用顯微鏡如何用割斷法進行觀察

如果顯微鏡樣品以苯乙烯樹脂做為包埋劑，再行割斷法做掃描電鏡觀察是十分方便的。因為苯乙烯聚合后，氧化丙烯及醋酸異戊酸等很容易將其溶解，多次更換溶劑便可將苯乙烯清除干凈.因此，在制做透射電鏡標本時，多做出幾個包埋膠囊樣品，待聚合后，顯微鏡按上述方法割斷，麥克奧迪顯微鏡將割斷好的樣品放在氧化丙烯中，約2小時后便可經(jīng)醋酸異戊醋置換、臨界點干操。

顯微鏡價格除樹脂割斷法外，尚有有機溶劑(酒精、醋酸異戊醋等)割斷法，顯微鏡水溶性包埋劑(二甲基亞礬、甘油等)割斷法及其它(冷凍、奴里昂等)割斷法，操作都很容易。再以酒精割斷法為例:樣品固定后用酒精脫水。當脫水完成后，顯微鏡將樣品投入頂先裝有無水乙醉的膠囊中(避免出現(xiàn)氣泡)。顯微鏡將膠囊放在低溫裝里內(nèi)使乙醉固化.進行樣品割斷。割斷的樣品立即進入置于室溫的無水乙醉中，待乙醉融化后移入醋酸異戊酷、進行臨界點干操。

需指出的是經(jīng)割斷法制備的標本需要用高分辨率的顯微鏡(如場發(fā)射電子槍掃描電鏡)進行觀察.一般的掃描電鏡分辨率低于透射電鏡，若用顯微鏡鏡割斷法觀察組織、細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，以和透射電鏡圖相對比，必須用場發(fā)射電子槍掃描電鏡.由于顯微鏡立體感較強，割斷樣品在鏡下顯現(xiàn)出高爾基扁平囊與大泡、小泡的空間分布，線粒體蠟像隔板一樣伸展;核搪體像小蘑菇一樣附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)“板”上。盡管如此，有些學(xué)者認為偏光顯微鏡割斷法并未提供細胞結(jié)構(gòu)的新信息。因此該方法應(yīng)用不廣泛。

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