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幾種常用的滅菌方法匯總

瀏覽次數(shù):4885 發(fā)布日期:2019-2-27  來源:國家標準物質資源平臺
幾種常用的滅菌方法匯總
物理滅菌法
(一)加熱滅菌法
加熱可破壞微生物中酶、蛋白質和核酸,導致微生物死亡。加熱滅菌又分干熱滅菌法和濕熱滅菌法。在同一溫度下,濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好。主要是因濕熱滅菌時,有水分存在,蛋白質容易變性。水分又易使微生物膜壁潤濕,濕熱的穿透力比干熱大。
干熱滅菌法  常用的有火焰滅菌法與干熱空氣滅菌法兩種。
(二)紫外線滅菌法
是指用紫外線照射殺滅微生物的方法。一般用于滅菌的紫外線波長是200~300nm,滅菌力最強的波長是253.7nm。紫外線作用于核酸蛋白促使其變性,同時空氣受紫外線照射后產(chǎn)生微量臭氧,從而起共同殺菌作用。紫外線進行直線傳播,可被不同的表面反射,穿透力微弱,但較易穿透清潔空氣及純凈的水。因此本法適用于照射物體表面之滅菌、無菌室的空氣及水的滅菌;不適用于藥液的滅菌、固體物質深部的滅菌;普通玻璃可吸收紫外線,因此裝于玻璃容器中的藥物不能用此法滅菌。紫外線對人體照射過久,會發(fā)生結膜炎,紅斑及皮膚燒灼等現(xiàn)象,故一般在人入室前開啟紫外線燈1~2小時,關閉后人才進入潔凈室。如果必須在人進去后仍要開紫外線滅菌,則人的皮膚及眼睛應有有效的防護措施。一般在6~15m3的空間可裝置30瓦紫外線燈一盞,離地面2.5~3m為宜。
用紫外線照射滅菌時要注意下列問題:
1、紫外線的殺菌力,隨使用時間增加而減退,一般使用時間達到額定時間70%時應更換紫外線燈管,以保證殺菌效果。國產(chǎn)紫外線燈平均壽命一般為2000h。
2、紫外線的殺菌作用隨菌種不同而不同,殺霉菌的照射量要比殺桿菌大40~50倍。
3、紫外線照射通常按相對濕度為60%的基礎設計,室內(nèi)濕度增加時,照射量應相應增加。
4、紫外線滅菌效果與照射的時間長短有關,這需要通過驗證來確定照射時間。
5、紫外照射燈的安裝形式及高度,應根據(jù)實際情況,參考使用說明決定。
滅菌方法的驗證采用生物指示劑挑戰(zhàn)試驗,生物指示劑多用枯草芽孢桿菌。
(三)微波滅菌法
微波是指頻率在30~3000MHz之間的電磁波。水可強烈地吸收微波,使其極性分子轉動,分子間的磨擦而生熱,且升溫迅速,靠熱力而滅菌。在數(shù)十秒至幾分鐘之內(nèi)可達100~150℃,并全部殺死液體中的微生物,適于水溶性注射液的滅菌。另外,固體藥材飲片及固體制劑(丸劑、散劑、膠囊粉等)也含少量水分,微波能穿透到固體內(nèi)部,由表至里被均勻加熱,而起干燥、滅菌的作用。多用于口服液體制劑的滅菌,有望用于注射液的滅菌。但可能對某些藥品的PH值、含量、顏色有影響。
(四)輻射滅菌法
輻射滅菌是應用γ射線、β射線殺滅細菌的方法,又稱電離輻射,前者由鈷-60或銫-137發(fā)出,穿透力強;后者由電子加速器產(chǎn)生,帶電荷,穿透力弱,滅菌效果差。
化學滅菌法
