PCR新手指南系列：PCR產(chǎn)物電泳條帶分析

3、目的擴(kuò)增產(chǎn)物帶。其大小與設(shè)計(jì)大小相同，條帶清晰。

4、非特異擴(kuò)增產(chǎn)物帶。其大小與設(shè)計(jì)大小不相同，條帶清晰。一般考慮通過(guò)提高復(fù)性溫度來(lái)減少或消除（也可用溫度梯度功能來(lái)尋找最佳的復(fù)性溫度，東勝龍811型PCR儀就有此功能）。如果其片段大小比目的片段大較多，可以通過(guò)減少延伸時(shí)間來(lái)減少或消除（即不給它足夠的延伸時(shí)間）。還有一種非特異擴(kuò)增產(chǎn)物帶是來(lái)自于逆轉(zhuǎn)錄PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)的基因組DNA的污染，如果目的擴(kuò)增產(chǎn)物中有內(nèi)含子，擴(kuò)增產(chǎn)物很可能大于目的基因。這種條帶通過(guò)優(yōu)化復(fù)性溫度是不能消除的，可以在逆轉(zhuǎn)錄前用無(wú)RNA酶的DNA酶進(jìn)行樣本處理。

5、模板DNA帶。模板濃度過(guò)高時(shí)可能出現(xiàn)。如果是基因組DNA為模板，條帶可能會(huì)很亂且較大。一般進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，模板濃度都不要太大，否則會(huì)產(chǎn)生一些比目的基因長(zhǎng)一點(diǎn)的雜質(zhì)DNA（可能不成條帶，也看不到），這是由PCR擴(kuò)增原理造成的。

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