CAR-T細(xì)胞治療質(zhì)量控制淺談

細(xì)胞治療，將改變?nèi)祟惣膊〉闹委煼绞�，由過(guò)去重復(fù)的癥狀控制轉(zhuǎn)為一次性的治愈，是引領(lǐng)生物醫(yī)學(xué)的希望。其中，嵌合抗原受體（CAR）T細(xì)胞療法是近年來(lái)發(fā)展非常迅速的一種細(xì)胞治療技術(shù)。

目前在全球已有兩款藥物獲得FDA的批準(zhǔn)上市，分別是諾華的Kymriah和凱特的YESCARTA，中國(guó)有多家公司產(chǎn)品進(jìn)入臨床申報(bào)或處于已獲批階段，這種療法已成為更多患者的選擇，CAR-T細(xì)胞制造過(guò)程符合全球監(jiān)管要求成為廣泛討論的話題。
 

1.細(xì)胞治療質(zhì)量控制分析

其中細(xì)胞質(zhì)量控制貫穿CAR-T從研發(fā)到臨床的所有步驟，但CAR-T作為“活”的藥物，其很多特性與傳統(tǒng)藥物有很大的差別，下表列舉了與傳統(tǒng)藥物的主要差異點(diǎn)：
 

第一個(gè)上市的CAR-T藥物Kymriah的釋放標(biāo)準(zhǔn)涉及到多個(gè)方面的指標(biāo)，下圖是小編收集到的Kymriah的釋放指標(biāo)所需要測(cè)試的實(shí)驗(yàn)：

KITE的YESCARTA的質(zhì)量控制也涉及到非常多的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，篇幅有限，就不一一列舉了，具體指標(biāo)可參考如下的鏈接：https://www.fda.gov/downloads/BiologicsBloodVaccines/CellularGeneTherapyProducts/ApprovedProducts/UCM584335.pdf

另一方面CAR-T制造工藝復(fù)雜，下圖列舉了CAR-T的制作流程，其中涉及到病毒轉(zhuǎn)染，外源物質(zhì)的引進(jìn)，長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)等因素，這勢(shì)必對(duì)質(zhì)量控制提出了巨大的挑戰(zhàn)。

2.細(xì)胞治療質(zhì)量控制原則及法規(guī)
基于以上原因，CAR-T細(xì)胞質(zhì)量控制特別強(qiáng)調(diào)制備工藝的穩(wěn)定性、多批次驗(yàn)證、全程質(zhì)控和按照SOP嚴(yán)格操作。要建立穩(wěn)定的質(zhì)量檢驗(yàn)和放行檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。

美國(guó)和歐洲出臺(tái)了相應(yīng)的法規(guī)來(lái)規(guī)范細(xì)胞治療的質(zhì)量控制，以下是國(guó)外針對(duì)細(xì)胞治療出臺(tái)的相關(guān)政策法規(guī)：

（大家如有需要，可至文末郵件索取資料）

在我國(guó)，細(xì)胞治療的國(guó)家主管部門是國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)（NHFPC）和國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局（CFDA），下圖是我國(guó)針對(duì)細(xì)胞治療出臺(tái)的相關(guān)政策法規(guī)：

以下以CTL019為例來(lái)分析細(xì)胞治療質(zhì)量控制策略，目前細(xì)胞治療產(chǎn)品的質(zhì)量控制分為四個(gè)大的方面，分別為安全性（Safety），純度（Purity），潛能性（Potency）以及均一性（Identity），這些質(zhì)量控制會(huì)貫穿CAR-T生產(chǎn)的不同階段，下圖列舉了這些檢測(cè)會(huì)在不同的階段開展。

這四個(gè)大方面的檢測(cè)再進(jìn)行細(xì)分，具體的實(shí)驗(yàn)如下圖：

3.生物學(xué)實(shí)驗(yàn)用于質(zhì)量分析帶來(lái)的挑戰(zhàn)

在這些實(shí)驗(yàn)中，大部分是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，生物學(xué)實(shí)驗(yàn)因?yàn)椴僮鞣椒�，樣本差異等因素�?huì)給結(jié)果帶來(lái)較大的波動(dòng)，也給這些方法向GMP轉(zhuǎn)移帶來(lái)了挑戰(zhàn)，同時(shí)這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范難以制定，以CAR-T的轉(zhuǎn)染效率測(cè)定為例，不同的人對(duì)流式細(xì)胞儀結(jié)果設(shè)門得到的差異會(huì)有較大的差異。

