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基于HTX TM-Sprayer基質(zhì)噴霧儀提升MALDI質(zhì)譜成像

瀏覽次數(shù):5940 發(fā)布日期:2018-3-5  來(lái)源:通用實(shí)驗(yàn)科技
在過去幾十年中,MALDI質(zhì)譜成像技術(shù)已被廣泛應(yīng)用在生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)和藥物研發(fā)等多個(gè)領(lǐng)域。但是MALDI質(zhì)譜成像的技術(shù)操作中,要獲得高質(zhì)量、重復(fù)性好的質(zhì)譜結(jié)果,并不容易。組織樣品基質(zhì)的選擇和覆蓋十分關(guān)鍵,要盡可能的滿足組織切片上的蛋白無(wú)擴(kuò)散或移位現(xiàn)象,基質(zhì)與蛋白形成良好的共結(jié)晶,并不是十分容易的事情。然而,美國(guó)HTX technologies公司研發(fā)的全自動(dòng)基質(zhì)噴涂設(shè)備讓這一切變得簡(jiǎn)單可行。

 
近期,南卡羅萊納醫(yī)科大學(xué)-細(xì)胞與分子藥理學(xué)&實(shí)驗(yàn)治療學(xué)部發(fā)布了一篇基于MALDI FTMS成像技術(shù)的癌變生物標(biāo)記物N-聚糖的研究。該研究中利用了超高分辨、超高靈敏度的solariX MALDI FTMS質(zhì)譜平臺(tái),通過對(duì)福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)組織中的N-聚糖進(jìn)行質(zhì)譜成像分析,確定了N-聚糖為組織癌變生物標(biāo)志物。
 
實(shí)驗(yàn)操作中,在對(duì)5µm厚的FFPE甲狀腺癌組織切片樣品進(jìn)行酶處理和基質(zhì)覆蓋時(shí)均使用了HTX公司的自動(dòng)噴霧儀產(chǎn)品(TM-Sprayer)來(lái)執(zhí)行,而非傳統(tǒng)的手動(dòng)處理。HTX的這款TM-Sprayer基質(zhì)噴霧儀最大特點(diǎn)就是能夠以精準(zhǔn)模式和可調(diào)節(jié)模式對(duì)整個(gè)樣品區(qū)或部分區(qū)域進(jìn)行噴涂,該研究中首先利用TM-Sprayer將濃度為0.1μg/μL的糖苷酶(PNGase F)噴涂在組織切片表面,37℃環(huán)境下孵育。隨后,選用基質(zhì)CHCA進(jìn)行精確覆蓋,確保了細(xì)膩、均一穩(wěn)定的基質(zhì)涂層。后續(xù)獲得的MALDI成像結(jié)果也顯示了較高的信號(hào)強(qiáng)度和分辨率。
 
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
 
Figure 1. Example N-glycan signal from a single section of thyroid cancer. A Total average spectrum from the image with example glycoform structures per m/z; B Tile view of example images. Inset top right, photomicrograph of unstained tissue prior to imaging. Abbreviations: GlcNAc, N-acetylglucosamine


Figure 2. Image segmentation showing complexity of N-glycan signatures in a thyroid cancer tissuesection. A Pathologist marked H&E stain of section highlighting adjacent nontumor, anaplastic, and necrotic regions. B SCiLS image segmentation of N-glycans from 2D mapping. White asterisks markcalculated overlaps of anaplastic and necrotic regions.


Figure 3. Quantification of N-glycan signatures from regional areas on tissue. Statistical testing was donecomparing nontumor adjacent and anaplastic regions (ROC-1) or anaplastic versus necrotic (ROC-2).A Photomicrograph depicting areas selected for measuring relative abundance of N-glycan expression.B A high mannose (Man9) structure distinguishing nontumor adjacent compared to anaplastic tumor ornecrotic regions. C A biantennary N-glycan defining necrotic regions with low expression in nontumoradjacent and anaplastic. D A tetrantennary fucosylated structure with low expression in adjacent nontumor and increasing expression in anaplastic and necrotic tissues regions.

 
TM-Sprayer最大的特點(diǎn)就是可以為MALDI質(zhì)譜成像提供高重現(xiàn)性和高質(zhì)量數(shù)據(jù),該產(chǎn)品已被應(yīng)用在多個(gè)領(lǐng)域的MALDI成像實(shí)驗(yàn)中,并有相當(dāng)數(shù)量的科研文獻(xiàn)提到應(yīng)用了該款產(chǎn)品獲得優(yōu)質(zhì)數(shù)據(jù)。在質(zhì)譜成像領(lǐng)域勢(shì)必將成為MALDI成像的好搭檔。
 
關(guān)于HTX公司
美國(guó)HTX科技公司一直致力于組織成像和分子成像技術(shù)的不斷發(fā)展,成像研究集中于樣品制備和 MALDI 質(zhì)譜成像領(lǐng)域。HTX成像研究方面借鑒了HTX科技公司長(zhǎng)期以來(lái)在科學(xué)儀器領(lǐng)域的經(jīng)驗(yàn),包括生物學(xué)、設(shè)備工程、研究應(yīng)用和商業(yè)開發(fā)方面的專業(yè)經(jīng)驗(yàn)。依托先進(jìn)的分析平臺(tái)為樣品制備和自動(dòng)化工作流程提供了一系列解決方案。
 
通用實(shí)驗(yàn)科技(中國(guó))有限公司(Labcare Scientific China Limited作為美國(guó)HTX公司在中國(guó)區(qū)的唯一授權(quán)經(jīng)銷商,全權(quán)負(fù)責(zé)HTX產(chǎn)品的售前、售后技術(shù)支持工作。如有需要請(qǐng)不吝聯(lián)絡(luò)我們?cè)O(shè)在中國(guó)的業(yè)務(wù)部門和售后服務(wù)中心,聯(lián)系電話:400 821 3360。
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