氣相色譜法檢測(cè)中藥材中二氧化硫

關(guān)鍵詞

氣相色譜儀；二氧化硫； TCD 檢測(cè)器

目標(biāo)

采用賽默飛氣相色譜儀重現(xiàn) 2015 版中國(guó)藥典中藥材中二氧化硫的檢測(cè)（第三法）

引言

使用硫黃熏蒸是一些中藥材產(chǎn)地粗加工過(guò)程中的一種習(xí)用方法， 目的在于防霉、 防腐和干燥等。 目前尚無(wú)簡(jiǎn)便易行且有效的替代方法。 由于二氧化硫是一種較強(qiáng)的還原劑， 在導(dǎo)致中藥藥材本身有效成分發(fā)生改變的同時(shí)，也有可能影響中藥材的質(zhì)量和療效。 再者， 藥材中若二氧化硫含量過(guò)高， 會(huì)引致服用者產(chǎn)生咽喉疼痛， 胃部不適等癥狀 ^[1,2]。

為防止中藥材粗加工過(guò)程中濫用或者過(guò)度使用硫黃熏蒸的問(wèn)題， 保證中藥質(zhì)量和安全有效， 國(guó)家藥典委員會(huì)在2003 年就已立項(xiàng)對(duì)中藥材及飲片中的二氧化硫殘留量測(cè)定方法和限量進(jìn)行研究， 其測(cè)定方法在 2005 年版《中國(guó)藥典》 增補(bǔ)本中開(kāi)始收載。 在即將實(shí)施的 2015 版藥典中對(duì)二氧化硫的檢測(cè)方法亦給出指導(dǎo)， 并首次將氣相色譜儀檢測(cè)法作為二氧化硫檢測(cè)的第三法。

本方法旨在采用賽默飛氣相色譜聯(lián)用儀重現(xiàn) 2015 版藥典的方法， 為用戶提供參考。

儀器

Trace1310 氣相色譜儀， 配 TCD 檢測(cè)器（Thermo Scientific）；
RSH 三合一自動(dòng)進(jìn)樣器（Thermo Scientific）
恒溫水浴鍋（Thermo Scientific）

耗材

色譜柱： GS-GASPRO, 30 m, 0.32 mm

試劑與標(biāo)準(zhǔn)品

固體石蠟： 病理級(jí)
優(yōu)級(jí)純： 亞硫酸鈉、 鹽酸、 甘露醇、 乙二胺四乙酸二鈉

實(shí)驗(yàn)條件

RSH 三合一自動(dòng)進(jìn)樣器， 頂空進(jìn)樣方式
平衡溫度和時(shí)間： 80℃， 10 min
進(jìn)樣針溫度： 105℃
色譜柱： GS-GASPRO（30 m×0.32 mm）；
柱溫： 50℃（0 min）， 15℃ / min 到 2000℃（2 min）；
進(jìn)樣模式： 分流進(jìn)樣， 分流比 5 : 1；
進(jìn)樣口溫度： 150℃；
載氣： 氮?dú)猓?9.999%）， 恒流模式， 2.0 mL/min；
TCD 檢測(cè)器溫度： 250℃， 參考?xì)饬魉伲?1.0 mL/min， 負(fù)極性檢測(cè)

對(duì)照液及供試液的制備

對(duì)照品溶液的制備精密稱取亞硫酸鈉對(duì)照品500mg，置10ml量瓶中，加入含0.5%甘露醇和0.1%乙二胺四乙酸二鈉的混合溶液溶解，并稀釋至刻度，搖勻，制成每1ml含亞硫酸鈉50.0mg的對(duì)照品儲(chǔ)備液。分別精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液0.4、0.6、1.0、2.0ml，置10ml量瓶中，用含0.5%甘露醇和0.1%乙二胺四乙酸二鈉的溶液分別稀釋成每1ml含亞硫酸鈉2，3，5，10mg的對(duì)照品工作溶液。

分別準(zhǔn)確稱取1g氯化鈉和1g固體石蠟（熔點(diǎn)52～54℃）于20ml頂空進(jìn)樣瓶中，精密加入2mol/L鹽酸溶液2mL，將頂空瓶置于60℃水浴中，待固體石蠟全部溶解后取出，放冷至室溫使固體石蠟?zāi)�固密封于酸液層之上（必要時(shí)用空氣吹去瓶壁上冷凝的酸霧，分別精密量取上述2，3，5，10mg/ml的對(duì)照品工作溶液各100μl置于石蠟層上方，密封，即得。

供試品溶液的制備 分別準(zhǔn)確稱取 1 g 氯化鈉和 1 g 固體石蠟（熔點(diǎn)52～54℃）于20ml頂空進(jìn)樣瓶中，精密加入2mol/L鹽酸溶液2mL，將頂空瓶置于60℃水浴中，待固體石蠟全部溶解后取出，放冷至室溫使固體石蠟重新凝固，取樣品細(xì)粉約0.2g，精密稱定，置于石蠟層上方，密封，即得。

線性與結(jié)果

分別進(jìn)空白，標(biāo)準(zhǔn)工作液（2mg/ml）及樣品，所得的色譜圖見(jiàn)圖1.。將上述標(biāo)準(zhǔn)溶液由低到高依次進(jìn)樣，得到二氧化硫的標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖2.。將樣品結(jié)果代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，所得的結(jié)果乘以0.5079，即得中藥材中二氧化硫的含量，根據(jù)圖1結(jié)果可以看出黃柏中未檢出二氧化硫。本實(shí)驗(yàn)中之所以采用RSH三合一自動(dòng)進(jìn)

樣器，是因?yàn)槿缛舨捎脗鹘y(tǒng)的閥進(jìn)樣頂空來(lái)進(jìn)二氧化硫，由于二氧化硫本身具有較強(qiáng)的還原性，在氣體傳輸過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生反應(yīng)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確，而采用氣密針的進(jìn)樣方法則無(wú)此問(wèn)題。