Sage Science Pippin HT 簡易操作手冊

 一 準(zhǔn)備樣品 
樣品的前處理： 
1.  DNA 樣品的離子強度要比緩沖液的低 
2.  DNA 樣品是去蛋白  
3. 上樣量不超過 1.5ug 
4. 了解待回收的 DNA 片段大小 
5.  20ul DNA 樣品（TE 溶解）+5ul marker/上樣緩沖液（3%、2%、1.5%），混勻
震蕩離心。0.75%預(yù)置膠 20ulDNA 樣品+5ul 上樣緩沖液，marker 一個泳道直接 25ul。
 
二 編程 
Protocol Editor 界面下: 1. 選擇新建 Protocol 2. 選擇預(yù)制膠種類 3. 設(shè)置回收的片段大小 4. 指定參考泳道（內(nèi)標(biāo)/外標(biāo)） 5. 默認(rèn)選擇“洗提完成后終止”。 

三 光學(xué)校正（Pippin HT 校正系數(shù)是 0.7） 
將光學(xué)校正板黑色一面朝下，放到泳道卡槽內(nèi)，點擊“校正”。每次實驗前都必
須要進行光路校正。 

四 準(zhǔn)備預(yù)制膠 
1 檢查預(yù)制膠 
a 檢查預(yù)制膠中緩沖液量，不足加滿。 
b 檢查凝膠柱是否斷裂  
c 檢查是否有氣泡 
2 準(zhǔn)備上樣 
a 排除洗提孔后面的氣泡 
b 撕掉密封條，將預(yù)制膠置于儀器槽內(nèi) 
c 從上方的每個緩沖液孔中吸走 80ul 緩沖液（3%、2%、1.5%預(yù)置膠）； 或者吸
走 150ul 緩沖液（0.75%預(yù)置膠）。 
d 清空洗提孔中的緩沖液, 加入 30ul 的新鮮緩沖液 
e 用膠帶封閉洗提孔 
f 檢查樣品孔溶液，不足時補滿至 40ul 
3 連續(xù)性檢查（測試電流。連續(xù)性跟溫度有關(guān)系，所以緩沖液要提前從冰箱中拿
出進行室溫平衡） 
五 上樣 
吸掉 30ul 緩沖液，加入 25ul 樣品，合上蓋。 
六 運行程序 
七 回收目的片段