化學滅菌法系指用化學藥品來殺滅微生物的方法。同一種化學藥品的低濃度時呈現(xiàn)抑菌作用,而在高濃度時則能起殺菌作用。其殺菌機理可能是:能使微生物蛋白質變性死亡,或與酶系統(tǒng)結合影響代謝,或改變膜壁通透性使微生物死亡等。常用的方法有消毒劑消毒法和化學氣體滅菌法等。
(一)消毒劑消毒法
消毒是指殺死病原微生物的方法。但化學消毒劑大多僅能殺死微生物的繁殖體而不能殺死芽孢,能控制一定范圍的無菌狀態(tài)?蓪⑾緞┡涑蛇m宜濃度,采用噴淋、涂擦或浸泡等方法對物料、環(huán)境、器具等進行消毒。常用的化學消毒劑有0.1%~0.2%苯扎溴銨溶液、3%~5%的酚或煤酚皂溶液、75%乙醇等。常用于物體表面滅菌。但要注意其濃度不要過高,以防止化學腐蝕作用。潔凈室的墻面、天花板、門窗、機器設備、儀器、操作臺、車、桌、椅等表面以及人體雙手(手套)在環(huán)境驗證及日常生產(chǎn)時,應定期清潔并用消毒劑噴灑,無菌室用的消毒劑必須在層流工作臺中,用0.22μm的濾膜過濾后方能使用。
(二)化學氣體滅菌法
系指利用化學藥品的氣體或產(chǎn)生的蒸汽進行殺滅微生物的方法。
⒈環(huán)氧乙烷滅菌法  
環(huán)氧乙烷滅菌法是利用環(huán)氧乙烷氣體進行殺菌的方法。它是一種傳統(tǒng)的滅菌方法,可應用于工衣滅菌、不耐加熱滅菌的藥品、醫(yī)用器具、設施、設備等的滅菌。
環(huán)氧乙烷滅菌系統(tǒng),主要有下列四項互相制約的重要因素影響滅菌效果:
①溫度;②濕度;③氣體濃度;④滅菌時間。
因為環(huán)氧乙烷是易燃易爆物質,明火可以引起燃燒,同時由于氣體分解還可能引起爆炸,環(huán)氧乙烷滅菌中應十分注意安全問題。
⒉甲醛等蒸汽熏蒸法  
采用甲醛、丙二醇或過氧醋酸等化學品,通過加熱產(chǎn)生蒸汽進行空氣環(huán)境滅菌。
(1)、計算房間體積,按10g/m3的比例稱出甲醛。
(2)、將甲醛倒入甲醛發(fā)生器或加熱盤或燒杯中,并放好加濕用水,必要時還需加入高錳酸鉀(2~3g/m3),然后加熱(甲醛發(fā)生器用蒸汽加熱,加熱盤或燒杯用熱水盛入其中加熱)使其蒸發(fā)成氣體。
(3)、滅菌流程:空調器停止運轉→啟動甲醛氣體發(fā)生器或在加熱盤中加熱甲醛  →讓甲醛氣體擴散約30分鐘→啟動空調器讓甲醛氣體循環(huán)約30分鐘→停止空調器,房間熏蒸消毒,時間不少于8小時→ 房間排氣,用新鮮空氣置換約2小時→ 恢復正常運行。
當相對濕度在65%以上,溫度在24~40℃時,甲醛氣體的消毒效果最好。
⒊臭氧消毒法
臭氧(O3)的消毒原理是:臭氧在常溫、常壓下分子結構不穩(wěn)定,很快自行分解成氧(O2)和單個氧原子(O),后者具有很強的活性,對細菌有極強的氧化作用,臭氧氧化分解了細菌內(nèi)部氧化葡萄糖所必須的酶,從而破壞其細胞膜,將其殺死。多余的氧原子則會自行重新結合成為普遍氧分子(O2),不存在任何有害殘留物,故稱為無污染消毒劑。它不但對種種細菌(包括肝炎病毒、大腸桿菌、綠膿桿菌及雜菌等)有極強的殺滅能力,而且對霉菌也很有效。
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