單抗制備、血細(xì)胞純化、細(xì)胞器分離的離心條件選擇

單抗制備、血細(xì)胞純化、細(xì)胞器分離的離心，你做對(duì)了嗎？

通用離心機(jī)在各行業(yè)應(yīng)用得非常廣泛。目前在科研單位應(yīng)用比較多的離心機(jī)產(chǎn)品有高速離心機(jī)、血液離心機(jī)、細(xì)胞離心機(jī)等，種類繁多，功能也不盡相同。不同試驗(yàn)需要不同的離心條件，經(jīng)常需要對(duì)細(xì)胞懸液離心，以增加細(xì)胞濃度或洗除有關(guān)試劑，可調(diào)節(jié)的臺(tái)式離心機(jī)就能滿足大多試驗(yàn)的需求，那么本文簡(jiǎn)單介紹一下在單抗制備、血細(xì)胞純化、細(xì)胞器分離這3個(gè)試驗(yàn)中如何合理的使用離心機(jī)。

單抗制備

單克隆抗體技術(shù)一種免疫學(xué)技術(shù)，將產(chǎn)生抗體的單個(gè)B淋巴細(xì)胞同骨髓腫瘤細(xì)胞雜交，獲得既能產(chǎn)生抗體，又能無(wú)限增殖的雜交細(xì)胞，并以此生產(chǎn)抗體。此技術(shù)廣泛應(yīng)用于疾病診斷、治療及多個(gè)行業(yè)的測(cè)試診斷�？贵w制備的每個(gè)步驟都需要使用到離心機(jī)，合理的離心條件是獲取單克隆單體的有效保障。

 1、免疫原可以有多種：細(xì)胞、細(xì)胞提取物、純化蛋白、融合蛋白、多肽、糖類、脂類或DNA等。細(xì)胞作為免疫原時(shí)轉(zhuǎn)速應(yīng)為600 rpm/min~1000 rpm/min，室溫離心5 min~10 min，轉(zhuǎn)速過(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞沉降過(guò)少，轉(zhuǎn)速過(guò)高會(huì)引起細(xì)胞破碎。純化蛋白、融合蛋白作為免疫原時(shí)轉(zhuǎn)速應(yīng)為10000 rpm/min~15000 rpm/min，4℃離心20~45 min。

  2、細(xì)胞融合、細(xì)胞篩選及細(xì)胞凍存的過(guò)程中，轉(zhuǎn)速600 rpm/min~1000 rpm/min，室溫離心5 min~10 min即可。

血細(xì)胞純化

血細(xì)胞由多種類型的細(xì)胞懸液組成，每種細(xì)胞都有它們自身的特性和功能并廣泛被用于醫(yī)學(xué)臨床和診斷。多年來(lái)研究人員對(duì)血細(xì)胞分離純化作了大量工作，實(shí)驗(yàn)室研究和血液成分分離都已廣泛使用各種離心設(shè)備。下面我們將以實(shí)驗(yàn)室研究為主線，舉例說(shuō)明各種血細(xì)胞分離離心條件：

1、單核（白）細(xì)胞的純化需要1800 rpm/min ~3000 rpm/min，20℃離心15 min~20 min（不要在0~5℃低溫離心，否則分離效果將很差）。在洗滌的過(guò)程中可以使用1000 rpm/min ~1300 rpm/min，20℃ 離心5 min。

2、人血中分離紅細(xì)胞，單核（白）細(xì)胞，中性（白）細(xì)胞需要1500 rpm/min～1600 rpm/min，18℃～23℃ 離心35 min，離心過(guò)程中溫度過(guò)高、離心力過(guò)大或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都可能使中性（白）細(xì)胞沉淀。

細(xì)胞器分離

細(xì)胞器分離是研究如細(xì)胞核、線粒體、高爾基體、溶酶體和微體，以及各種大分子基本手段。通常會(huì)使用各種物理方法如研磨、超聲破碎、低滲將組織制成均漿，然后利用差速離心和密度梯度離心來(lái)獲取細(xì)胞器，那下面我們來(lái)簡(jiǎn)單的了解一下不同細(xì)胞器的離心條件：

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