4.細(xì)胞治療質(zhì)量控制的基石實(shí)驗(yàn)--濃度、活率

細(xì)胞濃度活率測(cè)試方面，其是很多生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)，比如細(xì)胞生長(zhǎng)速率測(cè)定，細(xì)胞因子檢測(cè)，細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)檢測(cè)方面，細(xì)胞計(jì)數(shù)是這些實(shí)驗(yàn)的第一步，這一步如果錯(cuò)誤，那么結(jié)果波動(dòng)大是預(yù)料之中的。另外在在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，極為重要的一點(diǎn)是優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)條件。細(xì)胞的濃度，活率，結(jié)團(tuán)率，形態(tài)是了解反應(yīng)器中細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)的重要指標(biāo)�？偠�言之，CAR-T從細(xì)胞收集開始到最后的產(chǎn)品回輸，濃度活率一直是最關(guān)鍵的指標(biāo)之一。

既然濃度活率對(duì)于CAR-T整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程這么的重要，小編自作主張的調(diào)研和試用了市場(chǎng)上最暢銷的幾款細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，尤其衷愛我國(guó)自主研發(fā)生產(chǎn)的Countstar Rigel熒光細(xì)胞分析儀。不得不說(shuō)，這款產(chǎn)品的智能、精準(zhǔn)、合規(guī)滿足了小編對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀所有的想象。
 

智能

作為新時(shí)代年輕人，觸屏的使用已經(jīng)深入人心，這款產(chǎn)品的設(shè)計(jì)也讓小編有告別傳統(tǒng)PC時(shí)代，與科技進(jìn)步共發(fā)展的認(rèn)同感。

只需動(dòng)一動(dòng)手指，即可全自動(dòng)獲得細(xì)胞分析結(jié)果和圖像。高質(zhì)量的圖像可通過(guò)多點(diǎn)觸控放大或縮小，讓你看得真切，讓小編對(duì)結(jié)果的真實(shí)性不再懷疑。三分鐘檢測(cè)五個(gè)樣，用這樣的神器，老板再也不用擔(dān)心我的計(jì)數(shù)速度啦。

正是這款小小的熒光細(xì)胞分析儀其實(shí)具有大智慧。除細(xì)胞濃度活率檢測(cè)外，對(duì)于CarT細(xì)胞中效應(yīng)細(xì)胞毒性、細(xì)胞凋亡等測(cè)試這款儀器也能進(jìn)行很好的分析。

精準(zhǔn)

小編親測(cè)，使用AOPI活率檢測(cè)程序測(cè)試細(xì)胞濃度和活率，看一遍即會(huì)使用，5槽測(cè)試結(jié)果CV＜5%，線性R2＞0.99，多臺(tái)儀器間測(cè)試結(jié)果一致。多個(gè)地區(qū)，多類樣品，多個(gè)人開展測(cè)試，也不再擔(dān)心數(shù)據(jù)的一致性。

Countstar Rigel 的AOPI細(xì)胞活率測(cè)試，可用于全血的質(zhì)量評(píng)估，PBMC分離效率檢測(cè)，T細(xì)胞的培養(yǎng)狀態(tài)，T細(xì)胞的增殖率和活率，產(chǎn)品釋放質(zhì)量控制，在CarT細(xì)胞治療整個(gè)質(zhì)量控制過(guò)程均可使用。

合規(guī)

從美國(guó)藥典，F(xiàn)DA以及CFDA的法規(guī)來(lái)看，對(duì)細(xì)胞治療產(chǎn)品用于藥品，符合GMP規(guī)范進(jìn)行管理成為未來(lái)的趨勢(shì)。所以，小編對(duì)儀器最重要最基本的要求就是需要符合GMP/cGMP、數(shù)據(jù)審計(jì)追蹤、FDA 21 CFR PART 11。Countstar Rigel從設(shè)計(jì)到服務(wù)完全符合這個(gè)要求！同時(shí)，Countstar Rigel提供標(biāo)準(zhǔn)微珠顆粒、3Q驗(yàn)證服務(wù)，并且經(jīng)SGS專業(yè)測(cè)試驗(yàn)證，符合ISO14644 Class5（GMP B級(jí)）環(huán)境使用要求�？梢栽贕MP B+A級(jí)潔凈環(huán)境下放心使用。

據(jù)了解，Countstar（IC1000，BioMed）在全球已銷售2000多臺(tái)，在細(xì)胞治療行業(yè)有超過(guò)200個(gè)客戶，有超過(guò)10家用戶正在進(jìn)行臨床申請(qǐng)。Countstar 9年只做一件事，努力做最好的熒光細(xì)胞分析儀。Countstar Rigel是值得期待的，必以勢(shì)如破竹之勢(shì)，讓細(xì)胞質(zhì)量控制邁入智能時(shí)代，成為細(xì)胞治療“行業(yè)首選”。
 

相關(guān)法規(guī)可發(fā)郵件至marketing@countstar.cn 索取資料。