養(yǎng)，如馬鈴薯、胡蘿卜、甘藍(lán)等，許多研究者根據(jù)不同的試驗(yàn)需要，先后研發(fā)了改良MS培養(yǎng)基包括含1/2大量元素、含3/4大量元素、用NaNO3替代NH4NO3、不含NH4NO3、含1/2NH4NO3和KNO3的培養(yǎng)基等，一般需要根據(jù)具體的試驗(yàn)材料和試驗(yàn)?zāi)康倪x用具體的培養(yǎng)基。

 

N6培養(yǎng)基，被定義用來(lái)改善水稻花粉愈傷組織的形成、生長(zhǎng)和分化。NH4+離子濃度的最適范圍是7.0 mM（或3.5mM(NH4)2SO4)）。高濃度的銨鹽會(huì)顯著抑制水稻花粉的生長(zhǎng)和分化。KNO3和培養(yǎng)基中其他成分的濃度不會(huì)影響花粉的生長(zhǎng)。

 

B5培養(yǎng)基是1968年由Gamborg等為培養(yǎng)大豆根細(xì)胞而設(shè)計(jì)的，雙子葉植物在B5培養(yǎng)基上生長(zhǎng)更適宜。B5(Gamborg)培養(yǎng)基的主要特點(diǎn)是含有較低的銨，這是因?yàn)殇@可能對(duì)不少培養(yǎng)物的生長(zhǎng)有抑制作用。

 

NB培養(yǎng)基，為N6培養(yǎng)基大量元素和B5培養(yǎng)基的微量元素和維生素混合物。

 

木本植物培養(yǎng)基也叫WPM培養(yǎng)基，是1981年由Lloyd和 McCown為山月桂莖尖培養(yǎng)專業(yè)設(shè)計(jì)，根據(jù)MS培養(yǎng)基改良而來(lái)，相對(duì)MS培養(yǎng)基而言，使用了硫酸鉀替換了硝酸鉀，硝酸銨的含量也降低到了MS培養(yǎng)基的1/4，氮鹽也主要以硝酸鈣的形式供應(yīng)，現(xiàn)主要用于木本植物的組織培養(yǎng)。

                                                                                                                                                                

配置培養(yǎng)基的注意事項(xiàng)：

1、調(diào)pH 用滴管吸取物質(zhì)的量濃度為1 mol/L的NaOH溶液（一般剛配好的培養(yǎng)基都是偏酸），逐滴滴入溶化的培養(yǎng)基中，邊滴邊攪拌，并隨時(shí)用精密的pH試紙(5.4～7.0)測(cè)培養(yǎng)基的pH，一直到培養(yǎng)基的pH為5.8為止(培養(yǎng)基的pH必須嚴(yán)格控制在5.8)。在這里要注意的是，許多同學(xué)在做培養(yǎng)基時(shí)明明PH值調(diào)到了5.8但是還是不凝固，這個(gè)原因可能是:

a. 先檢查培養(yǎng)基組分中瓊脂的用量和質(zhì)量 

b. 如果瓊脂沒有問題，滅菌時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，一般在0.15MPa超過(guò)1小時(shí)后易凝固不良。 

c. 如果以上都正常，我們還要考慮稱量工具是否準(zhǔn)確，有些小市場(chǎng)買的稱量工具不是很準(zhǔn)確，建議稱量工具到正規(guī)廠家或?qū)�業(yè)商店購(gòu)買。

 

2、培養(yǎng)基的分裝溶化的培養(yǎng)基應(yīng)該趁熱分裝。注意不要讓培養(yǎng)基沾到瓶口和瓶壁上，因?yàn)檎吃谄靠谌菀孜廴尽?/DIV>