賽默飛頂空氣相色譜分析血液中的乙醇
關(guān)鍵詞：HS-GC，乙醇，血液
引言
近幾年來,隨著我國機(jī)動車的保有量越來越大，駕駛機(jī)動車所引起的交通事故逐年增多，其中酒后或醉酒駕駛引起的交通事故占了很大一部分，且多為惡性事故，為公共安全帶來隱患。為此，我國《道路交通安全法》第九十一條規(guī)定，飲酒后駕駛機(jī)動車的，追究民事責(zé)任，而醉酒駕駛機(jī)動車的，由公安機(jī)關(guān)交通管理部門約束至酒醒，吊銷機(jī)動車駕駛證，依法追究刑事責(zé)任。按照標(biāo)準(zhǔn)，對于認(rèn)定酒后駕駛、醉酒駕駛，并不是根據(jù)行為人的意識狀態(tài)，而是根據(jù)血液中的酒精含量來確定：車輛駕駛?cè)藛T血液酒精含量大于或等于20mg/100mL，小于80mg/100m1的，屬于酒駕；血液酒精含量大于或等于80mg/100m1的，屬醉駕。目前，人體血液中酒精含量的準(zhǔn)確檢測，國際上采用頂空色譜法。隨著新《交通法》的實(shí)施，駕車者血醇含量的檢測日趨普遍，氣相色譜法定性及定量檢測血醇含量是唯一司法認(rèn)定的檢測手段。本文是基于《中華人民共和國公共安全行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》（GA/T849-2009）而開發(fā)的頂空氣相色譜法進(jìn)行的血液中的乙醇含量的檢測[1]。本方案檢測方法先進(jìn)，儀器配置合理，操作簡單，結(jié)果可靠，可供各級公安部門及司法鑒定中心參考。
實(shí)驗(yàn)部分
主要儀器設(shè)備與試劑
儀器：Trace GC 1310 氣相色譜儀（ThermoFisher），Triplus300頂空自動進(jìn)樣器。
試劑：叔丁醇， 乙醇；
樣品：人酒后血液樣品
對照液及供試液的配制
對照液：吸取10.04mL或稱取8.008g無水乙醇標(biāo)準(zhǔn)品置于100mL容量瓶中，添加純凈水至刻度，混勻，得8000mg/100mL乙醇儲備液，將儲備液逐級稀釋得到濃度為400mg/100mL的對照品儲備液。逐級稀釋對照儲備液，獲得系列濃度對照工作液，濃度分別為200mg/100mL、100mg/100mL、80mg/100mL、20mg/100mL、10mg/100mL。內(nèi)標(biāo)工作液：準(zhǔn)確稱取1.050g叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)品（含量不小于99.5%）置于500mL容量瓶中，添加純凈水至刻度，混勻，得200mg/100mL叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)使用液。
待測樣品及加標(biāo)回收率樣品的制備
吸取0.50mL待測全血兩份，分別加入樣品瓶內(nèi)，各加入0.10mL叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)使用液，密封混勻后，待進(jìn)樣。0.494mL待測全血，平行3份，分別添加6μL濃度為2000mg/100mL的乙醇標(biāo)準(zhǔn)使用液，再分別添加0.10mL叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)使用液，按上述方法平行操作。
樣品的測定
儀器條件見表 1。
結(jié)果
方法的線性關(guān)系
取2.2項(xiàng)下的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5mL，分別加入0.1mL的叔丁醇內(nèi)標(biāo)液，密封后混勻進(jìn)樣。由低濃度至高濃度依次進(jìn)樣檢測，以乙醇峰面積和內(nèi)標(biāo)叔丁醇峰面積比為縱坐標(biāo)，乙醇濃度為橫坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線線性回歸。結(jié)果表明，目標(biāo)物乙醇和內(nèi)標(biāo)叔丁醇峰形良好（圖1），在10mg/100mL～200mg/100mL范圍內(nèi)乙醇呈良好線性關(guān)系（R2=0.9993，見圖2）。
方法精密度和回收率的測定
按照2.3項(xiàng)下方法制備3份加標(biāo)樣品，密封后混勻進(jìn)樣，所得樣品圖見圖3，結(jié)果見表2，回收率范圍為91.32~115.40%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD，n=3）為2.55%�；厥章屎途芏葦�(shù)據(jù)結(jié)果見表3。
樣品檢測
取2.3項(xiàng)下的兩份樣品，放入頂空中檢測血液中乙醇的含量，兩份平行樣品的結(jié)果分別為98.79mg/100mL和102.18mg/100mL，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)取平均值，則在該樣品中，其酒精含量為100.49mg/100mL，可定為醉駕。
結(jié)論
本方法根據(jù)GA/T842-2009的步驟，結(jié)合Thermofisher的Triplus 300和Trace 1310氣相色譜儀，對血液中的酒精進(jìn)行檢測，且經(jīng)過驗(yàn)證，該方法簡便、快速、準(zhǔn)確；可供各級公安部門及司法鑒定中心參考。
參考文獻(xiàn)
[1] GA/T842-2009 中華人民共和國公共行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 血液酒精含量的檢驗(yàn)方法
