一種活細(xì)胞倒置熒光顯微鏡溫度校準(zhǔn)方法的介紹

活細(xì)胞培養(yǎng)熒光顯微鏡由于可以進(jìn)行活細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)條件，例如：溫度控制，濕度控制，CO2濃度控制，O2濃度控制，同時(shí)配置高速攝像頭可以進(jìn)行時(shí)間序列（Time-Lapse）,結(jié)合多色熒光濾片切換，LED單波長(zhǎng)光源激發(fā)，可配備相差(Phase Contrast)，微分干涉（DIC），熒光等對(duì)照方式可以更加直觀詳細(xì)的進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)記錄而受到廣大科研用戶的認(rèn)可。近年來，倒置熒光顯微鏡配置活細(xì)胞培養(yǎng)裝置的相關(guān)實(shí)驗(yàn)越來越普遍，目前市面上集成的熒光成像系統(tǒng)很多，例如：GE公司的DELTAVISION活細(xì)胞成像系統(tǒng)，ZEISS公司的CELL OBSERVER系統(tǒng)，或其它大品牌公司的整套活細(xì)胞成像系統(tǒng)，價(jià)格昂貴（20萬美元以上），維護(hù)成本高，廠家工程師上門速度通常比較慢或者收費(fèi)貴，常規(guī)實(shí)驗(yàn)室難以負(fù)擔(dān)。目前各實(shí)驗(yàn)室通常都配備有倒置熒光顯微鏡，活細(xì)胞培養(yǎng)裝置是模塊化設(shè)計(jì)的產(chǎn)品，廣州科適特科學(xué)儀器有限公司提供一種優(yōu)惠簡(jiǎn)便的解決方案，定制整套活細(xì)胞或?qū)ΜF(xiàn)有的熒光顯微鏡進(jìn)行活細(xì)胞升級(jí)，購(gòu)置成本低，拆裝方便，兼容目前市場(chǎng)主流的各大顯微鏡平臺(tái)，例如：徠卡，尼康，奧林巴斯，蔡司等都可以提供定制的適配器。

活細(xì)胞培養(yǎng)裝置中溫度控制是一個(gè)重要的實(shí)驗(yàn)參數(shù)，但是由于活細(xì)胞培養(yǎng)的探測(cè)器通常位于培養(yǎng)腔室的上壁邊緣，由于室溫（例如22℃）與培養(yǎng)箱中設(shè)定溫度（例如37℃）偏差比較大，溫度傳導(dǎo)散熱效應(yīng)，顯微鏡細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)皿中細(xì)胞真實(shí)的溫度難以達(dá)到設(shè)定溫度，為了保證真實(shí)培養(yǎng)溫度精確，顯微鏡活細(xì)胞培養(yǎng)在不同的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境首次使用前通常需要進(jìn)行校準(zhǔn)（Calibration）。

最近剛好廣州科適特科學(xué)儀器有限公司裝機(jī)的客戶有跟我們問到溫度校準(zhǔn)的問題，順便以我們公司代理的IBIDI活細(xì)胞培養(yǎng)裝置為例介紹一下活細(xì)胞培養(yǎng)裝置溫度校準(zhǔn)的問題。廣州科適特科學(xué)儀器有限公司是德國(guó)IBIDI活細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品的國(guó)內(nèi)授權(quán)代理，價(jià)格優(yōu)惠，發(fā)貨速度快。

一．顯微鏡活細(xì)胞裝置的組成通常包含活細(xì)胞培養(yǎng)腔體，控制模塊單元，加濕柱，連接導(dǎo)管，CO2氣瓶，壓縮空氣瓶等配件。

二、培養(yǎng)箱腔體由上蓋（LID）和加熱

底板（PLATE）組成，通過適配器固定在倒置顯微鏡的載物臺(tái)上，內(nèi)部有溫度探頭，氣體輸入輸出接口，控制面板可以設(shè)置氣體的流速，CO2及O2濃度等參數(shù)。

三．取出校準(zhǔn)專用小工具，校準(zhǔn)用溫度探頭，即一條可插入培養(yǎng)皿內(nèi)部的線纜。上蓋有開孔的校準(zhǔn)培養(yǎng)皿。將探頭插入校準(zhǔn)培養(yǎng)皿的小孔，用此探頭監(jiān)測(cè)實(shí)時(shí)培養(yǎng)皿內(nèi)部的溫度。目的是將內(nèi)部溫度設(shè)置為活細(xì)胞目標(biāo)溫度（例如:37℃）。

四．打開溫度控制器電源開關(guān)，在控制器的前端LED面板上會(huì)顯示相關(guān)的參數(shù)�？刂破髯疃嗫梢钥刂�4個(gè)通道的溫度設(shè)置，活細(xì)胞培養(yǎng)裝置上蓋和底板是可以加熱的，通常只需要占用前面兩個(gè)通道，I指示的內(nèi)部探頭的溫度，S指示的設(shè)定溫度，E指示的是外部探頭的溫度。例如我們希望活細(xì)胞培養(yǎng)皿內(nèi)的溫度為37℃，則我們可以通過調(diào)節(jié)上蓋（通道1）和低加熱板（通道2）的設(shè)定溫度，當(dāng)E指示的外部探頭溫度達(dá)到37℃，并能持續(xù)15分鐘保持不變。則校準(zhǔn)工作完成。

五．校準(zhǔn)工作完成后，記錄下上蓋（LID）和下加熱板（PLATE）的設(shè)定溫度。每次開始實(shí)驗(yàn)工作時(shí)，只需要將設(shè)定溫度保持在我們已經(jīng)校準(zhǔn)好的溫度，則可以認(rèn)為培養(yǎng)皿內(nèi)部實(shí)驗(yàn)環(huán)境的溫度可以保持在目標(biāo)溫度，例如37℃。此過程類似于在開展活細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)之前進(jìn)行的預(yù)實(shí)驗(yàn)。

六．倒置熒光顯微鏡活細(xì)胞培養(yǎng)模塊化設(shè)計(jì)，此設(shè)備可以兼容各大顯微鏡品牌，如果實(shí)驗(yàn)室有多臺(tái)不同品牌倒置顯微鏡，只需要一臺(tái)即可隨用隨裝，方便實(shí)用。如果有問題可以咨詢廣州科適特科學(xué)儀器有限公司的服務(wù)工程師。