細胞在三維環(huán)境中與周圍的細胞外基質、其它細胞相互作用,接受各種信號,指導其增殖、分化或遷移等行為。在二維培養(yǎng)體系下,細胞的各種行為與體內生理條件下的行為存在明顯差異。諸多生理指標都顯著不同,如增殖時間的長短,藥物作用于細胞呈現的效應。近年越來越多的證據表明,三維細胞培養(yǎng)比二維培養(yǎng)更接近體內的生理環(huán)境,為我們更加準確的了解體內細胞行為和生理調節(jié)機制提供了條件。可以預見,未來在高通量,自動化,低成本,廣應用性和高預測性等方面3D培養(yǎng)將逐步突破并日趨成熟、完善,2D培養(yǎng)向3D的轉變成為必然的發(fā)展趨勢和時代潮流。
當前市場上有多種類型的3D培養(yǎng)系統(tǒng),根據產品是否為細胞提供支撐(支架)材料大體可分為兩種類型:基于scaffold的培養(yǎng)體系和無scaffold的培養(yǎng)體系。Scaffold則又有天然成分和人工合成成分之分。那么我們要如何選擇最適合自己的3D培養(yǎng)系統(tǒng)呢?這取決于我們的實驗需求,舉例來說,實驗的細胞類型、實驗設計、試驗規(guī)模、是否共培養(yǎng)、分析類型、是否收集細胞用于分析、所需通量及可能的臨床使用等等都是決定性的因素。
目前,有支架的系統(tǒng),如3D Biomatrix公司的Perfecta3D ®懸滴板,InfiniteBio公司SCIVAX 3D Nano Culture® Plate;無支架的3D培養(yǎng)系統(tǒng)有Microtissues公司和Nano3D Biosciences公司。Microtissues能為您提供由瓊脂糖制成的3D Petri Dish®系統(tǒng), Nano3D Biosciences公司的Bio-Assembler™1采用的方法是磁懸浮技術。
普瑞麥迪公司與時俱進,不僅可以提供NSB公司有支架的ANFS系列3D培養(yǎng)皿,同時也可以提供AIM公司無支架的3D細胞培養(yǎng)芯片,
AIM基于微流體技術設計的3D細胞培養(yǎng)芯片,微流體設備有一套培養(yǎng)組,每個培養(yǎng)組都有三個培養(yǎng)室,中間的用于任何類型的細胞以及水凝膠,另外兩個用于培養(yǎng)額外的細胞?梢宰屟芯咳藛T在一種模擬自然組織的三維水凝膠環(huán)境中同時培養(yǎng)多種細胞。水凝膠培養(yǎng)室每邊都有開口,因此細胞間能夠相互作用,就像在活體里一樣。癌癥藥物以及其他試劑可以被加入到這些培養(yǎng)室里,用以觀察細胞在人體內的反應。
麻省理工學院機械工程與生物過程學教授Roger Kamm解釋道,這種設備的最大好處是可以讓研究人員更好地研究生物過程,比如癌癥轉移,并且讓他們能夠更精確地捕捉癌癥細胞對化療藥物的反應。
Kamm說,其他公司設計的用于三維細胞培養(yǎng)的系統(tǒng)包括用水凝膠填注的深培養(yǎng)皿,由于這些深培養(yǎng)皿和顯微鏡之間必須保持一定距離,因此很難拍到高分辨率的圖像。但是AIM Biotech公司的這套儀器卻能像傳統(tǒng)培養(yǎng)皿一樣被直接放到顯微鏡下面進行觀察,這對成像來說非常有利。
這個圖片展示了內皮細胞在2維媒質槽中排列的樣子,它們沿著垂直的膠原質的表面形成一堵“墻”。內皮細胞核是紫色的,細胞間粘著劑血管內皮細胞鈣黏蛋白是綠色的。圖片來源:麻省理工的研究人員。研究人員如是說:“用這個儀器可以在蓋片上的200微米內拍攝,因此可以得到高分辨率的實時圖片和影片!
ANFS系列3D培養(yǎng)皿為NSB獨家開發(fā)的拓撲構造“800nm 1:1”的設計,非均一納米級凹槽構造, 得該培養(yǎng)皿為細胞的生長提供了一個類似體內的生理環(huán)境,尤其適用于心肌細胞的培養(yǎng)。
應用總結
血管再生
癌細胞轉移
細胞入侵,遷移
疾病模型的構建
藥物篩選
科學研究
3D細胞培養(yǎng)的未來
目前已有相當多的實驗證據證實,盡管3D細胞培養(yǎng)與體內環(huán)境并不是完全相同的,但它顯然比傳統(tǒng)2D細胞培養(yǎng)更接近體內的條件。在3D培養(yǎng)體系中進一步分析以往2D細胞實驗所得的結果,將成為未來的研究熱點!拔覀冞^去的2D細胞實驗得到了許多寶貴的成果,而現在到了進一步深化這些研究的時候了,”Schrader說!皩2D體外實驗推進到3D細胞體系的層面,將大大加快將新藥推向市場的速度,降低藥物研發(fā)的成本!