大腸桿菌裂解液澄清，收獲胞內(nèi)表達(dá)蛋白

簡(jiǎn)介

從大腸桿菌裂解液中分離細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的蛋白質(zhì)。目的蛋白具有抗腫瘤潛力。

工藝條件

裂解液體積為245升。使用一根0.2 μm 的Krosflo^® 組件進(jìn)行批量分離，膜表面積為1.0m² 。流路見圖1所示，料液的循環(huán)速率保持57L/min。先開始料液循環(huán)，然后緩慢打開濾液端口。不限制下游循環(huán)。起始處理溫度為4°C，并緩慢升至12°C直到運(yùn)行結(jié)束。起始進(jìn)樣壓力為12psig，因?yàn)樯郎�，料液粘度下降，壓力下降�?1 psig，而后又因?yàn)檫\(yùn)行結(jié)束前固體顆粒濃度增加而上升至13 psig。

圖 1. 大腸桿菌裂解液過(guò)濾流路系統(tǒng)設(shè)置

圖2. 大腸桿菌裂解液過(guò)濾通量和濾液總體積 vs. 時(shí)間

結(jié)果

作為典型的細(xì)菌裂解液，流量衰減曲線開始迅速降低，并快速達(dá)到穩(wěn)定。在65min內(nèi)共收集237L含目的蛋白的濾液。工藝平均通量為~200L/m²/hr，目標(biāo)蛋白的通過(guò)率為99%。

討論

選擇合適的過(guò)濾組件以及工藝條件對(duì)于有效地從細(xì)胞裂解液中分離感興趣的目的成分是必需的。瑞普利金Krosflo® 過(guò)濾組件是從細(xì)胞裂解液中分離可溶性蛋白的最佳選擇。如使用一次性預(yù)滅菌過(guò)濾器進(jìn)行處理，可避免過(guò)濾器清洗不足的問題。過(guò)濾器不再會(huì)造成批次之間的污染，并保證每次處理的高效率。

掃描二維碼，關(guān)注瑞普利金微信公眾號(hào)，獲取更多應(yīng)用信息！