啟文生物雜交瘤技術(shù)平臺的優(yōu)化策略

雜交瘤技術(shù)仍然是單克隆抗體發(fā)現(xiàn)的主要技術(shù)，尤其是在治療性抗體藥物治療領(lǐng)域，相比噬菌體、酵母等非天然文庫，具有成藥性好、特異性強等特點。由于雜交瘤獲得的單克隆抗體，系經(jīng)過哺乳動物細胞自然進化篩選獲得的序列，因此其通常不會遇到表達困難、產(chǎn)量低、非特異性結(jié)合等問題。

雜交瘤技術(shù)具有以下挑戰(zhàn)：
1. 對于免疫原性低的抗原，抗體滴度低、難以產(chǎn)生中和抗體；
2. 融合效率低、難以獲得低豐度存在的克�。�
3. 抗體親和力低、表位分布局限。

針對以上局限性，啟文生物提出了以下優(yōu)化方案：

1. 針對低免疫原性抗原，免疫增強佐劑提高抗體效價

方法：我們的免疫增強佐劑在CFA等傳統(tǒng)佐劑的基礎(chǔ)上拓展T細胞的抗原表位識別，進而擴展抗體的表位

結(jié)果：多次試驗表明，初始免疫后，效價可提高5~10倍。

2. 針對融合時陽性率較低的現(xiàn)象，陽性克隆佐劑增強B細胞豐度

方法：在Pre-fusion boost階段，我們的陽性克隆佐劑可以增強陽性克隆在B細胞中的豐度，通過提高陽性率，從而幫助融合到稀有的克隆

結(jié)果：多次試驗表明，對于大多數(shù)抗原，改方法可以提高陽性率3~5倍。

3.專用培養(yǎng)體系提高融合效率

方法：我們提供經(jīng)馴化的小鼠SP2/0細胞和雜交瘤細胞專用培養(yǎng)血清。對于結(jié)合先進的電融合技術(shù)來說，我們自產(chǎn)的電融合緩沖液的實驗效果和進口產(chǎn)品相當。

結(jié)果：根據(jù)客戶反饋，融合效率最高可達1 : 1000，通�？梢宰龅�1 : 4000以上。如果結(jié)合融合處理液一起使用，可以進一步提高融合效率（融合效率提升3~5倍）。

4.  雜交瘤細胞增強培養(yǎng)基提高克隆生長率

方法：在雜交瘤細胞電融合之后的克隆篩選和生長階段，我們提供雜交瘤細胞增強培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基含有多種促進雜交瘤細胞生長的細胞因子。

結(jié)果：可以提高克隆生長率近10倍。

對于聚乙二醇法和電融合法來說，我們的大多數(shù)試劑都是通用的。具體種類如下表所示：

相關(guān)試劑圖片：